The author studied on the effects of X-ray irradiation to the development of periodontal ligament in gestation rats. They were irradiated in their abdomen with 100, 200 and 300 rads respectively in one shot irradiation with deep radiation therapy equipment (MAXIMAR 250-Ⅲ), In 7th, 14th, 21th and 28th day after delivery, those new born rats were respectively sacrificed with ether anesthesia and removed of their mandibles. After removal, those mandibles were fixed in 10% neutral buffer formalin, decalcified with 5% trichloroacetic acid for 5 days and embedded with paraffine. Staining was performed with H-E, Van Gieson, Mallory azan, Bielshowsky-Gomori silver stain and Halmi's oxytalan fiber stain. The results were as follows: 1. Before tooth eruption, all the fiber: components in dental sac were almost always oriented near the outer enamel epithelial \layer. But in irradiated new born rats, those collagen fiber orientation was more irregular than those of control groups, and this phenomenon was more severe in proportion to the amount of irradiation in the gestation period. 2. Before tooth eruption, the connective tissue fibers in periodontal ligament were stained with lighter in the irradiated groups than those of control groups. Oxytalan fibers of irradiated groups were thin and splitting pattern of their fiber morphology to compare with those of control groups. 3. After tooth eruption, the periodontal ligament fibers of irradiated groups were oriented functionally and their morphology was thick, fine and heavy staining. Oxytalan fibers were revealed with oblique parallel arrangement in the periodontal ligament of irradiated groups.
Hyperelastic constitutive equations for nonlinear deformation of the periodontal ligament were investigated. The parameters in the strain energy potentials were obtained from experimental data for uniaxial and shear responses of the human periodontal ligament. The hyperelastic constitutive equations based on two strain energy potentials was also compared with the linear elastic equation, which is recently reported. The best fitted parameters in the strain energy potentials was applied to finite element program (ABAQUS) to simulate special orthodontic treatment of a mandibular canine.
In this study, two dimensional and three dimensional finite element models of lower first premolar were analyzed. The mandibular specimen including a premolar was obtained from a cadaver and scanned with micro-CT. Finite element method models were reconstructed from CT images at mid-sagittal plane of the tooth. Most studies have used a wide range of value(0.07${\~}$1000MPa) for elastic modulus of periodontal ligament. The elastic modulus of the periodontal ligament was analyzed by finite element method and compared with that of experiment model. This study indicated that the model without pulp was more suitable than that with pulp in two dimensional finite element analysis.
BMP can induce ectopic bone formation when implanted into sites such as rat muscle and can greatly enhance healing of bony defects when applied exogenously. In addition, BMP stimulated osteoblastic differentiation in vitro in various types of cells. The aim of this study was to investigate the effect of recombinant human bone morphogenetic protein(rhBMP-2) on the proliferation and osteoblastic differentiation of human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts. The cell number and alkaline phosphatase activity were measured in 3 experimental groups of human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts (control group, rhBMP-2 50ng/ml group, and rhBMP-2 100ng/ml group) at 1 and 2 weeks after culture. At the same time, total RNA of cultured cells were extracted and reverse trascription polymerase chain reaction(RT-PCR) was performed to determine the expression of mRNA of bone matrix protein. RhBMP-2 had no effect on the cell proliferation of human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts. Alkaline phosphatase activity was elevated significantly by rhBMP-2 in both cells. And periodontal ligament cells showed significantly higher alkaline phosphatase activity than gingival fibroblasts. ${\beta}$-actin, type I collagen, alkaline phosphatase, BMP-2 mRNA were expressed in all of the samples. Osteopontin, osteocalcin mRNA were expressed in all periodontal ligament cell groups, and rhBMP-2 50ng/ml group, rhBMP-2 100ng/ml group of 2 week culture period of gingival fibroblasts. Bone sialoprotein mRNA was only expressed in rhBMP-2 50ng/ml group and rhBMP-2 100ng/ml group of 2-week culture period. These results suggest that rhBMP-2 stimulates osteoblastic differentiation in human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts in vitro.
The enamel matrix derivative (EMD) has been recently used in the periodontal regenerative techniques. The present study was established to investigate the influence of EMD on human periodontal ligament cells using expression of mRNA of periodontal ligament specific gene (PDLs)17, PDLs22, type I collagen when EMD applied to periodontal ligament cells. Periodontal ligament cells were obtained from a healthy periodontium and cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) plus 10% fetal bovine serum and ${\beta}-glycerophosphate$ with ascorbic acid. Test groups were two; One adds EMD in culture media and another added EMD and Dexamethasone (DEX) in culture media. Positive control group added DEX in culture media, and negative control group adds niether of EMD nor DEX. $Emdogain^{(R)}$ (Biora, Sweden, 30 mg/ml) was diluted by 75 ${\mu}g/ml$ concentration to culture media. For reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), total RNA isolated on days 0, 7, 14 and 21. mRNA of PDLs17 was expressed on days 14 and 21 in EMD or DEX group, and expressed on days 7, 14 and 21 in EMD plus DEX group, the other side, expressed on days 21 in negative control group. mRNA of PDLs22 expressed on days 7, 14 and 21 in EMD group, and expressed on days 14 and 21 in DEX group, and expressed on days 7, 14 and 21 in EMD plus DEX group. Negative control group expressed on days 14 and 21. Type I collagen was expressed on all days and all groups. These results indicate that EMD promotes differentiation of periodontal ligament cells, and this is considered to offer basis that can apply EMD to periodontal tissue regeneration technique.
Diabetes mellitus is a systemic disease with profound effects on oral health and periodontal wound healing. Uncontrolled diabetes adversely affects surgical wound healing and is often associated with abnormal proliferation of fibroblasts. Human gingival fibroblasts and PDL cells were chosen because they are intimately involved in periodontal therapy and are important for the success of surgical procedure such as guided tissue regeneration. The aim of the present study was to elucidate whether cellular activity and collagen synthesis by glucose pre-treated human gingival fibroblasts and PDL cells are influenced by insulin, and whether healthy cells differ from glucose treated cells. Cells were cultured with DMEM at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$, 100% humidified incubator. To evaluate the effect of glucose on gingival fibroblasts and periodontal ligament cells, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4\;cells/well$ culture plates and treated with 20 and 50mM of glucose for 5 days. Then MTT assay was carried out. To evaluate the effect of insulin on glucose-pretreated cells, the cells were seeded at a cell density of $1{\times}10^4\;cells/well$ culture plates and treated with 20 and 50mM of glucose for 5 days. After incubation, $10^3$, $10^4$ and $10^5mU/l$ of insulin were also added to the each well and incubated for 2 days, respectively. Then, MTT assay and collagen synthesis assay were carried out. The results indicate that cellular activity of gingival fibroblasts significantly increased by glucose while periodontal ligament cells were unaffected and cellular activity of gingival fibroblasts and periodontal ligament cells were unaffected by insulin. Collagen synthesis of gingival fibroblast with 20mM glucose and insulin unaffected, but 50mM glucose and insulin increased than control. Collagen synthesis of periodontal ligament cell with 20mM glucose and $10^5mU/l$ insulin significantly increased than other groups and 50mM glucose pretreated PDL cells significantly increased at $10^3mU/l$ insulin but decreased at $10^4mU/l$ insulin. Our findings indicated that these cell types differed in their growth response to glucose, and the increase in collagen synthesis was significantly raised at insulin level of $10^3mU/l$ in gingival fibroblasts and periodontal ligament cells except 20mM glucose pretreated periodontal ligament cells.
Objective: To three-dimensionally elucidate the effects of occlusal hypofunction on the periodontal ligament and alveolar bone proper of rat molars by micro-computed tomography (micro-CT). Methods: Occlusal function in the molar area was restricted by attaching an anterior bite plate on the maxillary incisors and a metal cap on the mandibular incisors of 5-week-old male Wistar rats for 1 week. The periodontal ligament space and alveolar bone proper around roots of the mandibular first molar were assessed by histology and micro-CT. Results: The periodontal ligament space was narrower and the alveolar bone proper was sparser and less continuous in the hypofunction group than in the control group. Further, both the volume of the periodontal ligament and the volumetric ratio of the alveolar bone proper to the total tissue in the region of interest were significantly lower in the hypofunction group (p < 0.05). Conclusions: Occlusal hypofunction induces atrophic changes in the periodontal ligament and alveolar bone proper of rat molars.
교정적 치아이동과 밀접한 관련이 있는 치주인대세포에서, 산화질소가 세포의 증식과 분화에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 인간 치주인대세포를 분주한 후에 산화질소의 donor인 SNP의 농도에 따라 실험군을 구분하고, 세포 활성 염기성 인산분해효소 활성, Western blot 분석을 통한 osteonectin과 bone sialoprotein의 발현 정도를 측정하였다. 0.2 mM 이하의 저농도 SNP를 처리한 실험군에서 대조군과 비교하여 세포 활성, 염기성 인산분해 효소의 활성, 그리고 osteonectin과 bone sialoprotein의 발현이 유의하게 증가하였다. 그러나 1 mM 이상의 고농도 SNP를 처리한 실험군에서는 오히려 감소하였다. 산화질소는 인간 치주인대세포에서 저농도는 세포의 증식과 분화에 촉진 효과를, 고농도는 억제 효과를 보이는 biphasic effect를 갖는다.
The purpose of this study was to observe the effects of the periodontal ligament on the healing and the formation of alveolar bone in the extraction socket, when this ligament had artificially remained in the socket during the tooth removal. Twenty rats aged 4 weeks were used and devided into the control groups (10) and the experimental groups (10) in this study. The maxillary right and left first molars were extracted in both groups. In the experimental groups the periodontal ligament was remained in the extraction sockets using 0.4% ${\beta}-aminopropionitrile$, and in the control the periodontal ligament was completely removed by curettage. At 1, 3, 5, 7 and 14 days after the tooth extraction, rats in both groups were serially sacrificed. And the specimens were prepared with Hematoxylin-Eosin stain for the light microscopic evaluation. The results of this study were as follows ; 1. On 1 day, the periodontal ligament was only found in the extraction socket walls of the experimental groups, and there was not the distinguishable difference between the control and the experimental groups. 2. On 3 days, there were more collagen fibers and the appearance of higher cellular density in the experimental groups than in the control. And the cells and collagen of the periodontal ligament were so actively proliferated and synthesized that invaded into the connective tissue of the extraction sockets in the experimental groups. 3. In the experimental groups, the trabecular bone was formed on the basal and lateral bone surface on 5 days. However, there was not the new bone forming appearance in the control groups at this time. 4. On 7 days, the trabecular bone was formed in the control groups. 5. On 14 days, the extraction sockets were almost entirely filled with the bony trabeculae in both groups. But, compared to the control group, the experimental groups showed the prominent differences in the amount & the density of the new bone formed. In conclusion, it was suggested that the residual periodontal ligament tissue in the extraction socket will play a major role as the important cell source in the healing and the new bone formation of the extraction socket.
Periodontitis is a chronic infectious disease that leads to periodontal destruction, and is one of the major causes of tooth loss in humans. The osteoclast differentiation factor (ODF), which is also known as the receptor activator of the NF-kB ligand (RANKL), is a surface-associated ligand on bone marrow stromal cells and osteoblasts. RANKL activates its cognate receptor, RANK, on osteoclast progenitor cells, which leads to the differentiation of mononucleated precursor cells. Osteoprotegerin (OPG) is a decoy receptor that is released from stromal cells and osteoblasts to inhibit the interaction between RANKL and RANK. Although the precise mechanism of bone loss in periodontitis is unknown, the differentiation and activation of osteoclasts by OPG-ODF-RANK signaling might play the role in periodontal bone destruction. The relationship between the concentration of sex hormones and the expression of ODF and OPG was examined by treating human gingival fibroblasts and periodontal ligament cells with the normal serum concentration of estrogen or progesterone during menstruation or at menopause. The ODF/OPG relative ratio was elevated at the concentration observed during ovulation in human gingival fibroblasts and at the concentration observed between ovulation and menstruation in periodontal ligament cells treated with estrogen. However, the ratio was <1 at all concentrations in both cells treated with progesterone. In the case of menopause simulated by estrogen depletion, the ratio was <1 in human gingival fibroblasts but >1 in periodontal ligament cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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