An in vitro model providing with a recirculating perfusion apparatus using an isolated canine heart and its autogenous blood, which was prepared for study of myocardial protection method. This apparatus was easily used by quick connect system and maintained well heart function for about 2 hours. The Langendorff perfusion was initiated for a 10 minute period by introducing perfusate at 37` into the aorta from aortic reservoir located 100 cm above the heart. The isolated perfused working canine heart model was a left heart preparation in which oxygenated perfusion medium [at 37K] entered the cannulated left atrium at a constant flow rate [900ml/ min] under 20 mmHg overflow system and was spontaneously ejected[no electrical pacing] via an cannula against a hydrostatic pressure of 80 cm H2O. During this working period, various indices of cardiac function were measured. The cardiac functions were stable for over 2 hours with perfusion of Krebs-Henseleit solution and autologous blood[1:1] mixture in volume and maintained heart rate ]]3-122/bpm peak systolic pressure 109-113 mmHg, cardiac output 900 ml / min and left atrial mean pressure 8-9 mmHg. In this model, the efficiency of myocardia] protection could be easily measured by means of functional, enzymatic, biochemical and ultrastructural assessment. And also, we believe this model to be a useful assessment screening model of recovery state after long duration of myocardial preservation of donor heart without difficult transplantation procedures.
We have modified an isolated perfusion rat heart model of cardiopulmonary bypass, with which we are able to screen the effects of various cardioplegic solutions and hypothermia upon the ability of the heart to survivie during and recover from period of ischemic arrest. The modified experimental model was differed from the original as follow : a heat coil chamber of atrial and aortic reservoir provided temperature control, and the perfusate was gassed with each pure oxygen and pure carbon dioxide in 95:5 ratio. The Langendorff perfusion was initiated for a 10 minute period by introducing perfusate at $37^{\circ}C.$ into the aorta from the aortic reservoir located 100 cm above the heart. The isolated perfused working rat heart model was a left heart preparation in which oxygenated perfusion medium (at $37^{\circ}C.$) entered the cannulated left atrium at a pressure of 20 cm $H_{2}O$ and was passed to the ventricle, from which it was sponeously elected(no electrical pacing) via an aortic cannula, against a hydrostatic pressure of 100cm $H_{2}O$. during this working period various indices of cardiac functin were measured. The cardiac functions were stable for over 3 hour with perfusion of Krebs-Henseleit bicarbonate buffer solution containing only glucose (11.1 mM/L). The percentage of cardiac functins were maintained about 94% on heart rate, 80.6% on peak aortic pressure, 87.7% on coronary flow and 76.3% on aortic flow rate after 3 hour of working heart perfusion at a pressure of 20 cm $H_{2}O$. We believe this preparation to be a good biochemical model for the human heart which offers many advantages including economic, speed of preparation, reproducibility, and the ability to handle large numbers.
Pulsatile Extracorporeal Membrane Oxygenation(ECMO) can mitigate the heart load and raise the patient's blood perfusion. But If the ECMO pulsate the blood flow during the systolic period, It can burden to the patient's heart. To avoid the heart injury, we have to consider the relation between output of ECMO, hemodynamic states and heart movement. To raise the efficacy of the pulsatile ECMO, we investigated the coronary perfusion, cardiac muscle tension and hemodynamic states during the ECMO perfusion by using the mathematical model of human blood circulatory system and ECMO. The outflow data of the pulsatile ECMO(T-PLS, Bioheartkorea, Korea) was obtained in vitro experiments. According to the phase and pumping rate of the ECMO, the heart's load and coronary perfusion could be adjusted to the proper levels. The results of the human- ECMO lumped parameter model showed that the synchronizing operation of the pulsatile ECLS can be helpful at stabilizing the patient's hemodynamic states.
Background and objectives: Salivary hypofunction is one of the common side effects after radioiodine therapy, and its pathophysiology is salivary ductal stenosis resulting from ductal cell injury. This study aimed to develop the functional culture environment of human parotid gland ductal cells in in vitro three-dimensional perfusion culture system. Materials and Methods: We compared plastic dish culture method and three-dimensional culture system containing Matrigel and nanofiber. Morphogenesis of reconstituted salivary structures was assessed by histomorphometry. Functional characteristics were assessed by immunohistochemistry and reverse transcription polymerase chain reaction (aquaporin 5, CK7, CK18, connexin 43, and p21). In addition, we designed the media perfusion culture system and identified higher rate of cell proliferation and expression of connexin 43 in perfusion system comparing to dish. Results: Human parotid ductal cells were well proliferated with the ductal cell characters under environment with Matrigel. In the presence of Matrigel, aquaporin 5, CK18 and connexin 43 were more expressed than 2D dish and 3D nanofiber setting. In the media perfusion culture system, ductal cells in 3D culture media showed higher cells count and connexin 43 expression compared to 2D dish. Conclusion: This in vitro ductal cell perfusion culture system using Matrigel could be used to study for radioiodine induced sialadenitis model in vivo.
Growth kinetics of mammalian cell, Chinese Hamster Ovalry(CHO) was investigated to effectively produce pharmaceutically important Erythropoeitin under perfusion chemostat conditions. Perfusion rate, D is correlated with total viable is to be an essential factor in controlling growth kinetic parameters under this kind of operations. It is also found that the measurement of oxygen uptake rates is a relatively accurate method to understand cell growth, in case that the traditional cell count method is no longer useful due to heavy cell clumpings. True growth yield, Ymax and maintenance coefficient, me associated with mammalian cell growth were estimated as $2.86{\times}10^8$ cells/ g of glucose and 0.0063 g of glucose/ cells/ hr, respectively.
A bioartificial liver (BAL) is a medical device entrapping living hepatocytes or immortalized cells derived from hepatocytes. Many efforts have already been made to maintain the functions of the hepatocytes in a BAL device over a long term. However, there is still some uncertainty as to their efficacy. and their limitations are unclear. Therefore, it is important to quantitatively evaluate the metabolic functions of a BAL. In previous studies on in vitro BAL devices, two test methods, an initial bolus loading and constant-rate infusion plus initial bolus loading, were theoretically carried out to obtain physiologic data on drugs. However, in the current study, the same two methods were used as a perfusion model and derived the same clearance characterized by an interrelationship between the perfusate flow rate and intrinsic clearance. The interrelationship indicated that the CL increased with an increasing perfusate flow rate and approached its maximum value, i.e. intrinsic clearance. In addition, to set up an in vivo BAL system, the toxic plateau levels in the BAL system were calculated for both series and parallel circuit models. The series model had a lower plateau level than the parellel model. The difference in the toxic plateau levels between the parallel and series models increased with an increasing number of BAL cartridges.
It was shown that brain-derived neurotrophic factors (BDNFs) secreted from human neuroblastoma cells can significantly improve the growth of the neurites of PC12 nerve cells. The addition of purified BDNFs elongated the neurites of PC 12 nerve cells two to three times more than the case where the addition was not made. The perfusion rate strongly affected the change of the size of human neuroblastoma cells because the cell size decreased as the perfusion rate increased. This could also influence the productivity of BDNF from the cells. It is also important to note that the BDNF production was decreased when the cell size was reduced. BDNF production rate also decreased at a fast perfusion rate in a smaller cell size. At the relatively fast perfusion rate of 18 ml/h, the ratio of apoptotic to necrotic cells dramatically decreased, which possibly caused the decrease of BDNF production. It has been proven that the secretion of BDNF from human neuroblastoma cells was a partially growth-related process by yielding 6.2$\times l0^{-8}/g$ of BDNF/cell/h of growth related parameter and $0.48{\times}l0^{-9}/g$ of BDNF/cell/h of nongrowth-related parameter in a growth kinetic model. In addition, it was also found that the perfusion rate played a very important role in controlling the cell death mechanism.
Purpose: Although automatic quantification software of myocardial perfusion SPECT provides highly objective and reproducible quantitative measurements, there is still some limitation in the direct use of quantitative measurements. In this study we derived parameters using normal variation of perfusion measurements, and tried to test the usefulness of these parameters. Materials and Methods: In order to calculate normal variation of perfusion measurements on myocardial perfusion SPECT, 55 patients (M:F = 28:27) of low-likelihood for coronary artery disease were enrolled and $^{201}TI$ rest/$^{99m}Tc$-MIBI stress SPECT studies were performed. Using 20-segment model, mean (m) and standard deviation (SD) of perfusion were calculated in each segment. As a myocardial viability assessment group, another 48 patients with known coronary artery disease, who underwent coronary artery bypass graft surgery (CABG) were enrolled. $^{201}TI$ rest/$^{99m}Tc$-MIBI stress / $^{201}TI$ 24-hr delayed SPECT was performed before CABG and SPECT was followed up 3 months after CABG. From the preoperative 24-hr delayed SPECT, $Q_{delay}$ (perfusion measurement), ${\Delta}_{delay}$ ($Q_{delay}$ - m) and $Z_{delay}$ (($Q_{delay}$ - m)/SD) were defined and diagnostic performances of them for myocardial viability were evaluated using area under curve (AUC) on receiver operating characteristic (ROC) curve analysis. Results: Segmental perfusion measurements showed considerable normal variations among segments. In men, the lowest segmental perfusion measurement was $51.8{\pm}6.5$ and the highest segmental perfusion was $87.0{\pm}5.9$, and they are $58.7{\pm}8.1$ and $87.3{\pm}6.0$, respectively in women. In the viability assessment $Q_{delay}$ showed AUC of 0.633, while those for ${\Delta}_{delay}$ and $Z_{delay}$ were 0.735 and 0.716, respectively. The AUCs of ${\Delta}_{delay}$ and $Z_{delay}$ were significantly higher than that of $Q_{delay}$ (p = 0.001 and 0.018, respectively). The diagnostic performance of ${\Delta}_{delay}$, which showed highest AUC, was 85% of sensitivity and 53% of specificity at the optimal cutoff of -24.7. Conclusion: On automatic quantification of myocardial perfusion SPECT, the normal variation of perfusion measurements were considerable among segments. In the viability assessment, the parameters considering normal variation showed better diagnostic performance than the direct perfusion measurement. This study suggests that consideration of normal variation is important in the analysis of measurements on quantitative myocardial perfusion SPECT.
We performed post-operative hemodynamic evaluation and lung perfusion scan after left lung transplantation in dog. The heart & lungs were extracted from donor dog while the both lungs were flushed with 4oC Euro-Collin`s solution after heparinization & infusion of prostaglandin E1.In the recipient dog, anastomosis of the left atrial cuff was performed by continuous 4-0 Prolene everted suture, and bronchial anastomosis by telescope method with 4-0 Prolene continuous suture. The end-to-end anastomosis of left main pulmonary arteries was performed with continuous 6-0 Prolene suture. After closure of left thoracotomy incision, the lung perfusion scan was performed post operative 2 days for evaluation of the function of the transplanted lung which showed good perfusion. The dog was sacrificed in the post-operative 5 days for autopsy.
Optimal feeding strategies in bioreactor operation of Scutellaria baicalensis G. plant cell culture were investigated to maximize the production of flavone glycosides by using a structured kinetic model which can predict culture growth and flavone glycosides synthesis in a rigorous, quantitative manner. For the production of baicalin and wogonin-7-0-GA, the strategies for glucose feeding into Scutellaria baicalensis G. plant cell culture were proposed based on the model, which are a periodic fed-batch operation with maintenance of cell viability and of specific production rate respectively, and a perfusion operation with maintenance of specific production rate for baicalin and wogonin-7-0-GA. Simulation results showed that the highest volumetric concentration of flavone glycosides was obtained in a periodic fed-batch operation with maintenance of cell viability among all the suggested strategies. In the periodic fed-batch operations, the higher volumetric production of flavone glycosides was achieved compared with that in the perfusion operation. It can be concluded that a periodic fed-batch operation with maintenance of cell viability would be the optimal and practical operating strategy of Scutellaris baicalensis G. plant cell culture for the production of flavone glycosides.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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