Southern blight, caused by the soil-borne fungus Sclerotium rolfsii, is a serious disease that affects many economically important crops. In this study, we selected Bacillus subtilis GJ6-14, from a total of 260 strains, to control Southern blight in pepper plants. In both seedling and plant tests, GJ6-14 significantly suppressed disease incidence and severity compared to control, furthermore, GJ6-14 demonstrated efficient colonization in the rhizosphere by maintaining the population from log 5.41 to log 3.92 in the pathogen-inoculated plants, indicating its potential as a biocontrol agent. Molecular analysis revealed up-regulation of defense-related genes, such as a 7.6-fold increase in LOX1 and 15.5-fold increase in PR1, at 72 hr after inoculation of S. rolfsii in GJ6-14-treated plants, suggesting activation of plant defense mechanisms. Overall, our findings highlight the promising role of B. subtilis GJ6-14 as a potential biocontrol agent in sustainable management of Southern blight in pepper plants.
The spent mushroom substrate (SMS) of Lentinula edodes that was derived from sawdust bag cultivation was used as materials for controlling Phytophthora blight disease of pepper. Water extract from SMS (WESMS) of L. edodes inhibited mycelial growth of Phytophthora capsici, suppressed Phytophthora blight disease of pepper seedlings by 65% and promoted growth of the plant over 30%. In high performance liquid chromatography (HPLC) analysis, oxalic acid was detected as the main organic acid compound in WESMS and inhibited the fungal mycelium at a minimum concentration of 200 mg/l. In quantitative real-time PCR, the transcriptional expression of CaBPR1 (PR protein 1), CaBGLU (${\beta}$-1,3-glucanase), CaPR-4 (PR protein 4), and CaPR-10 (PR protein 10) were significantly enhanced on WESMS and DL-${\beta}$-aminobutyric acid (BABA) treated pepper leaves. In addition, the salicylic acid content was also increased 4 to 6 folds in the WESMS and BABA treated pepper leaves compared to water treated leaf sample. These findings suggest that WESMS of L. edodes suppress Phytophthora blight disease of pepper through multiple effects including antifungal activity, plant growth promotion, and defense gene induction.
Induction of systemic acquired resistance (SAR) against phytophthora blight and pathogenesis-related (PR) protein accumulation by TMV infection in pepper plant (Capsicum annuum cv. Nockwang) were examined to understand the mechanism of the systemic acquired resistance in pepper plant. The zoospore suspension of Phytophthora capsici was inoculated on stem of pepper plant in which TMV-pepper strain had been inoculated on fully expanded upper leaves, and thephytopha blight incidence was examined. Both disease severity and lesion length of phytophthora blight were much smaller in TMV pre-inoculated pepper plant than in uninoculated control plants. The phytophthora blight incidence was decreased about 50% in the TMV pre-inoculated pepper, compared to the uninoculated control plant at 10 days after P. capsici inoculation. Accumulation of PR1 and PR5 proteins in intercellular fluid of TMV-inoculated and uninoculated upper leaves were monitored by immuno-blot with tobacco P1b and PR5a, antibody during induction of SAR. PR1 and PR5 were detected from 24 hours after TMV inoculation in both TMV-inoculated and uninouclated upper leaves, and increased rapidly in TMV-inoculation in uninoculated upper leaves were defoliated. PR5 could be detected upto 20 days after TMV inoculation in uninoculated upper leaves. These results suggest that TMV infection induces SAR against phytophthora blight in pepper plant, and that PR proteins are accumulated very rapidly during induction of SAR and maintained for quite long time in pepper plant.
An infection risk model for Phytophthora blight on chili pepper was developed to estimate the first date of disease occurrence in the field. The model consisted of three parts including estimation of zoosporangium formation, soil water content, and amount of active inoculum in soil. Daily weather data on air temperature, relative humidity and rainfall, and the soil texture data of local areas were used to estimate infection risk level that was quantified as the accumulated amount of active inoculum during the prior three days. Based on the analysis on 190 sets of weather and disease data, it was found that the threshold infection risk of 224 could be an appropriate criterion for determining the primary infection date. The 95% confidence interval for the difference between the estimated date of primary infection and the observed date of first disease occurrence was $8{\pm}3$ days. In the model validation tests, the observed dates of first disease occurrence were within the 95% confidence intervals of the estimated dates in the five out of six cases. The sensitivity analyses suggested that the model was more responsive to temperature and soil texture than relative humidity, rainfall, and transplanting date. The infection risk model could be implemented in practice to control Phytophthora blight in chili pepper fields.
In order to obtain bacterial metabolites inducing disease resistance in pepper plant, two hundred bacterial isolates were isolated from the rhizosphere soil of tobacco, cucumber, and pepper plant. Ethyl acetate extract of each bacterial culture was used to screening for induction of resistance against phytophthora blight of pepper plant. Application of ethyl acetate extract of an isolate SH122 culture to pepper plant conferred resistance against phytophthora blight consistently and significantly. According to cellular fatty acid analysis and other characteristics, the SH122 culture were significantly lower than those on control plants treated with ethyl acetate extract of nutrient broth. The B. pumilus SH122 itself of ethyl acetate extract of its culture did not show antifungal activity against phytophthora blight in pepper plants.
3-(4-Hydroxyphenyl)-propionic acid (HPP)는 곤충 병원 세균인 Xenorhabdus nematophila K1의 대사산물이다. 이 물질의 고추의 역병과 탄저병에 대한 방제가능성을 평가하였다. HPP는 역병균과 탄저병균의 균사생장을 현저하게 억제하였다. 이 항균력은 자연 태양광 아래에서 25일이상 유지되었으며, 토양수 내에서도 상실되지 않았다. HPP의 고추 뿌리를 통한 식물체 내 침투 및 상향이행성이 입증되었다. HPP 현탁액을 고추의 근권토양에 관주하고 지상부에 10일 간격으로 살포하였을 때, 약해 발생 없이 역병과 탄저병 발생이 크게 감소되었다. 이러한 결과는 HPP를 고추 역병 및 탄저병 방제를 위한 침투성농약으로 개발할 가능성이 있음을 의미한다.
역병은 세계적으로 고추에 발생하는 병 중 가장 문제시 되는 병해로 국내 83개 지역에서 채집한 재래종 고추 유전자원 중 300개를 선발하여 공시하였다. 파종 후 온실에서 70일간 육묘하였고 공시한 역병균의 유주자낭 농도를 $10^5/mL$으로 하여 주당 5mL 관주접종 후, 습실 처리하였고 1주 간격으로 4주간 이병주율을 조사하였다. 접종 7일 후 이병주율을 조사하였더니, 공시한 300개 고추 자원 중 67개 자원에서 이병주율이 60.1% 이상으로 높은 감수성을 보였으며, 37개 자원은 접종 후 7일까지 전혀 발병하지 않았다. 역병균 접종 28일 후, 공시한 300점의 고추자원 중 244개 자원은 60% 이상의 이병주율을 보여 역병에 대해 감수성을 나타내었으며, 11개 자원은 20% 미만의 이병주율을 보여 중도저항성을 보였고, 5개 자원은 전혀 발병하지 않아 저항성을 나타내었다. 5개 자원의 저항성 고추유전자원은 역병저항성 고추 품종 육종에 유용한 중간모본으로 사용될 것으로 생각된다. 본 실험의 정밀도를 높이기 위해 분자마커를 활용한 추가실험이 진행된다면 고추유전자원의 역병 저항성에 대한 중요한 정보를 제공할 수 있을 것으로 본다.
고추 역병이 발생한 충주, 안면, 태안, 안동, 음성 그리고 괴산지역의 고추밭 토양에서 전체 10,753균주의 저영양 미생불을 분리하였다. 이들 중 Phytophthora capsid를 포함하여 식불체의 주요 병원성 곰팡이에 대해 길항작용을 보이는 균주들을 일차적으로 선발하였다. 최종적으로는 온실 고추유묘 검정을 통해 고추 역병에 대해 탁월한 방제가를 보이는 7F 균추가 선발되었다. 이 균주는 16SrDNA염기서열 분석과 API20 NE 키트를 통한 생리, 생화학적 분석을 통하여 Bacillus subtilis로 동정 되었다. 고추 역병균 포자를 처리한 고추 유묘 화분 검정에서, 처리25일 후 대조구는 고추 역병 이병 비율이 87%에 이르는 반면에 7F 균주를 처리한 처리구에서는 단지 6%의 이병율을 보였다.
충북의 고추 주산지인 청원, 보은, 음성, 괴산의 포장에서 고추 역병 발생에 따른 이병주율과 수량과의 관계를 조사하였다. 괴산을 제외한 3개의 시험포장에서 고추 역병의 증가는 수량감소를 가져왔다. 고추 역병 이병주율과 수량 사이의 높은 상관을 나타내는 수확시기는 청원에서는 3차, 보은에서는 2차 수확기로 나타나 지역별로 다소 차이를 보였다. 이와는 달리 저항성 대목을 이용하여 접목재배를 한 괴산 시험포장에서는 고추 역병 발생량과 수량 사이에 매우 낮은 상관을 나타냈다. 청원 시험 포장에서 이병주율 100%에 도달하는 데 소요되는 시기는 2006년에 비해 2007년에 40일 이상 늦어졌다. 고추 역병 발생이 적었던 포장(이병주율 5% 이하)에서 수량감소 5%를 가져오는 고추 역병 요방제 수준은 0.8%로 설정되었다.
큰느타리 (Pleurotus eryngii), 표고 (Lentinula edodes ), 노루궁뎅이 (Hericium erinaceus ) 버섯 수확 후 배지 (spent mushroom substrate, SMS) 물 추출액(SMSE)의 고추생장촉진과 고추역병균 억제효과를 조사하였다. 큰느타리버섯, 표고버섯 및 노루궁뎅이버섯 SMSE는 유묘생장시에 잎폭, 잎장, 초장, 절간, 절수 등에서 대조구에 비하여 모두 11~41%로 평균 20% 이상의 높은 생육효과가 있었으며 잎수에서는 거의 1.5배 높게 나타났다. 노루궁뎅이 SMSE혼합 PDA배지는 고추역병균사 성장을 거의 99-100% 억제하였다. 큰느타리, 표고버섯 및 노루궁뎅이 SMSE는 고추역병에 대하여 각각 25%, 65% 75%이상의 방제효과를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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