Kim, Young-Ok;Park, Eun-Mi;Nam, Bo-Hye;Kong, Hee-Jeong;Kim, Woo-Jin;Noh, Jae-Koo;Lee, Sang-Jun;Kim, Kyung-Kil
Animal cells and systems
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제14권1호
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pp.25-30
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2010
We employed a new and improved differential display reverse transcription-polymerase chain reaction (DDRT-PCR) method, which involves annealing control primers (ACPs), to identify the genes that are specifically or prominently expressed in olive flounder (Paralichthys olivaceus) juveniles (35 days post-hatch; dph) compared to larval-stage (dph 21) flounder. Using 60 ACPs, we identified eight differentially expressed genes (DEGs) and basic local alignment search tool (BLAST) searches revealed eight known genes. Gene expression levels were confirmed by RT-PCR. Phosphoglucose isomerase (PGI) was highly expressed at 21 dph, while nephrosin, myosin light chain (MLC), myosin heavy chain (MHC), carboxypeptidase A, chymotrypsin B, fish-egg protein, and matrix protein were expressed at 35 dph. PGI, MLC, and MHC expression was further analyzed by RT-PCR. The differentially expressed genes identified in this study may provide insights into the molecular basis of development in olive flounder.
A 12-wk experiment was conducted to examine the hematological changes, survival, and respiratory exchange in the olive flounder, Paralichthys olivaceus, during starvation. The growth, survival and respiratory exchange rates of the starved group were lower than those of the fed group during the experiment. Blood analysis, including hematocrit, hemoglobin, red blood cells, mean corpuscular hemoglobin, mean corpuscular hemoglobin concentration, and mean corpuscular volume, did not differ significantly (p>0.05) between the fed and starved groups at the end of the experiment. There were no significant differences in plasma cortisol, glucose, $Na^+$, $Cl^-$, $K^+$, or aspartate aminotransferase between the fed and starved groups (p>0.05). Alanine aminotransferase levels were higher in the starved group than in the fed group, whereas plasma osmolality was lower in the starved group than in the fed group. It was shown that starved fish had various problems after four weeks, which did not occur in the fed group. Long-term starvation is infrequent in aquaculture farms. However, starvation studies of this kind are very useful for a basic understanding of how physiological changes affect fish health, life expectancy, and growth.
Adjuvant is an immune enhancer commonly used during vaccination to enhance the host immune response. In the present study, we produced the several recombinant protein from immune related gene of olive flounder (Paralichthys olivaceus). Especially, to produce the soluble type of recombinant protein, we constructed the MBP (Maltose binding protein) fusion G-CSF (Granulocyte colony stimulating factor) recombinant protein among the flounder immune related genes. To verify the immune stimulatory effect and safety of this recombinant protein (rPoGCSF), expression changes of several immune genes were tested using quantitative real-time PCR method with gene specific primer from flounder head kidney leukocytes. As a result, we confirmed that the rPoGCSF has an ability of immune stimulatory effect, also it has broad range of pH and temperature.
Kim, Kyoung-Sun;Kim, Hyun-Woo;Chen, Thomas T.;Kim, Young-Tae
BMB Reports
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제42권4호
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pp.206-211
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2009
Proopiomelanocortin (POMC) plays an essential role in the stress response of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis, and is the precursor of biologically active peptides such as adrenocorticotropin (ACTH), $\alpha$-melanocyte-stimulating hormone ($\alpha$-MSH), $\beta$-melanocyte-stimulation hormone ($\beta$-MSH) and $\beta$-endorphin. We have synthesized two different forms of POMC cDNA clones, POMC-I and POMC-II, from a pituitary cDNA library for Paralichthys olivaceus, or Japanese flounder. jfPOMC-I cDNA consists of 954bp and encodes a polypeptide of 216 amino acid residues, whereas jfPOMC-II consists of 971bp which encode a polypeptide of 194 amino acid residues. The high levels of jfPOMC-I and -II mRNAs detected in the pituitary tissue and moderate levels detected in the brain tissue plus our quantitative RT-PCR analysis, which showed there to be no significant difference between the levels of jfPOMC-I and -II mRNAs, indicate that there may be no functional separation between these two mRNAs in the flounder.
The high mortality (65.5%) of young olive flounder (Paralichthys olivaceus) showing skin ulcers occurred in fish obtained from a commercial cultured farm at Donghae on the eastern coast of Korea at March 2006. The dorsal skin showed ulcer lesions and large amount of mucus. We isolated Ichthyobodo sp. from the gill, and Vibrio anguillarum from the liver and kidney of dead and diseased fish. All of the fish infected with the V anguillarum and Ichthyobodo sp. were treated with 100 ppm formalin for 1 h, and treated with oxolinic acid for 4 h at $22^{\circ}C$, respectively. The formalin treated group was observed the low mortality (2.9%) when compared with high mortality of non-treated (82.9%), and of antibiotic treated group (85.9%) against mixed infections by Vibrio anguillarum and Ichthyobodo sp. organisms. We confirmed complete elimination against mixed infections of Vibrio anguillarum and Ichthyobodo sp. with 100 ppm formalin treatment.
this study was performed for the purpose of surveying the distribution and characteristics of the Vibrio species in the diseased farm flounders (Paralichthys olivaceus) during the winter season in Korea. Samples were collected along the southern coast in the Sinam, Keoje Island, and Teosu areas from November '90 to Feburary '91. Nine species of Vibrio were identified as V. tubiashii (85 strains), V. damsela (78 strains), V. anguillarum (21 strains), V. compbelli (9 strains), V. fluvialis (9 strain), V. costicola (1 strain), V. alginolyticus (1 strain), V. gazogenes (1 strain), V. marinus (1 strain), and unidentified 3 groups of bacteria (154 strains) which may have related with V. tubiashii were isolated. Eleven kinds of discs (BBL Co.) were used for antibiotic susceptibility test and 116 strains were selected for the experiment. Most bacteria were powerfully inhibited their growth by 4 antibiotics such as cephalothin, chloramphenicol, colistin, and tetracycline, but they were poorly inhibited by 4 antibiotics such as carbenicillin, kanamycin, penicillin G, and streptomycin.
본 연구는 2002년 6월부터 2003년 11월까지 복수증을 나타내는 양식넙치의 세균상과 virus를 동정한 것이다. 생화학적 성상을 기초로 한 표현형으로, 병어체의 복수, 간, 신장, 내장으로부터 Vibrio, Edwardsiella, 및 stonella 등 3개 속이 동정되었다. Vibrio속은 5종으로 우점이었고 V. harveyi (32균주), V. parahaemolyticus (23균주), V. alginolyticus (10균주), V. carcariae (2균주), V. metschnikovii (5균주)였다. 그밖에 Photobacterium damselae (6균주)와 장내세균인 Edwardsiella tarda (15균주)가 동정되었다. 감염어의 내부 장기로부터 해산어 병원성 바이러스로 알려진 marine birnavirus (MABV)가 분리되었다.
Kim, Jong-Hyun;Jeong, Min Hwan;Jun, Je-Cheon;Kim, Tae-Ik
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권9호
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pp.1360-1367
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2014
Triplicate groups of fed and starved olive flounder, Paralichthys olivaceus (body weight: $119.8{\pm}17.46$ g), were examined over 42 days for physiological changes using hematological, biochemical, and non-specific immune parameters. No significant differences in concentrations of blood hemoglobin and hematocrit and plasma levels of total cholesterol, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, glucose, and cortisol were detected between fed and starved groups at any sampling time throughout the experiment. In contrast, plasma total protein concentrations were significantly lower in starved fish than in fed fish from day 7 onwards. Moreover, plasma lysozyme concentrations were significantly higher in starved flounder from day 21 onwards. This result confirms that the response of olive flounder to short-term (less than about 1.5 months) starvation consists of a readjustment of metabolism rather than the activation of an alarm-stress response. The present results indicate that starvation does not significantly compromise the health status of fish despite food limitation.
Food garbage fermented with microbial starter was formulated to diet for the growth of juvenile flounder (Paralichthys olivaceus). Two replicate groups of fish, an average weight of 4.0g, were fed the four isocaloric (19.5 MJ/kg diet) diets with different fermented food garbage levels $(0,\;5,\;10\;and\;15\%)$ for 45 days. Survival, feed efficiency, hepatosomatic index and protein efficiency ratio of fish were not affected by dietary fermented food garbage level (P>0.05). Weight gain of fish fed the diets with 5, 10 and $15\%$ fermented food garbage was significantly higher than that of fish fed the control diet (P<0.05). Condition factor of fish fed the diet with $10\%$ fermented food garbage was significantly higher than that of fish fed the control diet (P<0.05). Daily feed intake of fish fed the diets with 5 and $15\%$ fermented food garbage was significantly higher than the control diet (P<0.05). Proximate composition of whole body and plasma glucose concentration were not affected by dietary fermented food garbage level (P>0.05). These findings indicate that fermented food garbage could be utilized as a feed ingredient for juvenile flounder.
We determined the optimal culture conditions for obtaining the maximum number of intestinal bacteria from the olive flounder Paralichthys olivaceus, and studied bacterial diversity using both culture-dependent and culture-independent methods. Using six culture conditions, mean bacterial numbers were greater than $10^6$ per gram of gut mucus, regardless of the medium. However, the bacterial diversity, based on colony morphology, appeared much higher on Marine agar (MA) and Zobell 2216 agar than on other media. We found eight and 17 cultured bacterial phylotypes with 99% minimum similarity in gut mucus grown on MA and tryptic soy agar, respectively. Furthermore, we used genomic DNA extracted from gut mucus to generate 78 random clones, which were grouped into 25 phylotypes. Of these, six were affiliated with Firmicutes, Actinobacteria, and Verrucomicrobia, and were not found using our culture-dependent methods. Consequently, we believe that Marine agar and Zobell 2216 agar are optimal media for culturing diverse intestinal microbes; we also discovered several novel sequences not previously recognized as part of the gut microbiota of olive flounder.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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