본 연구는 정상 및 저수태 한우에 rbST를 투여하였을 때 수태 및 분만율에 미치는 영향을 조사하기 위하여 수행하였다. 시험축은 성빈 한우 383두와 임상적으로는 정상이나 3회 이상 수정시켜도 수태가 되지 않는 저수태 한우 79두, 총 462두를 시험에 공시하였다. 실험을 수행하기 위한 시험구 배치는 5개의 처리구, 즉 T1(무처리, 2ml의 생리 식염수), T2(rbST 250mg 수정시 1회 미근부에 투여), T3(rbST 250mg: 수정시 및 수정후 $10\~14$일째 2회 투여), T4(rbST 500 mg: 수정시 1회 투여) 및 T5(rbST 500mg: 수정시 및 수정후 $10\~14$일째 2회 투여)로 나누어 시험을 실시하였다. 그리고 호르몬과 병행 처리구는 Day 0일에 GnRH 100 ug/cow를 견갑부에 피하주사하고 Day 7일째 $PGF_2{\alpha}\;25mg/cow$를 주사하여 황체를 퇴행시키고, Day 9일째 GnRH 100ug/cow를 주사하여 배란 동기화를 유도하여 시험에 공시하였다. 1. 정상 한우에 인공수정시 rbST를 T1, T2, T3, T4 및 T5로 처리하였을 때, 1회 수정 수태율은 대조구$(52.4\pm9.72\%)$에 비하여 $T2(67.5\pm18.48\%)$에서 높은 것으로 나타났고, 저수태우에서는 대조구$(39.3\pm12.89\%)$보다 $T4(63.3\pm5.77\%)$에서 유의적으로 높은 수태율을 나타냈다.(p<0.05). 또한, 정상 한우의 분만율에 있어서는 처리구간 유의적인 차이가 인정되지 않았지만, 저수태우에서는 $T4(46.7\pm11.55\%)$에서 유의적으로 높은 성적을 나타냈다(p<0.05). 2. Ovsynch 방법으로 발정을 유기하여 인공수정시 rbST를 T1, T2, T3, T4 및 T5로 처리하였을 때, 1회 수정 수태율은 대조구에 비하여 T2에서 $12.5\%$가 높은 것으로 나타났고, 저수태우에서는 $T4(80.0\%)$에서 유의적으로 높은 수태 율을 나타냈다(p<0.05). 3. 정상 한우에 인공수정시 rbST를 T1, T2, T3, T4 및 T5로 각기 처리하였을 때, 임신 기간은 평균 $282.7\~284.8$일이었고, 또한 생시체중의 비교는 평균 $25.1\~25.9kg$으로서 처리 구간 유사한 결과를 보였다. 그러나, 송아지의 암수 성비는 T4 처리구(18두 vs. 9두)를 제외한 모든 처리구에서 유사한 경향을 보였다. 그리고, 저수태 한우의 평균 임신 기간은 $280.4\~289.3$일로서 정상우와 비교했을 때 비슷한 결과를 보였고, 또한 생시 체중의 조사 결과에서도 평균 체중이 $23.0\~26.6kg$으로서 각 처리구간에도 유의성은 없었다. 송아지의 암$\cdot$수의 성비는 T4 처리구(2두 vs. 8두)를 제외한 모든 처리구에서 유사하게 나타났다. 결론적으로, 본 연구에서는 정상 및 저수태 성빈 한우에 rbST를 투여한 후 수태율과 분만율을 조사한 결과 인공수정시 정상우에서는 rbST를 250mg 1회 투여, 그리고 저수태 한우에 있어서는 rbST를 500mg을 인공수정시 1회 투여하였을 때가 다른 처리구에서 보다 우수한 결과를 나타내었다. 따라서 인공수정시 일정량의 rbST투여는 한우의 수태 및 분만율을 향상시키는 것으로 사료된다.
Schiere, J.B.;Kumarasuntharam, V.R.;Sewalt, V.J.H.;Brouwer, B.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제1권4호
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pp.213-218
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1988
Forty eight growing bulls of two breed types(red Sahiwal and white Kilari), fed rice straw, were allocated to nine treatment groups: 1. Control straw (CS) 2. Urea upgraded straw (UUS) 3. UUS + 0.25 kg coconut cake (CC) 4. UUS + 0.75 kg CC 5. UUS + 0.25 kg rice bran (RB) 6. UUS + 1.00 kg RB 7. UUS + 0.25 kg RB + 0.25 kg CC 8. UUS + 1.00 kg RB + 0.25 kg CC 9. CS + 1.00 kg RB + 0.25 kg CC Liveweight gain was measured weekly during 15 weeks and tested in three analyses of variance. The results are: Urea upgraded straw produced a liveweight gain $180g.d^{-1}$ higher (P <0.01) than control straw. The groups supplemented with 0.25 kg coconut cake and 1.00 kg rice bran showed an increase of $100g.d^{-1}$ (p < 0.05) over the unsupplemented groups. No interaction between straw upgrading and supplementation was present (P > 0.10). Both rice bran and coconut press cake, supplemented to upgraded straw at a level of 0.25 kg, did not increase liveweight gain (P>0.05), but 1.0 kg rice bran increased gain by $90g.d^{-1}$ (P<0.05). A supplement of 0.75 kg coconut press cake to upgraded straw increased liveweight gain by $160g.d^{-1}$ compared with 0.25 kg or 0.00 kg coconut cake supplement (P<0.05). There were no significant differences between breed types (P>0.10) or interactions between breed and the other two main treatments (upgrading and supplementation). It was concluded. that both urea upgrading and supplementation of rice straw increase animal performance. The effect of urea upgrading was the same for both supplemented and unsupplemented animals. There was no indication of a nonlinear effect of supplements on growth.
본 연구는 태령 19일된 백서 태자 두 개관에서 분리한 골모세포유사세포에 화학발암물질인 7,12-Dimethylbenz(a)anthracene (DMBA: 0.5 ㎍/ml) 및 tumor promotor인 12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate (TPA; 1.0 ㎍/ml)를 단독 혹은 복합 처리하여 PTRCC-DMBA, RCC-DMBA 및 RCC-DMBA-TPA 세포주를 확립시키고, 각 세포의 세포형태, 세포성장곡선, alkaline phosphatase와 acid phosphatase 활성 및 in vitro tumorigenicity를 연구하였다. 또한 c-myc, c-랜, c-jun, p53 및 Rb 유전자의 발현변화와 항암단백질인 p53 및 pRb 단백질의 발현변화를 관찰하여 골모세포유사세포가 악성형질전환되는 분자기전의 일단을 연구하고자 시행하였다. 본 실험에 사용한 모든 세포군에서 높은 aikaline phosphatase 활성과 낮은 acid phosphatase/alkaline phosphatase ratio를 보여 골모세포의 특성을 나타내었다. RCC-DMBA와 RCC-DMBA-TPA 세포는 정상세포나 PTRCC-DMBA에 비해 빠른 성장속도를 보였으며, 또한 SOFT AGAR상에서 colony를 형성하여 anchorage-independent growth를 나타내었다. 화학발암 물질로 악성변형된 세포들은 정상세포나 PTRCC-DMBA 세포에 비해 c-myc 유전자의 과발현이 관찰되었다. 정상세포에서 p53 유전자의 발현은 1.9 kb의 message만이 발현되었다. 그러나 화학발암물질로 형질전환된 세포에서는 1.9 kb message외에도 1.6 kb의 message가 더 발현되었으며, message의 양도 현저히 증가되었다. p53 단백질의 발현은 RCC-DMBA-TPA 세포에서 정상세포에 비해 현저히 감소하였으나, RCC-DMBA 세포에서는 유사한 경향을 보였다. Rb 유전자의 발현은 RCC-DMBA-TPA 세포에서만 현저히 감소하였으나, Rb 단백질의 발현은 정상세포에 비해 형질전환된 세포들에서 모두 현저히 감소되었고, 특히 RCC-DMBA-TPA 세포에서는 거의 발현되지 않았다. 이상의 결과에서 백서 태자 두 개관에서 분리한 골모세포유사세포는 화학발암물질인 DMBA에 의해 악성형질전환이 유도되었으며, c-myc의 과발현 및 p53과 Rb 단백질의 발현감소가 정상 골모세포유사세포의 악성변형과정에 밀접히 연관되어 있음을 시사한다.
Purpose: The aim of this study was to cast light on initiating molecular events associated with the development of premalignant oral lesions induced by tobacco and/or areca nut. Method: Immunohistochemical analyses of cell cycle regulatory proteins (LIMD1, RBSP3, p16, RB, phosphorylated RB, p53), EGFR and SH3GL2 (EGFR associated protein) were performed with inflammatory/ulcerative epithelium and adjacent hyperplastic/mild dysplastic lesions. Results: No change in expression of the proteins was seen in inflammatory epithelium. Reduced nuclear expression of LIMD1 was evident in ulcerative epithelium. In hyperplastic lesions, reduced expression of RBSP3, p16, SH3GL2 and overexpression of p-RB and EGFR were apparent. Reduced nuclear expression of p53 was observed in mild dysplastic lesions. Conclusion: Our data suggest that inactivation of LIMD1 in ulcerative epithelium might predispose the tissues to alterations of other cell cycle regulatory and EGFR signaling proteins needed for the development of premalignant oral lesions.
[ $LiK_{1-x}Rb_{x}SO_{4}(x=0.1,\;0.2)$ ]의 결정을 313K에서 수용액법으로 성장시켰다. 결정구조는 X-ray 회절법을 이용하여 동일한 공간군 $P6_{3}(#173)$에서 수행되었다. 동일한 대칭성을 가진 두 화합물은 각각 3회 회전축에 위치하고 있는 Li과 $SO_{4}^{2-}$ 이온들이 서로 무한히 연결된 3차원적 그물구조를 형성하고 있고, 6회 회전축에 위치하고 있는 K와 Rb원자들은 각각 12개와 15개의 O 원자들과 배위를 이루고 있다. K와 Rb의 점유도는(0.91 : 0.09), (0.77 : 0.23)으로 정밀화 하였을 때 가장 안정된 상태에 도달하였다.
Ginsenosides of roots in Panax ginseng were analyzed by metabolic-targeting HPLC using the partial least squares discriminant analysis (PLS-DA) and compared depending on sowing methods between direct seeding and transplanting method. Score plots derived from PLS-DA could identify the sowing method between the direct seeding and transplanting method in P. ginseng roots. The ginsenoside compounds were assigned as Rg1, Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, and Rd. Contents of Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rb3, and Rd of main roots produced from the transplanting method were relatively higher than those of samples produced from direct seeding method. Also, contents of Rg1, Re, Rf, Rg2, Rb1, Rc, Rb2, Rb3, and Rd of lateral roots from the transplanted samples were relatively higher than those of samples produced from direct seeding method. Therefore, HPLC with PLS-DA analysis can be a straightforward tool for identification of ginsenosides in main or lateral roots of P. ginseng obtained from two different seeding methods between direct and transplanting methods.
The characteristics of absorption and accumulation of inorganic germanium in Panax ginseng C. A. Meyer were examined. In 4-year-old P. ginseng, the germanium content of the field soil increased with increased amounts and frequencies of inorganic germanium application, while chemical components of the soil, such as available phosphate and exchangeable calcium, potassium, and magnesium, decreased with the increased inorganic germanium application. In the 4-year-old P. ginseng, the germanium content was highest in the rhizome and increased in the order of stem, leaf, lateral root, and main root, suggesting that inorganic germanium was absorbed from the root and translocated to the stem and leaf via the rhizome. As for changes in ginsenosides in 4-year-old P. ginseng rhizomes, the contents of ginsenosides $Rb_1$, $Rb_2$, Re, and Rf decreased as the germanium content in soil increased. Ginsenosides $Rb_1$, $Rb_2$, Rc, Re, and Rf in the main root also decreased with increasing germanium content in the main root. The results suggest that inorganic germanium treatment may increase organic germanium in harvested P. ginseng, thus enhancing the medicinal effi cacy of ginseng products.
연구배경 : p53 및 망막모세포 암종(Rb) 항암 유전자는 인체의 여러 임종의 발암 과정에 관련되는 것으로 잘 알려져 있다. 또한 최근에 p53 등의 유전자 다형성이 암 발생에 관여하는 것으로 보고되고 있다. 그러나 Rb 유전자 다형성이 폐암 발생에 영향을 주는지는 아직 보고된 바가 없어 이들 유전자의 다형성의 반도 및 흡연 관련 폐암과 이들 유전자의 다형성과의 관계를 알아보고자 했다. 방 법 : 한국인 폐암 환자 발생의 유전적 감수성을 결정하기 위하여 128명의 폐암 환자군과 145명의 대조군에 대한 p53 유전자(exon 4 및 intron 6 부위) 및 망막모세포 암종(retinoblastoma, Rb) 유전자(intron 17 부위)의 다형성을 분석하였다. p53 유전자의 16bp 반복 다형성을 제외한 유전자 분석은 중합효소연쇄반응-제한효소절편길이 다형현상(PCR-RFLPs)을 이용하였으며, 16bp 반복 다형성은 중합효소연쇄 반응 후 전기영동으로 직접 분석하였다. 결 과 : p53 유전자의 exon 4/AccII 다형성 : 대조군 및 환자군에 대한분석에서 다형적인 3가지 유전자형(Arg/Arg, Arg/Pro, Pro/Pro)이 관찰되었으며, Arg과 Pro 유전자 빈도는 각각 0.66, 0.34 였다. 폐암 환자군에서는 대조군에 비해 Arg/Pro 유전자형은 높고, Pro/Pro 유전자형은 낮게 관찰되었으나 통계적으로 유의하지는 않았다. 조직학적으로 소세포 폐암의 경우 유전자형의 분포가 대조군과 유의한 차이를 보였다. p53 유전자의 intron 3/16bp 중복 다형성 : 대조군과 환자군에서 156bp 동형 접합체와 156bp와 172bp의 이형 접합체만이 관찰되었으며, 172bp 동형 접합체는 관찰되지 않았다. 156bp와 172bp 대립인자 각각 0.98, 0.02로 172bp 대립인자의 빈도가 아주 낮았다. 전반적으로 폐암 환자군과 대조군간의 유전자형 분포에는 유의한 차이가 없었다. p53 유전자의 intron 6/MspI 다형성 : Intron 3의 16bp 중복 다형성과 완전 연관 관계에 있었으며, m1 동형접합체와 m1/m2 이형접합체만 관찰 되었다. 16bp 중복 다형성에서와 같이 m1, m2의 유전인자의 빈도는 각각 0.98, 0.02 으로 MspI 절단부위가 없는 m2 대립인자의 빈도가 아주 낮았다. 전반적으로 폐암환자군과 대조군간의 유전자형 분포에는 유의한 차이가 없었다. Rb 유전자의 intron 17/XbaI 다형성 세가지 다형적인 유전자형(r1/r1, r1/r2, r2/r2)이 관찰 되었으며, 대조군에서 r1, r2의 유전자 빈도는 각각 0.50, 0.50 이었다. 유전자형의 분포가 조직학적으로 흡연관련 폐암군(Kreyberg type I)과 대조군 또는 폐 선암종군 사이에는 통계적으로 유의한 차이를 보였다(p < 0.05). Kreyberg type I군에서는 폐 선암종군에 비해 동행접합체(r2/r2 또는 r1/r1) 빈도가 높고 이형접합체(r1/r2) 빈도는 유의하게 낮은 반면, 선암군에서는 이형접합체 빈도가 73.4%로 특징적으로 높았다. 또한 고흡연자군에서의 유전자형의 비흡연자를 포함한 저흡연자군의 유전자형 분포와 유의한 차이를 보였으며(p = 0.0258), 이형접합체의 빈도가 유의하게 낮게 검출되었다. 따라서 Rb 유전자의 유전자형이 이형접합체인 경우 흡연관련 폐암 발생 위험이 감소되며, 동형접합체일 경우는 상대적으로 발생 위험이 증가되는 것으로 판단된다. 결 론 : 이상의 결과를 종합해보면, p53 유전자의 다형성 보다는 Rb 유전자 다형성이 한국인의 흡연관련 폐암발생의 유전적 감수성 결정에 밀접한 관련이 있을 것으로 사료되며, 앞으로 보다 명확한 연관관계 규명을 위해서는 다른 인종 및 더 많은 수의 환자군에 대한 분석이 요망된다.
본 연구에서는 Rhododendron brachycarpum (RB, 홍만병초)의 80% 메탄올 추출물 및 분획물의 항암 활성을 규명하고자 하였다. RB n-hexane 분획물은 HT-29 세포에서 가장 높은 활성 저해를 보였다($IC_{50}=20.2{\pm}1.2{\mu}g/ml$). 더욱이, 콜로니와 구형 형성은 수와 크기는 유의적으로 감소시켰다. RB의 n-hexane 분획물에서($0.22{\pm}0.02$ fold change) TOP / FOP 플래시 리포터 억제 활성은 추출물 및 다른 분획물 보다 낮게 나타났다. n-hexane 및 ethyl acetate 분획물은 세포 내 ${\beta}-catenin$의 발현을 조절하였다. 2 차 대사 산물이 ${\beta}-catenin$ 분해를 감소시킬 수 있는지 여부를 조사하기 위해 Western blot을 실시한 결과 n-hexane 분획물에서 $p-GSK3{\beta}$를 조절하였으며, 세포내 ${\beta}-catenin$은 핵에서 정량적인 변화를 가져왔다. 이러한 결과는 RB의 n-hexane 분획물로부터 천연 항암 물질을 포함하고 있음을 보여줍니다.
Kim, Ju-Hyeon;Oh, Jung-Mi;Chun, Sungkun;Park, Hye Yoon;Im, Wan Taek
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권3호
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pp.391-397
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2020
In this study, we used a novel α-L-arabinopyranosidase (AbpBs) obtained from ginsenoside-converting Blastococcus saxobsidens that was cloned and expressed in Escherichia coli BL21 (DE3), and then applied it in the biotransformation of ginsenoside Rb2 into Rd. The gene, termed AbpBs, consisting of 2,406 nucleotides (801 amino acid residues), and with a predicted translated protein molecular mass of 86.4 kDa, was cloned into a pGEX4T-1 vector. A BLAST search using the AbpBs amino acid sequence revealed significant homology with a family 2 glycoside hydrolase (GH2). The over-expressed recombinant AbpBs in Escherichia coli BL21 (DE3) catalyzed the hydrolysis of the arabinopyranose moiety attached to the C-20 position of ginsenoside Rb2 under optimal conditions (pH 7.0 and 40℃). Kinetic parameters for α-L-arabinopyranosidase showed apparent Km and Vmax values of 0.078 ± 0.0002 μM and 1.4 ± 0.1 μmol/min/mg of protein against p-nitrophenyl-α-L-arabinopyranoside. Using a purified AbpBs (1 ㎍/ml), 0.1% of ginsenoside Rb2 was completely converted to ginsenoside Rd within 1 h. The recombinant AbpBs could be useful for high-yield, rapid, and low-cost preparation of ginsenoside Rd from Rb2.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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