When used in combination with organic acids, Pediococcus acidilactici K10 or its bacteriocin was effective in inhibiting Escherichia coli O157:H7 in vitro and in situ. P. acidilactici K10, a strain of bacteriocin-producing lactic acid bacteria (LAB), was previously isolated from kimchi in our laboratory, and the molecular weight of its bacteriocin was estimated to be around 4,500 Da by SDS-PAGE. Initially, P. acidilactici K10 and its bacteriocin could not inhibit E. coli O157:H7, when used alone. However, when they were used together with organic acids such as acetic, lactic, and succinic acids, they greatly inhibited E. coli O157:H7 in vitro. Based on these in vitro results, a real sample test with ground beef was conducted at $4^{\circ}C$ with acetic acid (0.25%) or lactic acid (0.35%) alone, and then in combination with P. acidilactici K10 (10^5 CFU/g of sample). Combined treatment of P. acidilactici K10 with lactic acid showed the most inhibitory effect: a 2.8-$log_{10}$-unit reduction of E. coli O157:H7 in ground beef during storage at $4^{\circ}C$. This result suggests that the combination of bacteriocin-producing P. acidilactici K10 and organic acids has great potential as a food biopreservative by inhibiting the growth of E. coli O157:H7.
Escherichia coli O157:H7 and Salmonella ser. typhimurium are pathogens involved in food poisoning in numerous countries. This study aimed to obtain knowleges on the survival of E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typhimurium ATCC 14028 in fermentedmilk products which were on sale in Suwon Yakult supplier. To the final concentration of 103~104 cfu/$m\ell$ of E. coli O157:H7 KSC 109 or S. wer. typhimurium ATCC 14028 in the fermented milks, Metchnikoff, Ace, Yakult, Mastoni and Super 100 were inoculated with these pathogens and then were stored at 4$^{\circ}C$ and viable cells of these pathogens were periodically counted. The results showed that the survival of two pathogens differed in the different types of fermented milks tested. Number of suriviving E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typimurium ATCC 14028 cells (initial inoculum, 103~104 cfu/$m\ell$) were decreased to 101, 102 cfu/$m\ell$ in Ace after 100 hours, and were decreased gradually to 101 cfu/$m\ell$ in Yakult after 250 hours. In the other fermented milks, viable cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased but those of S. ser. typhimurium ATCC 14028 was decreased gradually to 102 (Mastoni), and to 101 cfu/$m\ell$ (Super 100) after 250 hours. It appeared that S. ser. typhimurium ATCC 14028 was more susceptible than E. coli O157:H7 KSC 109 at low pH. Vibale cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased in most of fermented milks tested except Ace and Yakult, but in general, S. ser. typhimurium ATCC 14028 was drastically decreased in most of the fermented milks. The major ingibition factor against these pathogens in the fermented milks during storage at 4$^{\circ}C$ appeared to be the acidity and the metabolites produced by the starters bacteria used in fermented milk products.
Kim, Ju-Yeon;Kim, Eun-Kyo;Shin, Cho-Long;Song, Kyung-Bin
Food Science and Preservation
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v.16
no.5
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pp.636-643
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2009
Inactivation by UV-C irradiation of Escherichia coli O157:H7 and Listeria monocytogenes inoculated onto washed carrots was examined. Carrot samples were inoculated with 6-7 log CFU/mL of E. coli O157:H7 or L. monocytogenes, treated with doses of 0, 1, 3, 5, or $10\;kJ/m^2$ UV-C, and stored at $4{\pm}1^{\circ}C$ for 8 d. The populations of E. coli O157:H7 and L. monocytogenes significantly decreased with increasing irradiation dose (p<0.05). In particular, E. coli O157:H7 and L. monocytogenes populations fell significantly by 2.35 and 2.38 log CFU/g at $10\;kJ/m^2$, respectively, compared to control values. UV-C irradiation inhibited color changes and decreased the whiteness index in carrot during storage, compared to controls. Sensory evaluation results showed that UV-C-treated carrots had better sensory characteristics than did the control. Therefore, the results suggest that UV-C irradiation could be useful to improve the microbial safety and sensory qualities of fresh-cut carrots during storage.
The in vitro effects of trisodium phosphate and cetylpyridinium chloride on E. coli 0157:H7 and L. monocytogenes were investigated. The trisodium phosphate and cetylpyridinium chloride was bactericidal toward E. coli 0157:H7 and L. monocytogenes. The killing effects of the $1{\times}10^{-2}\;M$ trisodium phosphate on E. coli 0157:H7 and L. monocytogenes were 30~40%, 40~50%, respectively. The killing effects of the $5{\times}10^{-7}\;M$ cetylpyridinium chloride on E. coli 0157:H7 and L. monocytogenes were 90~95%, 95~99%, respectively. The killing effects of the trisodium phosphate was $10^5$ times that of the cetylpyridinium chloride. Factors effecting the bactericidal action of trisodium phosphate and cetylpyridinium chloride were investigated and the action depended on temperature and pH.
Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) strains of serotype O157:H7 have been shown to colonize the intestinal epithelial cell by the attaching and effacing (AE) mechanism. The AE lesion is mediated by an intimin, of which production and expression are controlled by a 3-Kb eaeA gene located EHEC chromosomal DNA. If the eaeA gene is mutated, EHEC O157:H7 strains lose capacity of adhesion to intestinal epithelial cells. In this study, a 891 bp of the 3'-end region of a gamma intimin was amplified by polymerase chain reaction (PCR). The PCR product was inserted into pSTBlue-1 cloning vector and transformed into DE3 (BL21) competent cell. After plasmid mini-preparation and restriction enzyme digestion of eaeA/891-pSTBlue-1 vector, target eaeA gene was re-inserted into pET-28a expression vector and was transformed. Then the expression of recombinant eaeA/891 (891 bp) gene was induced by isopropyl-$\beta$-D-thiogalactopyranoside (IPTG). The expression of the 40-KDa recombinant protein was identified in SDS-PAGE and confirmed by immunoblotting using the His.Tag$^{\circledR}$ and T$_{7}$.Tag$^{\circledR}$ monoclonal antibody. This recombinant protein expressed by eaeA gene could be applied in further studies on the mechanisms of E. coli O157:H7 infection and the development of recombinant vaccine.
Recently the high outbreaks of intestinal disease caused by the consumption of frozen dairy foods containing pathogenic bacteria has generated considerable interest in the causative agent such as Listeria monocytogenes and E. coli O157:H7. This study was carried out to detect the above pathogens and compare the microbiological qualities of three commercial forzen yogurt products. The main results obtained were as follows. L. monocytogenes coliforms and E. coli O157:H7 were not detected in the total of seven frozen yogurt samples. For microbiological qualities the viable lactic counts of products manufactured by FA company were about 2.9$\times$108 -1.6$\times$109cfu/ml 1.7$\times$106 cfu/ml for FB's and 1.2$\times$106 cfu/ml for FC's The PH values of FA's FB's and FC's products was in the range of pH 4.1~5.3 and the values of FA's were 4.1~4.6 compared by the pH 5.2~5.3 of FB's and FC's products. During refrigeration of the test samples the survival rates of L. monocytogenes spiked into thawed frozen yogurt sample(FA's FB,s and FC's) were 0.55% 15.61% and 16.89% respectively. On the other hand E. coli O157:H7 and L. monocytogenes were 12.4% and 25.0% for FA's 10.8% and 20.8% for FB's and 10.26% and 22.7% for FC's under 37$^{\circ}C$ storage, As the results described above each frozen yogurt products were different in microbiological qualities. The survival rates of pathogens spiked into the samples increased with the pH of the products. This indicates that the pH or any other factors pre-sumable supressed the growth of E. coli O157:H7 and L. monocytogenes in frozen yogurt products.
Kim, Eun-Jin;Chang, Hyun-Joo;Kwak, Soojin;Park, Jong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.12
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pp.2060-2065
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2016
Characteristics of E. coli O157:H7-specific infection bacteriophages (O157 coliphages) and broad-host-range bacteriophages for other E. coli serotypes (broad-host coliphages) were compared. The burst sizes of the two groups ranged from 40 to 176 PFU/infected cell. Distributions of the virulence factors stx1, stx2, ehxA, and saa between the two groups were not differentiated. Broad-host-range coliphages showed lower stability at $70^{\circ}C$, in relation to O157 coliphages. However, O157 coliphages showed high acid and ethanol tolerance by reduction of only 22% and 11% phages, respectively, under pH 3 and 70% ethanol for 1 h exposure. Therefore, these results revealed that the O157 coliphages might be more stable under harsh environments, which might explain their effective infection of the acid-tolerant E. coli O157:H7.
Gamma irradiated and non-irradiated Agrimonia pilosa Ledebour were extracted by 70% ethanol. The combined effects of the Agrimonia pilosa Ledebour extract and NaCl on survival of Escherichia coli O157:H7 in tryptic soy broth were investigated. E. coli O157:H7 decreased ca 1 log cycle by the addition of 2% sample extract, and the anthbacterial activity was increased as the concentration of sample extract was increased. The irradiation effect of the sample on antibacterial activity was not observed. On the treatment of NaCl alone, E. coli O157:H7 was inactivated (ca 3~4 log cycle reduction within 48 hr) in more than 7% NaCl. The higher inactivation(ca 5 log cycle reduction within 48 hr) occurred in the presence of 2% sample extract and 5% NaCl than in the addition of each alone. The extracted antibacterial substance was stable in the pH range of 4.0 to 7.0, heat treatment at 121$^\circ C$ for 15 min, and freezing at -18$^\circ C$ and thawing at 37$^\circ C$. There fore, the sample extract, would substantially increase the food-safety in terms of E. coli O157:H7.
With an increase in the consumption of non-heated fresh food, foodborne shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) has emerged as one of the most problematic pathogens worldwide. Endolysin, a bacteriophage-derived lysis protein, is able to lyse the target bacteria without any special resistance, and thus has been garnering interest as a powerful antimicrobial agent. In this study, rV5-like phage endolysin targeting E. coli O157:H7, named as LysECP26, was identified and purified. This endolysin had a lysozyme-like catalytic domain, but differed markedly from the sequence of lambda phage endolysin. LysECP26 exhibited strong activity with a broad lytic spectrum against various gram-negative strains (29/29) and was relatively stable at a broad temperature range (4℃-55℃). The optimum temperature and pH ranges of LysECP26 were identified at 37℃-42℃ and pH 7-8, respectively. NaCl supplementation did not affect the lytic activity. Although LysECP26 was limited in that it could not pass the outer membrane, E. coli O157: H7 could be effectively controlled by adding ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and citric acid (1.44 and 1.14 log CFU/ml) within 30 min. Therefore, LysECP26 may serve as an effective biocontrol agent for gram-negative pathogens, including E. coli O157:H7.
Lactobacillus acidophilus NCFM, Lactobacillus casei YIT 9018, Bifidobacterium longum 8001, and Bifidobacterium longum 8025 at the level of 106 cfu/$m\ell$ were cultured with 104 cfu/$m\ell$ of Escherichia coli O157:H7 KSC 109 or Salmonella typhimurium ATCC14028, in order to verify the effects of lactic acid bacteria and bifidobacteria on the growth of the pathogens. In the mixed culture of lactic acid bacteria with E. coli O157:H7 KSC 109, Growth inhibition and atypical microcolonies of E. coli O157:H7 KSC 109 were observed. The pathogens inoculated grew for 5 hors (pH 5.3), by the time L. acidophilus NCFM reached the exponential growth phase, and then the surviving pathogens were decreased to 101 cfu/$m\ell$ after 35 hours. When L. caseiYIT 9018 was grown with the pathogens, they grew for 10 hours (pH 4.6), by the time L. casei YIT 9018 reached the end of exponential growth phase, and then the surviving pathogens were decreased drastically. Up to the stationary growth phase of lactic acid bacteria, L. acidophilus NCFM exhibited stronger inhibition against the pathogens than L. casei YIT 9018 did, which might be attributed to its faster growth. Likewise bifidobacteria inhibited the growth of the pathogens tested, bifidobaceria was weaker in the inhibitory activity than lactic acid bacteria. When Bifidobacterium longum 8001 was cultured with the pathogens, E. coli O157:H7 KSC 109 was gradually ingibited at the stationary growth phase of bifidobacteria, atypical microcolonies were formed on Levine EMB medium after 48 hours, and Salmonella grew up to 106 dfu/$m\ell$, then was drastically ingibited at the exponential growth phage of Bifidobacterium longum 8001. But when Bifidobacteriuam longum 8025 was cultured with the pathogens, the pathogens grew to the same level of Bifidobacteriuam longum 8025 was cultured with the pathogens, the pathogens grew to the same lever of Bifidobacteriuam longum 8025 after 10 hours, then the surviving pathogens were decreased drastically.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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