In single-molecule fluorescence experiment, the oxygen scavenging system is indispensable for avoiding photo-bleaching of fluorescent dyes. Here we report that the gloxy-based oxygen scavenging system commonly used in single molecule fluorescence experiments can disturb the solution pH considerably. To track in situ pH change, we utilized the pH-sensitive conformational transition of i-motif and examined the transition with ensemble and single-molecule FRET measurements. Based on our results, we also suggested several practical remedies for the stability of the solution pH.
Drug release experiments were performed based on pH-sensitive swelling behaviors of polymethacrylic acid. 5-Fluorouracil as a nonionic model drug revealed release patterns depending solely on pH-dependent swelling kinetics of polymethacrylic acid. In contrast, release of propranolol hydrochloride as a cationic model drug was significantly affected by ionic drug-polymer interaction as well as the swelling kinetics. Accordingly, a zero-order release pattern was obtained at pH 7, which was distinguished from the general matrix type drug release pattern.
The reaction between silver (I) and thiomicher's ketone (TMK) was sensitive at pH 5 and 8 in the presence of non-ionic or anion surfactant. We studied the complex solution and determined the properties by beta-correction spectrophotometry, which included the complex ratio and the stability constant of the complex. The results showed that complex Ag(TMK)2 was formed in the presence of alkylphend ethoxylates (emulsifier OP) and Ag(TMK)2 was formed in the presence of sodium dodecyl benzene sulfonate (SDBS). Their real absorptivities are as follows: $\varepsilonAg(TMK)540$ = 5.23 ${\times}$ 10(4), $\varepsilonAg(TMK)2(555)$ = l.05 ${\times}$ 10(5) Lmol(-l)cm(-1) both at pH 5 and $\varepsilonAg(TMK)2(555)$ = 7,52 ${\times}$ 10(4)lmol(-1)cm(-1) at pH 8. The stability constant of complex Ag(TMK) was equal to 1.23 ${\times}$ 10(5) at pH 5 and that of Ag(TMK)2 8.29 ${\times}$ 10(9) at pH 5 and 1.15 ${\times}$ 10(11) at pH 8.
Treatment of colorectal cancer (CRC) has always been challenged by the development of resistance. We investigated the antiproliferative activity of licochalcone H (LCH), a regioisomer of licochalcone C derived from the root of Glycyrrhiza inflata, in oxaliplatin (Ox)-sensitive and -resistant CRC cells. LCH significantly inhibited cell viability and colony growth in both Ox-sensitive and Ox-resistant CRC cells. We found that LCH decreased epidermal growth factor receptor (EGFR) and AKT kinase activities and related activating signaling proteins including pEGFR and pAKT. A computational docking model indicated that LCH may interact with EGFR, AKT1, and AKT2 at the ATP-binding sites. LCH induced ROS generation and increased the expression of the ER stress markers. LCH treatment of CRC cells induced depolarization of MMP. Multi-caspase activity was induced by LCH treatment and confirmed by Z-VAD-FMK treatment. LCH increased the number of sub-G1 cells and arrested the cell cycle at the G1 phase. Taken together LCH inhibits the growth of Ox-sensitive and Ox-resistant CRC cells by targeting EGFR and AKT, and inducing ROS generation and ER stress-mediated apoptosis. Therefore, LCH could be a potential therapeutic agent for improving not only Ox-sensitive but also Ox-resistant CRC treatment.
Sin, Mun-Sik;Gang, Hyeong-Seok;Park, Tae-Gwan;Yang, Ji-Won
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.04a
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pp.562-565
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2000
pH- and thermo-sensitive hydrogels containing maleilated chitosan(MC) and N-isopropylacrylamide(NIPAAm) were prepared and characterized for their swelling behavior, biodegradability and drug release profiles. The hydrogels exhibited a typical pH-sensitivity due to the carboxylic acid groups of maleilated chitosan. The change of ratio of NIPAAm to MC in weight did not affect on either lower critical solution temperature(LCST) or EWC significantly. The pH sensitivity of the hydrogel, however, depended on the amounts of carboxylic acid groups of MC. MC was degradable up to 80% weight reduction in 2 hours. The in vitro drug relase profiles were established both in buffer solution pH 1.4 and pH 7.4. Only a negligible amount of indomethacin was released at pH 1.4 in 6 hours, while at pH 7.4 more than 90% of the total drug in the hydrogel was gradually released over ca. 5 hours.
A single factorial experiment was conducted to test the effects of three dietary levels of energy on mRNA expression of fatty acid synthase (FAS-mRNA) and hormone-sensitive lipase (HSL-mRNA) and their association with intramuscular fat in finishing pigs. 72 crossbred (Large $White{\times}Rongchang$) barrows with an average initial body weight of 20.71 (s.e. 0.1) kg, were randomly allotted to three dietary treatments (11.75, 13.05 and 14.36 MJ DE/kg) and fed until slaughtered at 100 or 101 kg. The diets were iso-nitrogenous and iso-essential amino acids. The growth performances including the duration of finishing were changed linearly (p<0.05) or quadratically (p<0.05) with increased dietary energy levels. The effects of dietary energy content on the percentage of external fat, intramuscular backfat and the fat thickness were linear (p<0.05). The content of dietary energy increased FAS-mRNA linearly or quadratically, while HSL-mRNA decreased linearly or quadratically in backfat and Longissmus dorsi muscle. Meanwhile, significant positive correlations (p<0.05) were found between energy level and intramuscular fat, FAS-mRNA or the ratio of FAS-mRNA to HSL-mRNA, between the ratio of FAS-mRNA to HSL-mRNA and intramuscular fat. However, the correlations between HSL mRNA and dietary energy or intramuscular fat were negative (p<0.05). The results indicated that dietary energy level regulates lipid accumulation, especially intramuscular fat, possibly by modulating the mRNA of FAS and HSL together rather than individually.
To determine effectively the chitinolytic activity of rCHT1 from the hard tick H. longicornis expressed in baculovirus-mediated Spodoptera frugtperda (Sf) 9 cells, a simple and sensitive assay system was established in solid phase using agarose gel containing ethylene glycol chitin as substrate. The various factors affecting the efficacy of the assay were also investigated. The effects of various temperature, dosages of proteins, pH of media and time courses of reaction were examined to verify the sensitivity of assay for chitinolytic activity of rCHT1 protein. It was found that the optimal reactive conditions were $37^{\circ}C$ of temperature, 12 to 15 hours of reactive times, $0.1{\mu}g$ of protein concentration and pH 5 to 7 of media. Using the assay system designed, the functional activities of H. longicornis rCHT1l protein could be evaluated simply and sensitively.
A culture system for lactating rat mammary acini was evaluated, where the primary indicator of performance was lactose secretion, measured by a sensitive bioluminescence assay. Lactose secretion was reduced by half (p<0.01) over the first 6 h of culture by overnight feed withdrawal (FW) from tissue donors but was sensitive to increased glucose concentration in the culture media (p<0.001) up to 30 mM. Lactose production of cells from fed donors over the first 6 h in culture in 30 mM glucose was 8.9 fmol/cell/h - a rate calculated to be about half that in vivo. No significant difference was shown in lactose secretion by cells from fed or FW rats over 6-24 h. Lactose secretion was 3.6 fmol/cell/h by cells from fed animals in 40 mM glucose concentration media over the 6-24 h culture period. Addition of insulin to the culture media had no effect on rates of lactose secretion while addition of prolactin and hydrocortisone, with or without insulin, significantly (p<0.001) decreased lactose production over both 0-6 h and 6-24 h culture periods. Lactose synthesis in vitro was significantly enhanced by aeration of the media during collagenase digestion of mammary tissue (p<0.05). No improvement in lactose secretion was effected by shaking of cells during culture, Matrigel coating of culture dishes or change in cell density over a range up to 2.5 million cells per ml.
The object of this study was to evaluate lotic ecosystem health using multiple eco-metric approaches such as water chemistry diagnosis, physical habitat health evaluations, and biological integrity modeling at 100 streams of four major watersheds. For the study, eight chemical water quality parameters such as nutrients (N, P) and organic material were measured and 11-metric models of Qualitative Habitat Evaluation Index (QHEI) and multiple eco-metric health assessment model (MEHA) were applied to the four major watershed. Nutrient analysis of nitrogen (N) and phosphorus (P) in all watersheds indicated a eutrophic state depending on the locations of sampling streams. Physical habitat health, based on the QHEI model, averaged 114 (range: 56 - 194), judging as a "good condition" by the criteria of Plafkin et al. (1989). In addition, primary (H1 - H4), secondary (H5 - H7), and tertiary habitat metric variables (H8 - H11) were analyzed in relation to the physical habitat degradations. The plots of tolerant species ($P_{TS}$) and sensitive species ($P_{SS}$) to water quality showed that the proportions of $P_{TS}$ had positive linear functions with nutrients, and that the $P_{SS}$ had inverse linear relations with the chemical variables. The model of eco-metric health assessment showed that mean MEHA was 20.4, indicating a fair condition. Overall, our data suggest that water chemistry, based on nutrients and organic matter, directly modified the trophic structures in relation to food chain in the aquatic ecosystems, and then these directly influenced the compositions of tolerance/sensitive species, resulting in degradations of overall ecological health.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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