The denature polyacrylamide gel stain silver nitrate is used for routine nucleic acid detection. More sensitive stains, such as Vistra Green, SYBR Green are available to address a broad range of DNA applications requiring lower detection limits in polyacrylamide gel formats. Gel Scanners, laser-scanning instruments, provide sensitive fluorescence detection of DNA gel stains. We established one step fluorescent impregnation enhanced sensitivity with simple, rapid and low cost. We have applied this fluorescent staining procedure for the routine analysis of DNA profiles generated by SSR amplification.
We used cDNA microarray to assess gene expression profiles in hematopoetic cell line, U-937, exposed to low doses of ionizing irradiation. The 1,000 DNA elements on this array were PCR-amplified cDNAs selected from named human cancer related genes. According to the strength of irradiation, the levels of some gene expression were increased or decreased as dose-dependent manner. The gene expressions of Tubulin alpha, protein kinase, interferon-alpha, -beta, -omega receptor and ras homolog gene family H were significantly increased. Especially, Tubulin gene was shown 2.5 fold up-regulated manner under stress of 500 rad irradiation than 200 rad. On the other hand, fibroblast growth factor 12 and four and a half LIM domains, etc. were significantly down-regu-lated. Also, tumor protein 53(TP53) related genes that p53 inducible protein, tumor protein 53-binding protein looks of little significance as radiation sensitive manner. The radio-sensitivity of tubulin gene etc. that we proposed could be useful to rapid and correct survey for the bio-damage by exposure to low dose irradiation.
A DF01 strain that inhibits tyramine-producing Lactobacillus curvatus KFRI 166 was isolated from Dongchimi, a traditional Korean fermented vegetable, and identified as Lactobacillus brevis by biochemical analysis and reverse transcriptase sequencing of 16S rRNA. The antimicrobial compound produced by L. brevis DF01 was secreted at a maximum level of 640 AU/mL in late exponential phase in MRS broth, and its activity remained constant during stationary phase. The activity of bacteriocin DF01 was totally inactivated by $\alpha$-chymotrypsin, pronase E, proteinase K, trypsin, and $\alpha$-amylase, but not by catalase, which indicates the compound was glycoprotein in nature. The activity was not affected by pH changes ranging from 2 to 12 or heat treatment (60, 80, and $100^{\circ}C$ for 30 min), but was reduced after autoclaving. Bacteriocin DF01 had bacteriolytic activity and a molecular weight of approximately 8.2 kDa, as shown by tricine-SDS-PAGE analysis. Therefore, bacteriocin DF01 can be used in the manufacture of fermented meat products due to its inhibition of tyramine-producing L. curvatus and non-inhibition of L. sake, which is used as a starter culture for meat fermentation.
Xanthomonas campestris pv. glycines 8ra causes bacterial pustule disease on susceptible soybean leaves and produces a bacteriocin, named glycinecin, against related bacteria such as Xanthomonas campestris pv. vesicatoria. The antimicrobial activity of the glycinecin was effective to most tested Xanthomonas species. X. c. pv. glycines 8ra was able to produce the glycinecin in liquid media as well as solid media. Maximal productivity of glycinecin was obtained at 3$0^{\circ}C$ in the early stationary phase of growth of the X. c. pv. glycines 8ra. The production of glycinecin was not dependent on the initial inoculum level but on cell density. Glycinecin was very sensitive to proteolytic enzymes such as trypsin and proteinase K but resistant to DNase and RNase. The culture supernatant of X. c. pv. glycines 8ra retained some of its antimicrobial activity after 15 min at 6$0^{\circ}C$. It is stable at wide range of pH. The glycinecin showed the bactericidal activity after the adsorption of the glycinecin to the sensitive bacterial cell.
Tumor necrosis factor (TNF) signaling is mediated via two distinct receptors, TNFR2 and TNFR1, which shows partially overlapping signaling mechanisms and biological roles. In the present study, TNFR2 and TNFR1 signal transduction mechanisms involved in activation of $NF{\kappa}B$ and CMV promoter-enhancer were compared with respect to their susceptibility towards inhibitors of intracellular signaling. For this, we used SW480 cells, where we have shown that TNF-signaling can occur independently through each of the two receptors. The TNFR1 response was inhibited by D609, bromophenacyl bromide (BPB), nordihydroguararetic acid (NDGA), and by sodium salicylate, while TNFR2-mediated activation of $NF{\kappa}B$ and CMV promoter-enhancer was resistant to these compounds. The signaling mechanisms known to be affected by these inhibitors include phospholipases as well as redox- and pH-sensitive intracellular components. Our results imply that TNFR2 signaling involved in $NF{\kappa}B$ activation proceeds independently of these inhibitor-sensitive signaling components, indicating distinct signaling pathways not shared with TNFR1.
A wireless sensing system is designed for application to structural monitoring and damage detection applications. Embedded in the wireless monitoring module is a two-tier prediction model, the auto-regressive (AR) and the autoregressive model with exogenous inputs (ARX), used to obtain damage sensitive features of a structure. To validate the performance of the proposed wireless monitoring and damage detection system, two near full scale single-story RC-frames, with and without brick wall system, are instrumented with the wireless monitoring system for real time damage detection during shaking table tests. White noise and seismic ground motion records are applied to the base of the structure using a shaking table. Pattern classification methods are then adopted to classify the structure as damaged or undamaged using time series coefficients as entities of a damage-sensitive feature vector. The demonstration of the damage detection methodology is shown to be capable of identifying damage using a wireless structural monitoring system. The accuracy and sensitivity of the MEMS-based wireless sensors employed are also verified through comparison to data recorded using a traditional wired monitoring system.
Jeong Min Yoo;Ji Hoon Song;Robie Vasquez;In-Chan Hwang;Jae Seung Lee;Dae-Kyung Kang
Food Science of Animal Resources
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v.43
no.4
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pp.625-638
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2023
Among various biological agents, bacteriocins are important candidates to control Listeria monocytogenes which is a foodborne pathogen. In this study, a novel bacteriocin, named agilicin C7, was isolated from Ligilactobacillus agilis C7 showing inhibitory activity against L. monocytogenes. Agilicin C7 biosynthesis gene was characterized by bioinformatics analyses and heterologously expressed in Escherichia coli for further study. The anti-listeria activity of recombinant agilicin C7 (r-agilicin C7) was lost by proteases and α-amylase, suggesting that agilicin C7 is a glycoprotein. r-Agilicin C7 has wide pH and thermal stability and is also stable in various organic solvents. It destroyed L. monocytogenes by damaging the integrity of the cell envelope. These properties of r-agilicin C7 indicate that agilicin C7 is a novel amylase-sensitive anti-listerial Class IId bacteriocin. Physicochemical stability and inhibitory activity against L. monocytogenes of r-agilicin C7 suggest that it can be applied to control L. monocytogenes in the food industry, including dairy and meat products.
The objective of this study was to characterize the bactericidal effect of 461nm visible-light LED on three common foodborne bacteria: Escherichia coli O157:H7, Staphylococcus aureus and Vibrio parahaemolyticus. Tests were conducted against pathogen strains that were treated with 461nm LED for 10 h at $15^{\circ}C$. The E. coli (ATCC 43894, ATCC 8739 and ATCC 35150) and the S. aureus (ATCC 27664, ATCC 19095 and ATCC 43300) had average reductions of 2.5, 6.6, 1.5, 2.5 and 2.0 log CFU/mL, respectively, after they were exposed for 10 h to 461nm LED light (p<0.05). In contrast, V. parahaemolyticus (ATCC 43969) had 6 log CFU/mL reductions after it was exposed for 4 h to 461nm LED light. The results showed that both the Gram-positive and Gram-negative bacteria were inactivated with 461nm LED light exposure. Also, the Gram-negative bacteria were more sensitive to the LED treatment than the Gram-positive bacteria. These results show the potential use of 461nm LED as a food preservation and application technology.
This study was carried out to explore the most sensitive and useful method for simultaneous determination of five sulfa drugs(sulfamethazine, sulfamerazine, sulfamonomethoxine, sulfadimethoxine, sulfaquinoxaline) in livestock productions(pork muscle, bovine muscle, chicken muscle, milk ) by HPLC with UV detector and reverse phase column. The results obtained were as follows:1. For mobile phase acetonitrile-0.01M ammonium acetate (23:77) showed more applicable sensitivity and retention times than acetonitrile-1% acetic acid(23:77). Thus acetonitrile-0.01M ammonium acetate(23:77) selected and applied to the modification test, from which it was found pH 6.75 was the most adequate. 2. Optimal wavelength of UV for SMT(sulfamethazine), SMR(sulfamerazine), SMM(sulfamonomethoxine), SD(sulfadimethoxine), and SQ(sulfaquinoxaline) were 266, 266, 265, 269 and 250nm, respectively, and that for simultaneous application it was 263nm. 3. The average recovery rate by extractant(chloroform, dichloromethane, chlorform+dich-loromethane) in the classic method was not significantly different(p>0.05) but that by chloroform higher than the others. Thus chloroform was found to be adequate as extractant in this classic method. 4. The average recovery rate was 86.5% by the MSPD(matrix solid phase disperse) method, which was significantly higher than that by the classic method(p<0.05). Also the recovery rates by method were significantly different(p<0.05) in accordance with sample and type of drug. The MSPD method was much superior to classic method on clean-up.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.3
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pp.528-533
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1997
This study was undertaken to determine the antimutagenic effects of Synurus deltoides extracts on the mutagenesis induced by 3-amino-1, 4-dimethyl-5-H-pyrido[4, 3-blindol(Trp-P-1), 2-amitnofluorene (2-AF) and 4-nitroquinolin-1-oxide(4NQO) using Ames test. Raw juice, heated juice, and ethanol extract from Synurus deltoides itself did not induce mutagenesis. The raw juice, heated juice and ethanol extract of 50${mu}ell$/plate showed approximately 90%, 37% and 28% inhibitory effect on the mutagenesis induced by Trp-P-1 against TA98 strain, while 80%, 60% and 58% inhibition was observed on the mutagenesis induced by 2-AF at the concentration of 200${mu}ell$/plate, respectively. TA100 strain was more sensitive than TA98 strain by raw juice, heated juice and ethanol extract on the mutagenesis induced by Trp-P-1 and 2-AF. Meanwhile, the raw juice, heated juice, and ethanol extract showed very limited inhibitory effects on the mutagenesis induced by 4-NQO against TA98 and TA100 strain. These results indicate that raw juice had the strongest inhibitory effect on the Trp-P-1 or 2-AF induced mutagenesis, but all of the extracts had a little antimutagenc effects on the 4-NQO induced mutagenesis.
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