Enzymatic hydrolysis of dark muscle of skipjack was optimized by using response surface methodology. Three factors of independent values were pH (4.2 to 9.8), time (0.6 to 3.4 hrs) and temperature (34℃ to 76℃), and independent values were optical density and brix. The optimum conditions for enzymatic hydrolysis were pH 7.0 to 8.0, 55℃ and 3 hrs. The headspace volatile compounds of reaction flavors using the enzymatic hydrolysate, cysteine and xylose were identified by using the combination of a canister system, gas chromatography and mass selective detector. Among 67 compounds, we identified 8 sulfur-containing compounds and 7 furans which were thought to be highly related to meat-like flavors.
We established an in vitro system to investigate transcription levels of the RsMYB1 gene expressed in T2 20-day-old transgenic Petunia plants (three independent lines: PhRs1, PhRs2, and PhRs3), and the association between those transcription levels and anthocyanin production at various pH values (3.0 to 8.0) for a period of 10 days. All the lines treated with pH 5.0-7.0 exhibited increased anthocyanin content and delays in growth compared to the wild-type (WT) seedlings. Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) analysis confirmed that the enhancement of anthocyanin production in the transgenic lines was due to the upregulation of RsMYB1 transcription at various pH values. The results suggest that pH value can control expression of RsMYB1 which is associated with anthocyanin production.
This study was designed to investigate the stability of a lipase fused with a cellulosebinding domain (CBD) to cellulase. The fusion protein was derived from a gene cluster of a CBD fragment of a cellulase gene in Trichoderma hazianum and a lipase gene in Bacillus stearothermophilus L1. Due to the CBD, this lipase can be immobilized to a cellulose material. Factors affecting the lipase stability were divided into the reaction-independent factors (RIF), and the reaction-dependent factors (RDF). RIF includes the reaction conditions such as pH and temperature, whereas substrate limitation and product inhibition are examples of RDF. As pH 10 and $50^{\circ}C$ were found to be optimum reaction conditions for oil hydrolysis by this lipase, the stability of the free and the immobilized lipase was studied under these conditions. Avicel (microcrystalline cellulose) was used as a support for lipase immobilization. The effects of both RIF and RDF on the enzyme activity were less for the immobilized lipase than for the free lipase. Due to the irreversible binding of CBD to Avicel and the high stability of the immobilized lipase, the enzyme activity after five times of use was over $70\%$ of the initial activity.
An enzymatic reaction system was developed and optimized for bioconversion of resveratrol from glucose. Liquid enzyme extracts were prepared from Alternaria sp. MG1, an endophytic fungus from grape, and used directly or after immobilization with sodium alginate. When the enzyme solution was used, efficient production of resveratrol was found within 120 min in a manner that was pH-, reaction time-, enzyme amount-, substrate type-, and substrate concentration-dependent. After the optimization experiments using the response surface methodology, the highest value of resveratrol production (224.40 μg/l) was found under the conditions of pH 6.84, 0.35 g/l glucose, 0.02 mg/l coenzyme A, and 0.02 mg/l ATP. Immobilized enzyme extracts could keep high production of resveratrol during recycling use for two to five times. The developed system indicated a potential approach to resveratrol biosynthesis independent of plants and fungal cell growth, and provided a possible way to produce resveratrol within 2 h, the shortest period needed for biosynthesis of resveratrol so far.
Outbreak of animal infectious diseases such as foot-and-mouth disease, avian influenza are becoming prevalent worldwide. For prevent the further infection, tremendous numbers of the infected or culled stocks are buried around farm. This burial method can generate a wide range of detrimental components such as leachate, nutrient, salt, and pathogenic bacteria, consequently. In this study, for the stabilization of livestock carcasses leachate, advanced oxidation processes utilizing the Fenton reaction was investigated in lab-scale experiments for the treatment for $COD_{Cr}$ of livestock carcass leachate. $COD_{Cr}$ reduction by the Fenton oxidation was investigated response surface methodology using the Box-Begnken methods were applied to the experimental results. A central composite design was used to investigate the effects of the independent variables of pH ($x_1$), dosage of $FeCl_2{\cdot}4H_2O$ ($x_2$) and dosage of $H_2O_2$ ($x_3$) on the dependent variables $COD_{Cr}$ concentration ($y_1$). A 1 M NaOH and $H_2SO_4$ was using for pH control, $FeCl_2{\cdot}4H_2O$ was used as iron catalyst and NaOH was used for Fenton reaction. The optimal conditions for Fenton oxidation process were determined: pH, dosage of $FeCl_2{\cdot}4H_2O$ and dosage of $H_2O_2$ were 3, 0.6 g (0.0151 M) and 7 mL(0.259 M), respectively. Statistical results showed the order of significance of the independent variables to be pH > initial concentration of ferrous ion > initial concentration of hydrogen peroxide.
Lee, Yang-Bong;Raghavan, Sivakumar;Nam, Min-Hee;Choi, Mi-Ae;Hettiarachchy, Navam S.;Kristinsson, Hordur G.;Marshall, Maurice R.
Preventive Nutrition and Food Science
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제14권4호
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pp.323-328
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2009
Cryotin F could be used for hydrolyzing shrimp byproducts into bioactive ingredients, which could be used as value-added products. The objective of this study was to investigate the optimum condition for antioxidative activities of the enzymatic hydrolysate produced with Cryotin F using response surface methodology with central composite rotatable design. Shrimp byproducts (shells and heads) were hydrolyzed with Cryotin F. The experimental ranges of the independent variables for 20 experimental runs were 28.2-61.8${^{\circ}C}$ reaction temperature, pH 6-10 and 0.5-5.5% enzyme concentration. The degree of hydrolysis for the reaction products was measured. Their antioxidative activities were measured using 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) scavenging activity and Fe-chelating activity. The experimental method with central composite rotatable design was well designed to investigate the optimum condition for biofunctional ingredients with antioxidative activities using Cryotin F because of their high R2 values of 0.97 and 0.95 for DPPH-scavenging activity and Fe-chelating activity, respectively. Change in enzyme concentration did not significantly affect their antioxidative activities (p<0.05). Both DPPH scavenging activity and chelating activity against Fe for the enzyme hydrolysates were more affected by the pH of enzyme hydrolysis than by their action temperature. DPPH-scavenging activity was higher at acidic pH than alkali pH, while chelating activity against Few was inversely affected. Hydrolysate of shrimp byproducts showed high antioxidative activities depending on the treatment condition, so the optimum treatment of enzymatic hydrolysate with Cryotin F and other proteases can be applied to shrimp byproducts (shells) and other protein sources for biofunctional ingredients.
Objective: To investigate changes in rumen fermentation characteristics and bacterial community by a sudden change to a high concentrate diet (HC) in Korean domestic ruminants. Methods: Major Korean domestic ruminants (each of four Hanwoo cows; $545.5{\pm}33.6kg$, Holstein cows; $516.3{\pm}42.7kg$, and Korean native goats; $19.1{\pm}1.4kg$) were used in this experiment. They were housed individually and were fed ad libitum with a same TMR (800 g/kg timothy hay and 200 g/kg concentrate mix) twice daily. After two-week feeding, only the concentrate mix was offered for one week in order to induce rapid rumen acidosis. The rumen fluid was collected from each animals twice (on week 2 and week 3) at 2 h after morning feeding using an oral stomach tube. Each collected rumen fluid was analyzed for pH, volatile fatty acid (VFA), and $NH_3-N$. In addition, differences in microbial community among ruminant species and between normal and an acidosis condition were assessed using two culture-independent 16S polymerase chain reaction (PCR)-based techniques (terminal restriction fragment length polymorphism and quantitative real-time PCR). Results: The HC decreased ruminal pH and altered relative concentrations of ruminal VFA (p<0.01). Total VFA concentration increased in Holstein cows only (p<0.01). Terminal restriction fragment length polymorphism and real-time quantitative PCR analysis using culture-independent 16S PCR-based techniques, revealed rumen bacterial diversity differed by species but not by HC (p<0.01); bacterial diversity was higher in Korean native goats than that in Holstein cows. HC changed the relative populations of rumen bacterial species. Specifically, the abundance of Fibrobacter succinogenes was decreased while Lactobacillus spp. and Megasphaera elsdenii were increased (p<0.01). Conclusion: The HC altered the relative populations, but not diversity, of the ruminal bacterial community, which differed by ruminant species.
The kinetics and mechanism of reduction of Cu(II) with an excess D-penicillamine have been examined at pH = 6.2 and 0.60M in ionic strength. The reaction at the initial stage is biphasic with a rapid complexation process to give "red" transient complex of $[Cu(II)(pen)_2]^2$- that is partially reduced to another transient "brown" intermediate. The "brown" intermediate is finally reduced to diamagnetic "yellow" complex, $[Cu(I)(Hpen)]_n$. The final reduction process is pseudo-first order in ["brown" transient] disappearance $with {\kappa} = {{\kappa}_{3a} + {\kappa}_{3b}[pen]^{2-}},$ where ${\kappa}_{3a} = (5.0{\pm}0.8){\times}10^{-3}sec^{-1}$ and ${\kappa} = (0.14{\pm}0.02) M^{-1}sec^{-1}$ at $25^{\circ}C$. The activation parameters for the $[H_2pen]$-independent and $[H_2pen]$-dependent paths are ${\Delta}H^{\neq} = (52{\pm}5)kJmol^{-1},$ and ${\Delta}S^{\neq} = ( - 27{\pm}3)JK^{-1}mo^{l-1},$ and ${\Delta}H^{\neq} = (56{\pm}2)kJmol^{-1}$ and ${\Delta} S^{\neq} = ( - 18{\pm}0.7)JK^{-1}mol^{-1}$ respectively. The nature of "brown" intermediate is not clearly identified, but this intermediate seems to be in the mixed-valence state, judging from the kinetic and spectroscopic informations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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