Purpose: Puromycin aminonucleoside (PAN) specifically injures podocytes, leading to foot process effacement, actin cytoskeleton disorganization, and abnormal distribution of slit diaphragm proteins. p130Cas is a docking protein connecting F-actin fibers to the glomerular basement membrane (GBM) and adapter proteins in glomerular epithelial cells (GEpCs; podocytes). We investigated the changes in the p130Cas expression level in the PAN-induced pathological changes of podocytes in vitro. Methods: We observed changes in the p130Cas expression in cultured rat GEpCs and mouse podocytes treated with various concentrations of PAN and antioxidants, including probucol, epigallocatechin gallate (EGCG), and vitamin C. The changes in the p130Cas expression level were analyzed using confocal immunofluorescence imaging, Western blotting, and polymerase chain reaction. Results: In the immunofluorescence study, p130Cas showed a diffuse cytoplasmic distribution with accumulation at distinct sites visible as short stripes and colocalized with P-cadherin. The fluorescences of the p130Cas protein were internalized and became granular by PAN administration in a dose-dependent manner, which had been restored by antioxidants, EGCG and vitamin C. PAN also decreased the protein and mRNA expression levels of p130Cas at high doses and in a longer exposed duration, which had been also reversed by antioxidants. Conclusion: These findings suggest that PAN modulates the quantitative and distributional changes of podocyte p130Cas through oxidative stress resulting in podocyte dysfunction.
Ha, Tae-Sun;Lee, Jin-Seok;Choi, Ji-Young;Park, Hye-Young
Journal of Ginseng Research
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제37권1호
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pp.94-99
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2013
Proteinuric conditions demonstrate structural and compositional changes of the foot processes and slit diaphragms between podocytes. p130Cas in podocytes serves as an adapter protein anchoring glomerular basement membrane to actin filaments of podocyte cytoskeleton. To investigate the effect of ginseng total saponin (GTS) on the pathologic changes of podocyte p130Cas induced by diabetic conditions, we cultured mouse podocytes under: 1) normal glucose (5 mM, control); 2) high glucose (HG, 30 mM); 3) advanced glycosylation endproducts (AGE)-added; or 4) HG plus AGE-added conditions and treated with GTS. In confocal imaging, p130Cas colocalized with zonula occludens-1 and synaptopodin connecting to F-actin. However, diabetic conditions relocalized p130Cas molecules at perinuclear cytoplasmic area and reduced the intensity of p130Cas. In Western blotting, diabetic conditions, especially HG plus AGE-added condition, decreased cellular p130Cas protein levels at 24 and 48 h. GTS improved such quantitative and qualitative changes. These findings imply that HG and AGE have an influence on the redistribution and amount of p130Cas of podocytes, which can be reversed by GTS.
The activity of Rb proteins is controlled by post-translational modifications, especially through phosphorylation. Acetylation of Rb2/p130 was reported recently in NIH3T3 cells but its physiological relevance in cell cycle control and tumorigenesis is still unknown. Efforts are underway to investigate possible interplay between Rb2/p130 phosphorylation and acetylation. Here we hypothesized that Rb2/p130 acetylation, like p53 acetylation, may play a role in development of the tumor phenotype. The proposed hypothesis regarding acetylation of Rb2/p130 in tumor VS normal cells was found to be true in our case study of 36 tumor samples. Statistical analysis of results suggest strong correlation among Rb2/p130 acetylation and cancer phenotype.
대표적인 histone deacetylase inhibitor 저해제의 일종일 sodium butyrate에 의한 인체백혈병 U937세포의 증식 억제에 관한 기전 연구를 세포주기 조절 측면에서 조사하였다. MTT assay 및 flow cytometry 분석을 통하여 sodium butyrate의 처리 농도 증가에 따른 U937 세포의 증식억제는 세포주기 G1 arrest 및 apoptosis 유발에 의한 것임을 확인하였다. RT-PCR및 Western blotting 결과에서 sodium butrate에 의한 G1 arrest는 세포주기 G1기에서 S기로의 진입에 중요한 역할을 하는 cyclin D1, E, A, cyclin-dependent kinase (Cdk) 4 및 Cdk6발현의 저해와 p21 및 p27과 같은 Cdk inhibitor의 발현 증가와 연관성이 있었다. Sodium butyrate는 또한 retinoblastoma protein (pRB)및 p130 단백질의 인산화를 저해시켰으나, S기 진행에 중요한 전사조절인자인 E2F-1 및 E2F-4의 의 발현에는 큰 영향이 없었다. 그러나 sodium butyrate에 의한 pRB 및 p130단백질의 인산화 저해는 pRB와 E2F-1및 p130과 E2F-4와의 결합력을 증사시켰다. 본 연구의 결과는 U937세포의 증식억제에 pRB/p130 인산화 억제 및 Cdk inhibitors의 발현 증가가 중요한 역할을 하고있음을 보여주는 것으로, sodium butyrate의 항암기전 이해에 중요한 자료가 될 것이다.
Phenylalanine 고생산용 plasmid pSY130-14는 $\lambda$-phage 유래 온도감수성을 가지고 있으므로 $cI_{857}$ repressor와 PL과 PR을 온도를 올려 phenylalanine의 생산을 유도한다. pSY130-14를 갖는 E.coli AT2471은 kanamycin 무첨가, $38.5^{\circ}C$, 48시간에서 약 30%로 plasmid가 없어지며 첨가에서 안정성이 떨어졌다가 배양시간과 더불어 올라갔는데, 이것은 생육에 피요한 kanamycin gene과 ori만이 남는 것으로 생각된다.
이 연구는 천안시 태조산의 산림 경사 트레킹 시 80bpm 및 130+30bpm의 속도로 걷기 운동 후 정적회복 및 동적회복방법이 회복 중 심박수, 혈중젖산농도, 혈중글루코스에 미치는 영향을 분석하여 산림환경의 경사 트레킹 후 효율적인 회복방법을 알아보고자 하였다. 걷기 운동을 하는데 이상이 없는 20-30대 남자 9명을 대상으로 80bpm 속도와 130+30bpm 속도로 트레킹 후 정적회복방법과 동적회복방법에 따라 얻은 결과를 이원 반복측정 분산분석(Two-way repeated ANOVA)방법으로 분석하였으며, 유의한 차이가 나는 경우 contrast의 repeated 방법을 적용하여 비교 분석하였다. 80bpm 조건에서의 심박수는 방법(p=.008)과 시기(p=.000)에 따라 유의한 차이가 있었으며, 혈중젖산농도는 회복방법에 따라 유의한 차이가 없었으나(p=.401), 시기에 따라 유의한 차이가 나타났다(p=.000). 혈중글루코스는 회복방법에 따라 유의한 차이가 나타나지 않았으며(p=.093), 정적회복방법의 시기에서 유의한 차이가 나타났다(p=.002). 130bpm+30bpm 조건에서의 심박수는 방법(p=.002)과 시기(p=.000)에 따라 유의한 차이가 있었으며, 혈중젖산농도는 방법(p=.001)과 시기(p=.000)에 따라 유의한 차이가 나타났고, 혈중글루코스농도는 방법(p=.721)과 시기(p=090)간 유의한 차이가 나타나지 않았다.
양돈에 있어서 도살체중은 가장 중요한 경제 요인 중의 하나이다. 본 연구는 성장효율과 도체 품질에 크게 영향을 미치지 않고 비육돈의 도살체중을 130kg으로 증가시킬 수 있을 지의 여부를 알아보기 위해 착수되었다. 경남 지역에서 비육돈으로 가장 널리 사용되고있는 정육형 (Yorkshire×Landrace)×Duroc(YLD) 3원 교잡종 암퇘지 160두와 거세돼지 160두를 생체중 90kg에 선발하여 2(성)×2(도살체중; 110 vs. 130kg) ‘factorial’ 실험설계 하에 16돈방에 배치하였다. 공시돈에게는 3,200kcal/kg의 가소화 에너지와 15.5%의 조단백질을 함유하는 공시사료를 무제한 급여하였고, 계획된 체중에 도달하였을 때 도축하여 부분육 수율과 배최장근의 이화학적 특성을 조사하였다. 일당증체량은 거세돼지가 암퇘지보다 높았으나(0.86 vs. 0.79kg; P<0.01) 110kg 대비 130kg 도살체중 구 사이에는 차이가 없었다(0.83 vs. 0.81kg; P>0.05). 등지방두께는 암퇘지와 거세돼지 공히 130kg 도살체중 구가 110kg 도살체중 구보다 높았다(암: 17.6 vs. 21.6mm, 거세: 20.8 vs. 25.1mm). 정육중 삼겹살 비율은 거세돼지가 암퇘지보다 높았고(21.2 vs. 20.5%) 130kg 도살체중 구(21.4%)가 110kg 도살체중 구(20.2%)보다 높았다. 배최장근의 색깔, 48시간 육즙삼출율, 24시간 pH, 조단백질 및 조지방 함량 등의 이화학적 특성은 두 성간 혹은 두 도살체중간 차이를 나타내지 않았다. 110kg 대비 130kg 출하돈의 한계수익은 두당 약 20,000원에 달하였는데, 이 같은 손실은 거의 전적으로 130kg 출하돈의 도체가 너무 커 A, B 도체 등급의 도체중 상한선을 초과했기 때문이다. 그러나 만일 도체중 상한선이 철폐된다는 조건으로 계산하면 130kg 출하돈당 20,000원 이상의 한계수익이 발생할 수 있을 것으로 추정되었다. 이상의 결과는 정육형 비육돈에서는 성장효율이나 육질에 크게 영향을 미치지 않고 도살체중을 130kg까지 증가시킬 수 있고, 따라서 체중이 큰 출하돈을 수용하기 위해서는 ‘좋은 등급’의 도체중 상한선을 증가시킬 필요가 있음을 시사한다.
볶음공정을 거치는 둥굴레의 고유한 향미 생성과정의 연구의 일환으로 볶음처리 하지 않았을 때의 고유한 향기성분과 볶음과정의 휘발성 향기성분을 SPME headspace 방법에 의해 분석하였다. 볶음처리하지 않은 둥굴레 근경은 aldehyde, alcohol, hydrocarbon과 acid류가 많이 나타났으며 향기특성은 전반적으로 풋내가 나타났다. 볶음 처리한 둥굴레는 2-methylpyrazine이 110와 $130^{\circ}C$에서는 발현되지 않았으며 $150^{\circ}C$에서 발현되었으며 2,5-dimethylpyrazine은 $130^{\circ}C$에서 가장 함량이 높은 것으로 나타났다. Hexanal은 $110^{\circ}C$에서 볶음 처리한 경우 130와 $150^{\circ}C$에서 볶음 처리한 경우보다 높게 나타났고, 2-acetyl-1-pyrroline은 $130^{\circ}C$에서 가장 높게 나타났다. 둥굴레를 볶음처리 한 후 주요 정량적 묘사 시험방법에서 2,5-dimethylpyrazine은 130와 $150^{\circ}C$에서 높은 값을 나타내었고 $110^{\circ}C$에서는 낮게 나타났다. $130^{\circ}C$에서 가장 높게 나타난 2-acetyl-1-pyrroline은 미량으로도 향기발현에 큰 영향을 미치는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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