Taxol은 diterpenoid구조를 가진 항암제로서, 난소암과 유방암에 탁월한 효과를 보이지만 다른 항암제와 마찬가지로 독성을 가지고 있어 약물의 체내 혈중농도를 모니터링하는 것이 필요하다. 약물의 혈중농도를 모니터링하는 방법은 HPLC법, ELISA법, RIA법 등이 있으나, RIA법이 민감도 측면에서 또한 간편하다는 점에서 장점이 있다. 본 연구에서는 I-125표지항원을 이용한 방사면역측정법을 확립하기 위해 먼저 taxol유도체를 합성하였다. 먼저 taxol의 C-13 탄소의 곁가지에 위치한 C-2'부분의 hydroxy기를 succinic anhydride와 반응시켜 2'-hemisuccinyltaxol (I)을 합성 (반응수율:80%)하였다. 또한 tyramine을 $^{125}$I로 표지하고 gel chromatopaphy를 통해 정제된 [$^{125}$I]iodotyramine (II) (반응수율:58%)을 얻었다. (I)과 (II)를 반응시켜 2'-[$^{125}$I]iodotyramine-hemisuccinyltaxol (III) (반응수율:96%)을 얻어 $^{125}$I 표지항원으로 사용하였다. Taxol에 대한 항체를 획득하기 위해서 (I)을 BSA에 접합반응시켜 2'-hemisuccinyltaxol-BSA접합체를 합성하였으며, 이것을 토끼에 면역 주사하여 anti-taxol serum을 얻었다. 이 항체에 대한 역가 검정실험에서 1:20의 희석비에서 B/F(%)가 약 40%를 보였다. 이와 같은 결과는 2'-[$^{125}$I]iodotyramino-hemisuccinyltaxol을 표지항원으로 한 taxol의 방사면역측정 방법으로 혈청내 taxol의 농도측정이 가능함을 제시해 준다.
Feng, Peishi;Zhao, Wanqiu;Xie, Qiang;Zeng, Tao;Lu, Lizhi;Yang, Lin
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제31권10호
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pp.1535-1541
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2018
Objective: In birds, three types of melatonin receptors (MTNR1A, MTNR1B, and MTNR1C) have been cloned. Previous researches have showed that three melatonin receptors played an essential role in reproduction and ovarian physiology. However, the association of polymorphisms of the three receptors with duck reproduction traits and egg quality traits is still unknown. In this test, we chose MTNR1A, MTNR1B, and MTNR1C as candidate genes to detect novel sequence polymorphism and analyze their association with egg production traits in Shaoxing duck, and detected their mRNA expression level in ovaries. Methods: In this study, a total of 785 duck blood samples were collected to investigate the association of melatonin receptor genes with egg production traits and egg quality traits using a direct sequencing method. And 6 ducks representing two groups (3 of each) according to the age at first eggs (at 128 days of age or after 150 days of age) were carefully selected for quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: Seven novel polymorphisms (MTNR1A: g. 268C>T, MTNR1B: g. 41C>T, and g. 161T>C, MTNR1C: g. 10C>T, g. 24A>G, g. 108C>T, g. 363 T>C) were detected. The single nucleotide polymorphism (SNP) of MTNR1A (g. 268C>T) was significantly linked with the age at first egg (p<0.05). And a statistically significant association (p<0.05) was found between MTNR1C g.108 C>T and egg production traits: total egg numbers at 34 weeks old of age and age at first egg. In addition, the mRNA expression level of MTNR1A in ovary was significantly higher in late-mature group than in early-mature group, while MTNR1C showed a contrary tendency (p<0.05). Conclusion: These results suggest that identified SNPs in MTNR1A and MTNR1C may influence the age at first egg and could be considered as the candidate molecular marker for identify early maturely traits in duck selection and improvement.
This study investigated the effects of recombinant eel gonadotropin hormone (rJeGTH) produced in silkworms, with and without a carboxyl-terminal peptide from equine chorionic gonadotropin (eCG), on the induction of sexual maturation in female eels Anguilla japonica. Experiments were conducted both in vivo and in vitro. In in vitro trials, germinal vesicle breakdown (GVBD) induction did not significantly differ between rJeFSH and $rJeFSH{\cdot}eCG$ treatments and the control group. However, previous studies did find that rJeLH and $rJeLH{\cdot}eCG$ treatments induced GVBD in female eels. Our in vitro exploration of $estradiol-17{\beta}$ ($E_2$) levels in immature ovarian tissues revealed significantly higher $E_2$ levels in the group treated with $rJeFSH{\cdot}eCG$$1{\mu}g/mL$ than in the control group. In contrast, the in vivo experiments showed no effect of recombinant hormones on the sexual maturation of feminized eels. Previous studies and our own in vitro results have clearly shown that rJeGTH and $rJeGTH{\cdot}eCG$ have a positive effect on the sexual maturation of feminized eels. To develop the activity of rJeGTH in vivo, further studies should confirm circulation time and activity of these hormones in eels' bloodstream, modify the structure of the recombinant gene, and implement additional glycosylation.
본 연구는 2004년-2005년 민가시오갈피나무를 가해하는 오갈피나무이의 생태적 특성을 구명하기 위해 수행되었다. 알의 형태는 촛불모양이며 길이는 $0.40{\pm}0.03mm$이다. 약충은 5령기를 거치며 1령 약충의 체장은 $0.36{\pm}0.03mm$, 종령약충의 체장은 $2.50{\pm}0.25mm$이다. 1년에 2세대를 경과하며, 제 1세대 성충의 우화기간은 7월 중순부터 8윌 상순까지였고, 최성기는 7월 하순 이었다. 제 2세대 성충의 우화기간은 9월 중순부터 10월 상순까지였고, 최성기는 9월 하순 이었다. 월동한 성충은 4월 상순부터 5월 하순까지 월동처에서 오갈피나무의 잎이나 줄기로 이동하기 시작하였고, 이동 최성기는 4월 히순 이었다. 월동성충(♀)은 민가시오갈피나무의 개엽된 잎이나 새로 성장한 줄기를 선호하며, 제 1세대 성충은 종실이 형성되기 시작할 때 주로 종실사이에 산란하나 일부는 가지에도 산란하였다. 성충의 포란수는 $57.5{\pm}23$개 이었다.
Objective: Apoptosis of ovarian granulosa cells (GCs) affects mammalian follicular development and fecundity. This study aimed to explore the regulatory relationship between microRNA-26a (miR-26a) and the 3β-hydroxysteroid-Δ24-reductase gene (DHCR24) gene in porcine follicular granular cells (pGCs), and to provide empirical data for the development of methods to improve the reproductive capacity of pigs. Methods: The pGCs were transfected with miR-26a mimic, miR-26a inhibitor and DHCR24-siRNA in vitro. The cell apoptosis rate of pGCs was detected by the flow cytometry. The secretion levels of estradiol (E2) and progesterone (P) in pGCs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay. Double luciferase validation system was used to detect the binding sites between miR-26a and DHCR24 3'-UTR region. Qualitative real-time polymerase chain reaction and Western blotting were used to verify the DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs, respectively, after transfecting with miR-26a mimic and miR-26a inhibitor. Results: Results showed that enhancement of miR-26a promoted apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. Meanwhile, inhibition of DHCR24 also upregulated the Caspase-3 expression, reduced the BCL-2 expression, promoted pGCs apoptosis, and inhibited E2 and P secretion in pGCs. There were the binding sites of miR-26a located within DHCR24 3'-UTR. Up-regulation of miR-26a inhibited DHCR24 mRNA and protein expression in pGCs. Conclusion: This study demonstrates that miR-26a can promote cell apoptosis and inhibit E2 and P secretion by inhibiting the expression of DHCR24 in pGCs.
Background: The risk of malignancy index (RMI) for the evaluation of adnexal masses is a sensitive tool in certain populations. The best cut off value for RMI 1, 2 and 3 is 200. The cut off value of RMI-4 to differentiate benign from malignant lesions is 450. Our aim was to evaluate the efficiency of four different malignancy indexes (RMI1-4) in a homogeneous population. Materials and Methods: We evaluated a total of 153 non-pregnant women with adnexal masses who did not have a history of malignancy and who were above 18 years of age. Results: A cut-off value of 250 for RMI-1 provided 95.9% inter-observer agreement, yielding 95.9% specificity, 93.5% negative predictive value, 75.0% sensitivity and 82.8% positive predictive value. A cut-off value of 250 for RMI-1 showed high performance in preoperative diagnosis of invasive malignant lesions than cut-off value of 200 in our population. A cut-off value of 350 for RMI-2 provided 94.5% inter-observed agreement, yielding 94.2% specificity, 93.4% negative predictive value, 75.0% sensitivity and 77.4% positive predictive value. RMI-2 showed the higher performance when the cut-off value was set at 350 in our population. A cut-off value of 250 provided 95.2% inter-observer agreement, yielding 95.0% specificity, 93.2% negative predictive value, 75.0% sensitivity, and 88.0% positive predictive value. RMI-3 showed the highest performance to diagnose malignant adnexal masses when the cut-off value was set at 250. In our study, RMI-4 showed similar statistical performance when the cut-off value was set at 400 [(Kappa: 0.684/p=0.000), yielding 93.8% inter-observer agreement, 93.4% specificity, 93.4% negative predictive value, 75.0% sensitivity, and 75.0% negative predictive value]. Conclusions: We showed successful utilization of RMIs in preoperative differentiation of benign from malignant masses. Many studies conducted in Asian and Pacific countries have reported different cut-off values as was the case in our study. We think that it is difficult to determine universally accepted cut-off values for RMIs for common use around the globe.
Background: The DR-$70^{TM}$ immunoassay is a newly developed cancer diagnostic test which quantifies the serum fibrin degradation products (FDP), produced during fibrinolysis, by antibody reaction. The purpose of this study was to evaluate the potential of DR-$70^{TM}$ Immunoassay in screening malignant tumor. Methods: Sample subjects were 4,169 adults, both male and female, who visited the health promotion center of a general hospital from March 2004 to April 2005 and underwent the DR-$70^{TM}$ immunoassay test and other tests for cancer diagnosis. The patient group was defined as 42 adults out of the sample subjects who were newly diagnosed with cancer during the same time period when the DR-$70^{TM}$ immunoassay test was performed. Final confirmation of a malignant tumor was made by pathological analysis. Results: The mean DR-$70^{TM}$ level was $0.83{\pm}0.65{\mu}g/ml$ (range: 0.00 (0.0001)${\sim}7.42{\mu}g/ml)$ in the control group (n=4,127) as opposed to $2.70{\pm}2.33{\mu}g/ml$ (range: $0.12{\sim}9.30{\mu}g/ml)$ in the cancer group (n=42), and statistical significance was established (p<0.0001, Student t-test). When categorized by the type of malignant tumor, all cancer patients with the exception of the subgroups of colon and rectal cancer showed significantly higher mean DR-$70^{TM}$ levels compared with the control group (p<0.0001, Kruscal-Wallis test). The receiver operating characteristic (ROC) curve analysis revealed ${\geq}1.091{\mu}g/ml$ as the best cut-off value. Using this cut-off value, the DR-$70^{TM}$ immunoassay produced a sensitivity of 71.4%, a specificity of 70.1%, a positive predictability of 69.4%, and a negative predictability of 69.2% (1). Conclusion: A significant increase in the mean DR-$70^{TM}$ value was observed in the cancer group (thyroidal, gastric, breast, hepatic and ovarian) com pared with the control group. In particular, the specificity and sensitivity of the DR-$70^{TM}$ immunoassay was relatively high in the subgroups of breast, gastric, and thyroidal cancer patients. There is need for further studies on a large number of malignant tumor patients to see how the DR-$70^{TM}$ level might be changed according to the differentiation grade and postoperative prognosis of the malignant tumor.
본 실험은 인돌의 인체 대장암세포의 경과 및 전이억제와 TJ 활성 조절에 미치는 영향을 알아보기 위해 실험하였다. 인돌은 십자화 야채류인 양배추, 컬리플라워, 브로클리 등에 존재하는 glucosinolate, glucobrassicin의 대사산물 이다. 본 연구의 결과는 인돌이 대장암 세포 HT-29에서 농도 의존적으로 세포증식 저해를 나타내었다. 상처회복 실험을 통한 세포이동성과 세포 침윤성 실험결과 인돌이 암세포의 이동과 침윤성을 억제하였고 투과성상피세포의 전기적 저항성 측정치는 인돌 처리 세포에서 증가하였다. HT-29 세포에서 과발현을 나타내는 밀착결합 단백질인 claudin-1, claudin-5 발현은 인돌 처리로 유전자의 전사수준과 단백질 수준에서 유의적인 감소를 나타내었다. 이상의 결과에서 인돌이 HT-29 세포의 밀착결합과 그 구성 단백질 중 claudin 발현 현상을 회복시키므로 암 경과와 전이 억제를 나타내었다. 결론적으로, 천연 항암화합물인 인돌은 대장암 세포 HT-29에서 밀착결합 단백질인 claudin-1, -5을 억제하여 밀착결합을 활성화하므로 암 진행과 전이를 억제할 수 있는 인돌에 의한 새로운 기전을 보고합니다.
Yong-Ho Kim;Yoo-Kyeong Hwang;Su-Mi Ko;Jung-Min Hwang;Yong-Woo Lee;Hee-Kyung Seong;Dong-Uk Kim
대한의생명과학회지
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제8권4호
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pp.217-221
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2002
Age-related osteopenia and osteoporosis are common in postmenopausal women due to decrease in bone mass and ovarian function. A therapy for osteoporosis would depend on only drugs to inhibit bone loss, hormonal replacement therapy, exercise and dietary supplementation and it is very hard to fad an ideal therapy for osteoporosis as yet. Chlorella which is rich in minerals such as calcium magnesium fatty acids, vitamins and sterol, could be applicable for prevention and co-treatment of osteoporosis, but it has yet to be studied. The purpose of this study was to assess the relationship between the effect of dietary chlorella on bone mineral density (BMD) and nutritional improvement. BMD was measured in the femural neck and lumber spine portion. Nutritional and bone turnover markers from blood samples were assessed serum lkaline phosphatase, hemoglobin, number of erythrocytes and total protein. Studies for the femur neck measurement showed that normal BMD increased 2.1% for the group fed chlorella supplemented diet for four month and increased 6.6% fur group treated for one year when compared to the control group, and for the lumber spine measurements the few month group showed an increase of 9.1% over the control group, the one year group showed an increase of 64.2% over the control group. Hemoglobin content, number of erythrocytes and total protein showed similar increased patterns with BMD measurement, meanwhile, serum alkaline phosphatase increased 3% for the four month group and decrease 16% for the one year group compare to the control group. In conclusion, the postmenopausal women fed chlorella supplemented diet results in an increase in BMD. This is a marked increment in lumber spine, enhancement of nutritional state and stable bone turnover. This data showed a positive relationship between BMD and nutritional change with chlorella treatment, and suggested that chlorella dietary may lead to improving and preventing rapid loss of BMD in postmenopausal women.
Effective estrus detection and artificial insemination (AI) are necessary for profitable management of dairy herd. In current study, 45 crossbred lactating cows have been selected with the complaint of unobserved oestrus for more than sixty days postpartum. All cows had functional corpus luteum as examined by transrectal ultrasonography. Cows were treated with $PGF_2{\alpha}$ analogue and AI was performed with observed oestrus and then single dose of GnRH was administered. Similar synchronization protocol has been repeated after 14 days in cows that did not repose to first treatment. Remaining cows received additional $PGF_2{\alpha}$ after 14 days of second treatment and timed AI was performed following GnRH administration. Among 45 cows, 28.89% showed estrus after first treatment and 78.79% responded to second hormonal intervention. A higher conception rate (88.89% vs 26.66 and 72.72%) was observed in cows after triple administration of $PGF_2{\alpha}$ and timed AI. We noticed a significant differences in body condition score (BCS, 1~5 scale), postpartum period, and daily milk production between cows that either responded of non-responded following first and second hormonal treatment. In addition, there was a significant positive correlation between daily milk production and BCS, age and postpartum days, milk production and estrus/BCS, and milk production/BCS/estrus and conception rate. Depending upon the findings we conclude that hormonal intervention with $PGF_2{\alpha}$ and GnRH enhances postpartum ovarian cyclicity and help decreasing the days open of dairy herd. Therefore, this finding might provide an excellent guideline for target breeding system for profitable dairy herd management.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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