식물조직배양기술을 이용하석 인삼의 주요약리성분인 사포닌을 생산하고자, 식물생장조절물질로 유도된 인삼 root를 사용하여 사포닌 생산을 위한 최적액체배양조건을 RSM으로 조사하였다. 최적액체배양조건을 배지의 pH, sucrose 농도,nitrogen 농도, phosphate 농도의 3 level-4 factor의 fractional factorial design에 의하여 조사한 결과, 인삼 root의 사포닌 함량은 최저 0.174%에서 최고 0.303울까지 나타났다. 다중회귀분석으로 구한 model식을 가지고 등고분석과 3차원분석을 수행한 후 독립변수의 최저 또는 최고수준에서 종속변수가 최대치를 나타내지 않는 phosphate농도 변수에 대하여 model식을 편미분한 결과 인삼 roe떠 사포닌 함량이 최고치를 나타내는 액체배양조건은 pH 5.5, sucrose 5%, nitrogen 50 mg/L, phosphate 93 mg/L 예측되었다. 이렇게 결정된 조건값들을 model식에 대입하여 얻은 예상치는0.308%였다.
The optimal condition for the production of a glucan and a fructan synthesizing enzymes from Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1149 were studied based on the different medium compositions. Response surface methodology was applied to find the optimistic condition showing the relationship between the fermentation response (enzyme activities) and the fermentation variable concentrations of yeast extract, peptone concentration, K2HP04 concentration and sucrose. Optimum medium composition for both enzymes production was $0.75\%$ yeast extract, $0.72\%$ peptone, $1\%$ K2HP04 and $2.17\%$ sucrose. Using this medium, the activities produced in culture was 0.90 U/m~ for glucosyltransferase (GTase) and 0.96 U/ml for fructosyltransferase (FTase). After purification of 1149FTase by consecutive chromatographies using Sephadex G-150 and DEAE-Sepharose, a 1149FTase of 210 kDa on $7\%$ polyacrylamide gel was isolated and it synthesized soluble fructan. The 1149GTase showed a band of 180 kDa on $8\%$ polyacrylamide gel after purification using Bio-Gel P-100 gel chromatography and DEAE-Sepharose ion exchange chromatography and it synthesized insoluble glucan. The linkages of polymers were determined by methylation using Hakomori reagent and following NMR analysis. The glucan was composed of a(1~6) and a(1~3) linkages and the fructan was levan.
검은비늘버섯 병재배용 다수성 톱밥 배지 조성을 구명하고자 5종의 혼합배지 조성에 대하여 재배적 특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 전체 재배기간은 참나무톱밥에 비트펄프, 면실박이 포함된 배지에서 배양일수는 다소 길고, 초발이 소요일수는 짧고 생육일수는 긴 경향을 보여, 포플러톱밥+쌀겨(8:2) 처리에 비해 3-5일 길었다. 유효경수와 병당 수량이 높은 참나무톱밥+비트펄프+면실박(5:3:2)와 참나무톱밥+비트펄프+면실박+콘코브(3:2:2:3) 처리에서 참나무톱밥+쌀겨(8:2, 대조구)에 각각 33%, 12% 증수되었다. 전체 재배기간과 수량을 고려할 때 검은비늘버섯 병재배용 다수성 배지로 참나무톱밥+비트펄프+면실박(5:3:2)이 가장 적합하였다.
길항균을 생물 농약으로 개발하기 위해서는 저렴한 산업용 배지를 이용한 대량 생산 체계를 확립하는 것이 중요하다. 본 연구에서는 풋마름병 방제 효과가 뛰어난 Bacillus amyloliquefaciens SKU-78 균주의 배양조건을 확립하였다. 저가의 산업용 기질로는 콩가루와 옥수수 전분 배지가 균 생장에 가장 효과적이었고, 최초 pH 5.5, 배양 온도 $30^{\circ}C$, 교반속도 150-250 rpm의 조건으로 30 L fermenter를 이용한 배양에서 20 시간째에 최대 생균수($1.2{\times}10^{11}$ CFU/ml)에 도달하였다. 저가의 산업용 배지로 배양한 배양액을 관주 처리하였을 때 65%의 발병 억제 효과를 나타냄으로써 SKU-78 균주의 산업용 배지를 이용한 대량배양의 기초가 마련되었다.
Acinetobacter sp. SY-01가 생산하는 lipase는 소염진통제로 쓰이는 azolerP 의약품 중간체인 두 enantiomer를 가진 rcemate에 대해 enantioselectivity를 가지는 효소로써 chiral drug를 생산하는데 있어 중요한 역할을 수행한다. Acinetobacter sp. SY-01 lipase 효소의 다량 생산을 위한 여러 가지 최적 조건을 조사하였다. 탄소원으로는 여러 가지 천연 오일을 이용하여 실험한 결과 0.2% olive oil이 가장 좋았으며, 최적 온도와 pH는 30도와 pH 7이였다. EH한 금속이온과 유기용매 안정성에 있어서는 $Fe^{2+}$ 과 $Ca^{2+}$ DMSO가 좋은 효과를 나타냇었다. 특히 DMSO는 유기용매가 첨가되지 않았을 때보다 약 2.5배 높은 효소 활성을 나타내었다. 계면활성제 이용에 있어서는 tritom X-100을 이용했을 때 좋은 효과를 나타냈다. Acinetobacter sp. SY-01가 생산하는 lipase 효소의 최적 배지 조성은 0.8% yeast extract, 0.2% olive oil 0.4% triton X-100, 40% DMSO, 0.1 % $NH_4$Cl% 0.4%$K_2HPO_4$ 3.9% $NaH_2PO_4$ 0.03% $CaCl_22H_2O$ 0.01% $FeSO_4$$7H_2O$(pH 7.0)이다.
본 연구에서는 흰목이 균사배양을 위한 최적조건을 분석하였다. 흰목이균주(KMCC04674) 균사체의 대량 배양에 효율적인 영양원 선발을 위하여 M9 기본배지에탄소원 fructose 등 21종, 무기질소원 $(NH_4)_2C_2O_4$, 등 7종, 유기질소원 peptone 등 7종, 아미노산 asparagine 등 14종, 그리고 유기산 acetic acid 등 8종을 각각 1%씩 그리고, 무기염류 KCl 등 13종을 1 mM 농도로 첨가하여 각각에 대한 균사체의 생육을 조사하였다. 또한 선발된 영양성분들에 대한 최적 농도를 알기 위하여 0.1%에서 4.0%까지 배지에 첨가하고 배양 후 흰목이 균사체생육정도를 조사하였다. 그결과, 균사체의 대량배양을 위한 생육최적조건은 온도 $25^{\circ}C$, pH5, 탄소원 4.0% mannitol, 유기질소원 1.0% malt extract, 무기질소원 3.0% $NH_4H_2PO_4$, 아미노산 1.0% glutamic acid, 무기염류는 5mM $CaCl_2$ 그리고유기산 0.5% gluconic acid였다.
This study aimed at developing cryopreservation protocol for chrysanthemum (Dendranthema grandiflora Tzelevcv. peak) shoot apices based on droplet-vitrification procedure, which is a combination of droplet-freezing and solution based vitrification. Progressive preculture of shoot apices in liquid MS medium supplemented with 0.3 and 0.7 M sucrose for 31 and 17 hours, respectively, was found optimum among preculture treatments tested. The composition of both loading and vitrification solutions significantly affected recovery growth of shoot tips before and after cryopreservation. Balancing glycerol and sucrose concentrations in the solutions was beneficial for recovery growth. The highest recovery after cryopreservation was observed when apical shoot tips were extracted from 4-week-old in vitro plantlets, progressively precultured with 0.3-0.5-0.7 M sucrose for 32-16-6 hours, respectively, then treated with loading solution comprising of 1.9 M glycerol + 0.5 M sucrose (35% PVS3 solution). Apices were then dehydrated with the vitrification solution consisted of 50% glycerol + 50% sucrose for 90 minutes then directly immersed in liquid nitrogen.
Starch is widely used as an adhesive material in the paper and corrugated board industry. The adhesion problem of corrugated board is categorized by two main parts called zipper board and white glue line. The object of this research is to investigate the factors affecting the adhesion problem by the gelatinization of various starch solutions and dynamic penetration properties measurements of various commercial base paper and handsheets. Flow property of starch solution is affected by sodium hydroxide addition and reaction level. Absorption property of commercial base papers and handsheets is affected by sizing and stock composition. Optimum bonding between top/bottom liners and corrugated medium is accomplished by acceptable flow viscosity of mixed starch solution and proper adsorption characteristic of base paper.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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