최근 인터넷을 통한 B2B 전자상거래가 국제적으로 확대됨에 따라 단일화된 전자상거래 표준의 정립이 시급히 요구되고 있다. 이에 UN/CEFACT와 OASIS는 국제 단일 전자 시장 형성을 목적으로 ebXML 표준을 채택하였고, 새로운 표준을 따르는 전자상거래 시장에서는 메시징 서비스를 위하여 ebXML 기반 메시지 전송 시스템이 필요하게 되었다. 본 논문에서는 ebXML 메시징 서비스 제공을 위하여 ebXML 메시지를 생성하고 신뢰성있게 전송하며 관리하는 MSH(Message Service Handler)를 구현하였다. 구현한 MSH는 다양한 시스템 환 경을 지원하며, 단순한 인터페이스로 로컬 환경이나 분산 환경에서 MSH를 쉽게 사용할 수 있다. 또한 장애 발생시 메시지 재전송, 중복 메시지 처리, 확인(Acknowledgement) 메시지 전송 등을 통하여 인터넷 상에서 신뢰성 있는 메시지 전송을 보장한다. 개발된 시스템은 현재 ebXML 등록기/저장소 시스템에 적용되고 있다.
Recently many efforts were focused to understand the mechanical insights of melanogenesis to develop the agents for hyper-pigmentation and hypo-pigmentation. In the melanin biosynthetic pathway, tyrosinase is the rate limiting enzyme, and ${\alpha}$-melanocyte stimulating hormone(MSH) or cAMP-elevating agents stimulate melanogenesis and enhance the melanin synthesis and the tyrosinase activity. The author has analyzed the effects of Radix Trichosanthis on the basal melanogenic activities of B16/F10 mouse melanoma cells, and on the ${\alpha}$-MSH or forskolin-induced melanogenesis. Radix Trichosanthis alone markedly suppressed melanin content and tyrosinase activity in a dose-dependent manner. Pretreatment of the cells with Radix Trichosanthis also suppressed the increase of ${\alpha}$-MSH (10 nM) or forskolin (20${\mu}M$)-induced melanin content and tyrosinase activity. The decrease in the tyrosinase activity was paralled by a decrease in the abundance of tyrosinase protein and tyrosinase promoter activity. Pretreatment of the cells with Radix Trichosanthis also inhibited the increase of forskolin($20{\mu}M$) induced the amount of tyrosinase protein and tyrosinase promoter activity. The results of DOPA staining revealed that pretreatment of the cells with Radix Trichosanthis showed less intensity than B16 melanoma cells stimulated with ${\alpha}$- MSH or forskolin. These results suggest that Radix Trichosanthis inhibits melanogenesis and abrogates ${\alpha}-MSH and cAMP-induced melanogenesis in B16 melanoma cells.
본 연구에서는 목형 잎 추출물의 항산화 활성, 성분분석 그리고 mushroom tyrosinase 저해활성 측정, ${\alpha}$-MSH로 유도된 세포 내 멜라닌 생합성에 대한 저해활성에 관한 연구를 수행하였다. 목형 잎 추출물의 자유라디칼 (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH) 소거활성 ($FSC_{50}$)은 에틸아세테이트 분획에서 $14.51{\mu}g/ml$, 아글리콘 분획에서 $13.96{\mu}g/ml$로 측정되었다. Luminol-의존성 화학발광법을 이용한 $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ 계에서 생성된 활성산소종 (reactive oxygen species, ROS)에 대한 목형 잎 추출물의 총항산화능은 아글리콘 분획에서 $0.22{\mu}g/ml$로, 아글리콘 분획에서 가장 큰 활성을 나타내었다. 목형 잎 추출물에 대하여 rose-bengal로 증감된 $^1O_2$에 의한 적혈구 파괴에 대한 세포보호 효과는 모든 분획에서 농도 의존적($1{\sim}50{\mu}g/ml$)으로 증가하였으며, 특히 아글리콘 분획에서 지용성 항산화제인 (+)-${\alpha}$-tocopherol 보다 우수한 세포보호 활성이 있는 것으로 나타났다. Mushroom tyrosinase의 활성 저해 효과($IC_{50}$)를 측정한 결과 에틸아세테이트 분획($IC_{50}$ = $48.58{\mu}g/ml$)에서 우수한 효과를 나타났고, ${\alpha}$-MSH로 유도된 세포 내 멜라닌 합성 저해 활성을 측정한 결과 에틸아세테이트 분획물의 $50{\mu}g/ml$ 농도에서 41.80% 저해활성을 나타내었다. TLC, HPLC 및 LC/ESIMS를 이용한 성분분석 결과 에틸아세테이트 분획 중에 luteolin, isoorientin이 존재함을 확인하였다. 이상의 결과들로부터 목형 잎 추출물은 활성산소종을 소거하는 항산화제로 이용가능하며, 특히 mushroom tyrosinase 저해효과와 ${\alpha}$-MSH로 유도된 멜라닌 생합성 저해 효과로부터 에틸아세테이트 분획 중 luteolin 및 isoorientin을 새로운 미백 화장품의 원료로써 이용가능성을 알 수 있었다.
본 연구에서는 황칠나무 잎 추출물의 HaCaT 세포에서의 항산화 활성과 B16F1 melanoma 세포에서의 미백활성을 측정하였다. HaCaT 세포를 이용한 실험에서, 황칠나무 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획과 아글리콘 분획은 각각 50 및 $25{\mu}g/ml$의 농도 이하에서 독성을 나타내지 않았다. UVB $800mJ/cm^2$를 HaCaT 세포에 조사하였을 때, 황칠나무 잎 추출물은 농도 의존적으로 자외선으로부터 세포를 보호하였다. 10 mM의 $H_2O_2$ 및 $4{\mu}M$의 rose bengal을 HaCaT 세포에 처리하였을 때, 에틸아세테이트 분획($6.25{\sim}50{\mu}g/ml$) 및 아글리콘 분획($6.25{\sim}25{\mu}g/ml$)은 우수한 세포 보호 효과를 나타내었다. 황칠나무 잎 추출물의 B16F1 melanoma 세포에서의 미백활성을 측정한 결과, 미백제로 알려진 알부틴 보다 더 우수한 멜라닌 합성 저해 활성을 보였다. 이상의 결과들은 황칠나무 잎 추출물이 ROS에 대항하여 세포를 보호함으로써 생체계, 특히 태양 자외선에 노출된 피부에서 세포보호제 및 천연항산화제로서 작용할 수 있음을 가르키며, ${\alpha}$-MSH로 유도된 멜라닌 생합성 저해 효과로부터 황칠나무 잎 추출물이 새로운 미백 화장품의 원료로써 이용 가능함을 알 수 있다.
To examine the potential of Terminalia chebula as a whitening agent, we measured antioxidant activity using DPPH$\cdot$, ABTS${\cdot}^+$ assays and ferric-reducing antioxidant power (FRAP) assays, and depigmenting activity using B16F10 melanoma cells. The intracellular reactive oxygen species (ROS) level was monitored by $H_2DCFDA$ fluorescence labeling, and melanin contents in B16F10 melanoma cells by 960 $J/m^2$ dose of UVA-induced oxidative stress. The radical-scavenging activities of T. chebula extract (TCE) were measured in terms of $EC_{50}$ values using DPPH$\cdot$, ABTS${\cdot}^+$ assays and FRAP value were 280.0 ${\mu}g/mL$, 42.2 ${\mu}g/mL$ and 113.1 ${\mu}mol$$FeSO_4{\cdot}7H_2O/g$, respectively. We found that ROS and melanin concentrations were reduced by TCE treatments of 25 ${\mu}g/mL$ under UVA-induced oxidative stress. Tyrosinase activity and melanin contents in $\alpha$-melanocyte stimulating hormone (MSH)-induced melanoma cells both decreased dose-dependently in the treatment groups. TCE similarly reduced melanogenesis in B16F10 melanoma cells stimulated by $\alpha$-MSH as compared to arbutin as a positive control. T. chebula may prove to be a useful therapeutic agent for hyperpigmentation and an effective component in skin whitening and.or lightening cosmetics.
Biorenovation은 미생물의 효소 작용을 통해 기존의 화합물을 새로운 화합물로 전환시키는 방법이다. 본 연구에서는 biorenovation을 Luteolin에 적용하여 Luteolin-7-O-glucoside (L7G)를 합성하였으며 L7G의 미백 기능성을 평가하고자 α-MSH로 유도된 B16F10 mouse melanoma 세포에서 실험을 진행하였다. L7G는 Luteolin의 높은 세포독성을 개선하였으며 세포 독성이 나타나지 않는 농도에서 melanin 합성 및 tyrosinase 생성을 유의하게 억제하였다. 또한 western blot을 통해 멜라닌의 합성 인자들의 발현을 조사한 결과 tyrosinase와 MITF의 발현이 효과적으로 억제되는 것을 확인하였다. 결론적으로 우리는 L7G가 멜라닌의 합성을 억제함으로써 피부 미백에 긍정적인 영향을 나타낼 수 있음을 확인하였으며 이러한 결과를 근거로 L7G가 미백 기능성 원료로써 활용 가능함을 제안한다.
Four diarylheptanoids, (5R)-1,7-bis (3,4-dihydroxyphenyl)-heptane-5-O-$\beta$-D-glucoside (1), (5R)-1,7-bis (3,4-dihydroxyphenyl)-heptane-5-ol (2), oregonin (3), hirsutanonol (4), were isolated from the bark of Alnus hirsuta Turcz and its inhibitory effects on melanogenesis by measuring the melanin level and tyrosinase activity in B16 melanoma cell were examined. Melanin level and tyrosinase activity were reduced to 75 to 85% by addition of diarylheptanoids to incubation medium of the melanoma cell. On the other hand, melanin level and tyrosinase activity were reduced to 13 to 43% by the addition of diarylheptanoids to incubation medium of the melanoma cell treated with melanogenesis stimulator, $\alpha$-MSH and forskolin. These melanogenesis inhibitory effects were significantly different compared with control.
멜라닌은 생체 내에서 발모 및 피부색을 결정하는데 중요한 역할을 하는 고분자 물질이다. 하지만 활성산소에 의해 과도하게 생성된 멜라닌은 노화와 관련된 기미, 주근깨와 과색소 침착증 등을 야기한다고 알려져 있다. 이와 관련된 천연물 중 서목태 성분의 하나인 polyphosphate는 자외선에 의해 손상되는 피부 노화를 억제한다고 보고되고 있다. 본 연구의 목적은 멜라닌 합성에 대한 RNEE의 직접적인 효과를 조사한 것이다. 본 연구에서 RNEE는 DPPH radical의 소거효과 및 환원력과 같은 항산화 효과는 없는 것으로 나타났다. MTT 실험을 수행한 결과, RNEE는 농도 의존적으로 세포독성을 증가시켰다. 또한, RNEE는 tyrosinase 활성과 DOPA-oxidation 실험 결과에서 멜라닌 합성을 증가시켰다. RNEE는 살아있는 세포에서 L-DOPA에 의한 유발되는 melanin생성 촉진 효과는 없는 것으로 나타났으나, 과산화수소를 처리하여 melanin 생성을 감소시킨 대조군과 비교시 과산화수소 전처리 후 RNEE를 처리한 군에서는 melanin 생성 촉진 효과가 있는 것으로 나타났다. 뿐만 아니라 RNEE는 tyrosinase related protein-2 (TRP-2)의 발현을 증가시키는 것으로 나타났으며, tyrosinase related protein-1 (TRP-1)의 단백질발현도 대조군과 비교시 $16{\mu}g/ml$의 농도에서 증가되는 것으로 나타났다. 특히 superoxide anion을 과산화수소로 변환시키는 SOD-3의 발현을 조사한 결과 $16{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서 대조군과 양성 대조군인 ${\alpha}$-MSH보다 단백질 발현이 증가하는 것으로 나타났다. 그러므로, 이상의 결과는 서목태가 흑모와 관련 있는 멜라닌 생성을 촉진하는 기능적인 잠재성을 가지고 있다는 것을 암시한다.
본 연구는 커피의 향미개선에 효과가 있다고 알려진 침지 발아를 로부스타 커피에 적용하여 그 유용성을 검증하였다. 베트남 로부스타 커피 생두를 정제수와 함초 추출물에 침지 발아시켜 정수발아(WGC)와 함초발아(SGC) 원두를 제조하고 에스프레소 커피로 추출한 다음 그 기능성을 평가하였다. 400 ㎍/mL 농도에서 Folin-Ciocalteu법으로 분석한 총 폴리페놀 함량은 WGC (20.17%)>NGC (19.45%)>SGC (16.71%) 순으로 WGC의 총 폴리페놀 함량이 가장 높았다. 비발아 커피 뿐만 아니라 발아커피는 25~100 ug/ml 모든 농도에서 DPPH 제거능으로 평가된 실험에서 우수한 항산화 활성을 나타내었다. XOD 저해 효과 또한 400 ㎍/mL 농도에서 WGC 42%, NGC 39%, SGC 32%로 관찰되었다. 비발아 및 발아커피는 멜라닌 생합성의 주요 단계에 관여하는 효소인 tyrosinase 활성을 억제하였으며, α-MSH로 유도된 B16F10 세포에서 멜라닌 생성을 억제하였다. 이 결과는 대조약물 arbutin과 유사한 결과를 나타내었으며, NGC, SGC, WGC는 모두 미백효능이 있는 것으로 확인되었다. Oil red O 염색을 통해 NGC, SGC, WGC의 지방분화 억제효과를 측정한 결과 분화된 대조군 보다 로부스타 커피를 처리한 시료들의 지방구 양이 유의적으로 감소된 것을 확인할 수 있었다. 이상의 연구결과 로부스타 커피의 향미를 개선하기 위해 물 또는 함초 추출물을 사용하여 침지 발아된 커피는 항산화, 미백, 항비만 등 다양한 기능성을 나타내는 것을 시사한다.
The anti-inflammatory effects of 4'-O-methylalpinumisoflavone (OMAI) has been reported in recent years. To develop effective and safe skin whitening agents, we investigated the anti-oxidative and melanogenic effects of OMAI isolated from fruit of Maclura tricuspidata Carrière (Cudrania tricuspidata) in macrophage and melanoma cell lines. In our results, OMAI showed effective superoxide scavenging activity and suppressed production of lipopolysaccharide (LPS)-induced intracellular reactive oxygen species (ROS) in RAW264.7 cells. In addition, α-melanocyte stimulation hormone (MSH)-induced production of melanin was also reduced by OMAI in B16F10 cells. Finally, OMAI significantly inhibited tyrosinase activity in B16F10 cells. These results suggest that OMAI suppressed melanin production via scavenging reactive oxygen species and inhibition of tyrosinase activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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