To save the labour reguired for separation of copulated moth during egg Production, some of the chemicals available at the market were on screen test for easy separation of copulated moth of silkworm. The obtained results are summarized as following. 1. In a separation ratio of copulated moth along with a treating time, TCTFE(Trichloro-trifluoroethane) completely separated the copulated moth in 10 minutes. The combinations of TCTFE plus Acetone (87.5 : 12.5 V/V) and TCTFE plus Acetic acid (50 : 50 V/V) take 25minutes for the complete separation of copulated moth. Use of Acetic acid solution only makes 100% separation of copulated moth in one hour and foully minutes and non$.$treatment shows only 47.5% of separation in three and half hours. On the other hand. There is no statistical significance between TCTFE Plus Acetone and control in the egg productivity. 2. The combination of TCTFE Plus Acetone (87.5 : 12.5 V/V) does not infuluence the egg productivity of the moth, showing 443 grains for an average number of egg per moth out of which 417 grains are for the number of fertilized eggs while control shows 452 grains for an avarage number of egg/moth and 428 grains for the number of fertilized eggs. However a sing1e use of TCTFE and Acetic acid shows less egg productivity and number of ferilized eggs per moth, respectively as compared to those of the control. In particular, a single use of acetic acid makes an increase of number of non-egg prodncible moth and it seems to be brought due to a chemical damage. 3. In a rearing test of the egg laid by the chemical treated moth, there are no differences among the treatments in all of the useful characters of the larvae; larval duration, survival rate, cocoon yield, single cocoon weight, single cocoon shell weight and cocoon shell ratio. In these regards, it is recognized that TCTFE can be practically used for the separation of copulated moth and the combination of TCTFE and Acetone promote its efiectiveness on the separation of copulated moth.
The aim of this in vitro study was to test the effect of microinjection (Mi) of foreign gene into the rabbit egg pronucleus and epidermal growth factor (EGF) addition on the blastocyst rate, the cell number and the diameter of embryos, and to determine possible relationships between embryo cell number and embryo diameter. Blastocyst rate was significantly decreased in gene- Mi (G-Mi/E0) group (63.1%) comparing to intact ones (83.5%, $p_1$<0.05). The addition of EGF at 20ng/ml (G-Mi/E20) or 200 ng/ml (GMi/ E200) to gene-Mi embryos did not affect blastocyst rate (65.6 and 55.2% resp.). As a control for Mi, the eggs were microinjected with the same volume of phosphate-buffered solution (PBS-Mi) instead of the gene construct solution. Cell numbers and embryo diameters were measured from embryo images obtained on confocal laser scanning microscope. Bonferroni-modified LSD test showed that the embryo cell number in PBS-Mi group was significantly lower ($p_1$<0.05) and in gene-Mi group was tended to decrease compared with intact embryos. Embryo diameter was not different among experimental groups. No effect of EGF given at any doses both on the cell number and embryo diameter was found. A positive correlation between cell number and embryo diameter was observed in all groups of embryos. Since embryo diameter was not changed under the influence of Mi or EGF addition in this study, this seems to be more conservative characteristics of the embryo morphology. These results suggest that the pronuclear microinjection compromises developmental potential of embryos, decreasing blastocyst rate and embryo cell number, whilst embryo diameter is not affected. No effects of EGF on studied parameters were confirmed. Declined quality of Mi-derived embryos is caused by the microinjection procedure itself, rather than by the gene construct used.
KIM Dong Soo;MOON Young Bong;JEONG Chang Hwa;KIM Bong-Seok;LEE Young-Don
Journal of Aquaculture
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v.7
no.3
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pp.159-164
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1994
All-female diploid Paralichtlrys olivaceus populations were produced by the artificial fertilization with the normal eggs and gynogenetic diploid males sperms. All-female triploids were also conducted to the fertilized eggs by cold shock. Floating, fertilization and hatching rates of the all-female diploid eggs were not significantly different from that of the diploid control eggs (P>0.05). All-female triploids were also not significantly different from their diploid controls or all-female diploid groups (P>0.05) in the floating and fertilization rates of eggs. However, hatching rates of all-female triploid groups were lower than that of the control (P<0.05). Induction of the triploids were confirmed by the measurement of erythrocyte sizes and by the chromosome counts. The volumes of erythrocytes and nucleus of triploid were larger than those of diploids, respectively. Percent incidences of triploid were $92.6\%$ in this experiment. The chromosome number of diploids and triploids showed 2n=48 and 3n=72, respectively, and their karyotypes were consisted of all acrocentric chromosomes. The gonads of 4-month-old triploids were histologically sterile.
Triploid abalone, Haliotis discus hannai, was induced by the cold $(0^{\circ}C\;and\;3^{\circ}C)$ or the heat $(35^{\circ}C\;and\;40^{\circ}C)$ shock procedure with fertilized eggs, 12 min. or 32 min. post fertilization with the various time intervals of shock duration. Fertilization rate of each experimental group was not significantly different from that of corresponding diploid control (P>0.05). However hatching rates and normality rates of triploid larvae were significantly different from those of corresponding diploid control (P <0.05). In heat shock groups at $40^{\circ}C$, fertilization rate of eggs was extremely low $(0\~2.7\%)$ and hatched larvae were not detected in these treatment groups. Incidence of triploidy was confirmed by chromosome count and the highest rates of triploid $(84.0\%)$ revealed in cold $(3^{\circ}C)$ shock with 15 min. treatment duration 12 min. after fertilization. The number of diploid chromosome was 2n: 36, and that of tiploid was 3n=54.
The spawning host selection and adaptive characteristics in life history were investigated for Sarcocheilichthys nigripinnis morii which has similar habit of spawning with acheilognathine fishes. The fertilized eggs of the species were found in the mantle cavity of Corbicula papyracea and C. fluminea among the bivalves collected from same locality, meaning the species specific host selection for the spawning. We considered that the differences in the status of expanding egg membrane after hydration, fewer number of eggs settled into the mantle cavity and having eleutheroembryo with developed organ would be some evidences of specific reproductive strategy for this species. But the status of developed surface blood circulation was thought to be a compensation for the parasitism. The pigmentation of melanopore delayed to late embryo and the spot on the caudal region was a characteristics of this species appeared in the early life history.
This study investigated the early life history of Hemibarbus labeo from in Wicheon, stream Nakdonggang-River, and compared their characteristics with closely related species. In April 2021, egg formation and development of autonomous fish were observed in fertilized eggs collected at four spawning sites. The size of the fertilized egg was 1.93~2.39 (average 2.22±0.15, n=30) mm. The water temperature was 22.2~24.1°C, and the hatching time took 109~115 hours. Newly after hatching, the total length of the yolk-sac larvae was 7.50~8.80 (average 7.99±0.46) mm, and the mouth and anus did not develop and had difficulty in being yolk. 6 days after hatching, the preflexion larvae were fed with a total length of 9.49~10.2 (9.78±0.23, n=30) mm. 10 days after hatching, the flexion larvae was 9.97~11.9 (10.7±0.72, n=30) mm in total length, and the tail of the vertebrae began to bend. 20 days after hatching, the postflexion larvae was 12.6~15.2 (13.9±0.77, n=30) mm in total length, and the tailbone was completely bent to 45°. 29 days after hatching, the total length of the juvenile was 16.9~19.8 (18.1±0.91, n=30) mm, and the number of fins reached an integer with 10 dorsal fins, 9 anal fins, and 7 ventral fins. The distribution of melanophore, such as the head, the center of the body, and the upper part of the fin, was different from that of the allied species during the postflexion larvae period, so the morphological characteristics could be distinguished.
The fertilized eggs of Rana dybowskii were irradiated with UV (254 nm wave length) on the vegetal hemisphere to investigate the effects on the primordial germ cells (PGCs) and axis formation. The investigations were carried out in two ways; namely time course and UV dose. Up to 1,600 $ergs/mm^2$ of UV dose, irradiated at 60 min. after fertilization, there was no effect on the PGC number. However, the number of PGC comparing with that of unirradiated control was decreased more than 40%. As the amount of irradiation was increased, the number of PGC was inversely declined. The maximal dose of irradiation which eliminates PGC completely without inducing any axis abnormality was 4,800 $ergs/mm^2$. If the eggs were irradiated earlier with this amount the severer effect could be obtained. Thus the UV effect on the PGC number was most effective when irradiated by 60 min. post fertilization. Thereasfter stage. At UV doses over 9,600 $erge/mm^2$ other effects start to appear; namely abnormalities of nerual tube and axis formation. Therefore, comparative study on the UV sensitivity of PGC and axis formation was carried out. It was revealed that UV effect on the axis was drastically decreased at the time of $0.7\\sim0.8$ between fertilization and 1st cleavage, while the germ plasm was sensitive to UV until 4 cell stage.
Genetic change from broodstock to hatchery stock of the olive flounder Paralichthys olivaceus and effective number of breeders (Ne) were investigated by the different fertilized-egg collecting methods; E1 (eggs collected one day after spawning) and E2 (eggs collected two days after spawning) using seven microsatellite loci (Kop2, Kop22, Kop18, Kop3, Kop21, Kop9 and Kop26) for the better understanding of stock enhancement. Observed heterozygosity in three stocks ranged from 0.651 at Kop3 to 0.928 at Kop22, with offspring being slightly higher heterozygous over their parents. However, the genetic reduction of offspring was significant. The offspring allele number per locus was reduced to 23.5% for E1 and 17.6% for E2 of their maternal number. Ne to the hatchery stock was estimated to be 21.9 for E1 and 34.3 for E2. The inbreeding coefficients of populations El and E2 were 0.023 and 0.015, respectively. The present study suggests the extension of the egg collection period for a recovery of the genetic diversity in artificially produced offspring.
The effects of temperature, photon irradiance, and photoperiod on the growth of Sargassum horneri embryos were examined for female plants collected at Chokpo in Tongyeoung, Gyeongnam Prefecture, Korea on 27 December 2011. Mature plant receptacles were detached, and fertilized eggs were cultured in the laboratory at temperatures of $5-25^{\circ}C$ with photon irradiances of $10-80{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ under 14L:10D and 10L:14D photoperiods. Germination and embryo growth were rapid at $20-25^{\circ}C$ and $40{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ under 14L:10D. The number of rhizoids in the germinated young thalli was high at high photon irradiances ($40-80{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$) and $15-20^{\circ}C$. At $20^{\circ}C$ and 14L:10D, vigorous growth of main and lateral branches was observed; however, at $5^{\circ}C$ under both photoperiods, plant growth decreased markedly. In the present study, S. horneri grew well at high temperatures ($20-25^{\circ}C$) and high photon irradiances ($40-80{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$) with a 14L:10D photoperiod.
The successful gene transfer and transient expression was demonstrated in olive flounder embryos using lipofected sperm. Olive flounder sperm interacted with foregn plasmid DNA encapsidated by positively charged liposome. The maximum plasmid copy number that associated with the sperm was 5 copies/sperm based on the examination of DNA blot assay. The foreign DNA was transferred into fertilized eggs without any adverse effect on fertilization and survival of embryos (P>0.05) and retained in embryos until at least 42 hours with successful expression. The maximal expression was detected in 18 hours after fertilization at 18$^{\cird}C$ and gradually decreased with development of embryo. Most of DNA transferred into embryos persisted extrachromosomally without significant sign of integration or replication.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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