Plasmids were isolated from 15 tetracycline (Tc) resistant S. aureus. Two small tetracycline resistance plasmids, pKH16 and pKH17, have been isolated from Staphylococcus aureus JY10 and Staphylococcus aureus JY22, respectively and the complete nucleotide sequences of those plasmids have been determined. pKH16 consisted of 4,442 bp and showed high identity to pKH6 (99% matching percentage) isolated in 1989 from S. aureus SA2. pKH17 consisted of 4,441 bp and showed less identity to pKH6 (95% matching percentage) than pKH16. PCR analysis showed that tetK and tetM did not exist in ten large plasmids isolated from ten Tc resistant S. aureus. Twelve Tc resistant S. aureus showed reistance both to Tc and Mn and we might analogize that twelve Tc resistant S. aureus had tetM in their chromosome.
To identify low temperature-induced genes of wheat chromosome substitution line 5D, suppression subtractive hybridization (SSH) was performed with mRNAs from leaf samples that treated with low temperature ($4^{\circ}C$). A cDNA library was constructed using mRNA isolated from wheat chromosome substitution line 5D leaves treated with low temperature ($4^{\circ}C$). The nucleotide and deduced amino acid sequences of the putative gene products were compared. wfr-9 and wfr-32 showed identity over 90% related to vernalization gene. Other two genes, wfr-77 and wfr-83 which is related to freezing-resistant gene have also identity over 90%. This result suggest that those genes may be transcribed into antifreeze proteins which are accumulated within leaf apoplasts, when wheat chromosome substitution line 5D is acclimated during low temperature treatment.
Noroviruses are a major cause of gastroenteritis in humans and animals worldwide. In 2021, canine norovirus (CNoV) infection was detected at an animal clinic in Gwangju area, South Korea. A semi-nested polymerase chain reaction was developed to amplify a 478 bp fragment of the RdRp gene of CNoV. The phylogenetic analysis of this fragment confirmed the strain to be genogroup IV.2 (Dog/GIV.2/gw/s377/2021/KOR), which exhibited the highest similarity to the feline NoV strain GIV.2/CU081210E/USA/2010 (accession no. NC_045762) with 95.1% nucleotide (nt) identity and 98.7% amino acid (aa) identity. These research findings indicate that the detected norovirus in dogs is genetically similar to a feline-origin norovirus, suggesting easy cross-species transmission among animals.
For unknown reasons, a few trees in a private chestnut orchard in Icheon si, Gyunggi-do suffered leaf chlorosis and growth decline. Based on symptoms, phytoplasma was a probable cause. Leaf samples were collected from two symptomatic and non-symptomatic trees in the orchard for phytoplasma detection. An amplicon of about 1.2 bp size was obtained from both symptomatic trees by PCR with the universal 16S rDNA primers. Sequences of these amplicons were found to have 99% nucleotide sequence identity to the corresponding genomic region of 16SrIII (X-disease group). More than 100 phytoplasma isolates, such as Candidatus phytoplasma pruni, Milkweed yellows phytoplasma, Goldenrod yellows phytoplasma, Tsuwabuki witches'-broom phytoplasma, Candidatus Phytoplasma trifolii, etc. were involved in the list. Phylogenetic analysis revealed that the sequence obtained in this study closely clustered with Candidatus phytoplasma groups. While one of the amplicons shared 91% identity with the Candidatus phytoplasma castaneae, the other shared only 47%. It needs further analysis and investigation to determine the exact taxonomy. Meanwhile, based on the analysis of the sequences, chlorosis, and small leaves were associated with phytoplasma.
We report here a human case of Taenia asiatica infection which was confirmed by genetic analyses in Dali, China. A patient was found to have symptoms of taeniasis with discharge of tapeworm proglottids. By sequencing of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (cox1) gene, we observed nucleotide sequence identity of 99% with T. asiatica and 96% with T. saginata. Using the cytochrome b (cytb) gene, 99% identity with T. asiatica and 96% identity with T. saginata were found. Our findings suggest that taeniasis of people in Dali, China may be mainly caused by T. asiatica.
The pWHM220 cosmid with a 24-kb insert cloned from Streptomyces albus ATCC 21838 induces the biosynthesis of a polysther antibiotic similar to salinomycin in Streptomyces invidans. We have analyzed this region by DNA sequencing as well as Southern blot hybridization with type I and type II polyketide synthase (PKS) probes. Surprisingly, we found another set of type II SKS genes only 10-kb from the original PKS genes, salABCDE. The DNA sequence revealed two complete open reading frames (ORFs) named salB2 and salC2, and one partial ORF that does not resemble any known DNA or deduced protein sequence. The salC2 should code for chain length determining factor while the deduced amino acid sequence encoded by salB2 exhibits high similarity to .betha.-ketoacyl synthase from different PKS gene clusters. The highest identity was found for .betha.-keetoacyl synthases from S. argillaceus (MtmP. 59.1% identity), the mithramycin producer and from S. venezuelae ISP5230 (JadA, 52.3% identity), the jadomycin producer. The SalC2 protein clearly resembles its counterparts in order aromatic PKS gene clusters that are believed to influence the length of the polyketide chain. The highest identities observed were to that of S. argillaceus (MtmK, 62.3%) and S. venezuelae ISP 5230 (JadB, 55.1%) proteins, Moreover, the deduced amino acid sequences of the salB2 and salC2 products were 29.0% identical.
Cytoplasmic male sterility (CMS), one of the most important traits in crop breeding, has been used for commercial seed production by $F_1$ hybrid cultivars of pepper (Capsicum annuum L.). To develop reliable molecular markers for allelic selection of the Restorer-of-fertility (Rf) gene, which is known to be a major determinant of pollen fertility restoration in peppers, a sequence of approximately 10 kb flanking an RAPD fragment closely linked to the Rf locus was obtained by genome walking. A homology search revealed that this sequence contained an LTR retrotransposon and a non-LTR LINE-like retrotransposon. Sequencing of this Rf-linked region to search for polymorphisms between a dominant and recessive allele revealed 98% nucleotide sequence identity between them. A third polymorphic haplotype of the Rf-linked sequence, which has 94-96% nucleotide sequence identity with the two previously isolated haplotypes, was identified among a large number of breeding lines. Utilizing polymorphic sequences in the haplotypes, PCR markers were developed for selection of particular haplotypes and used to examine the distribution of the haplotypes in diverse breeding lines, cultivars, and C. annuum germplasms. Surprisingly, the third haplotype was the predominant type in C. annuum germplasms, while its frequency in $F_1$ hybrid cultivars was relatively low. Meanwhile, analysis of breeding lines whose Rf allele genotypes and male-sterility phenotypes were already known revealed that the third haplotype was mainly present in exotic breeding lines that cause unstable male-sterility when combined with sterile cytoplasms.
Park, Dong-Woo;Lee, Jun-Hun;Lee, Dong-Hun;Lee, Kyoung;Kim, Chi-Kyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.5
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pp.700-705
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2003
Pseudomonas sp. S-47 is capable of degrading benzoate and 4-chlorobenzoate as well as catechol and 4-chlorocatechol via the meta-cleavage pathway. The three enzymes of 2-oxopenta-4-enoate hydratase (OEH), acetaldehyde dehydrogenase (acylating) (ADA), and 2-oxo-4-hydroxypentonate aldolase (HOA) encoded by xylJQK genes are responsible for the three steps after the meta-cleavage of catechol. The nucleotide sequence of the xylJQK genes located in the chromosomal DNA was cloned and analyzed. GC content of xylJ, xylQ, and xylK was 65% and consisted of 786, 924, and 1,041 nucleotides, respectively. The deduced amino acid sequences of xylJ, xylQ, and xylK genes from Pseudomonas sp. S-47 showed 93%, 99%, and 99% identity, compared with those of nahT, nahH, and nahI in Pseudomonas stutzeri An10. However, there were only about 53% to 85% identity with xylJQK of Pseudomonas putida mt-2, dmpEFG of P. putida CF600, aphEFG of Comamonas testosteroni TA441, and ipbEGF of P. putida RE204. On the other hand, the xylLTEGF genes located upstream of xylJQK in the strain S-47 showed high homology with those of TOL plasmid from Pseudomonas putida mt-2. These findings suggested that the xylLTEGFIJQK of Pseudomonas sp. S-47 responsible for complete degradation of benzoate and then catechol via the meta-pathway were phylogenetically recombinated from the genes of Pseudomonas putida mt-2 and Pseudomonas stutzeri An10.
Aqualysin I is an alkaline serine protease which is secretet into the culture medium by Thermus aquaticus YT-1, an extreme thermophile. Aqualysin I was purified, and its partial amino acid sequence was determined. The gene encoding aqualysin I was cloned into E. coli using synthetic oligodeoxyribonucleotides as hybridization probes. The nucleotide sequence of the cloned DNA was determined. The primary structure of aqualysin I, deduced from the nucleotide sequenc, agreed with the determid amino acid sequences, including the $NH_2-$ and COOH terminal sequence of the tryptides derived from aqualysin I. Aqualysin I comprised 281 amino acid residues and its molecular mass was determined to be 28350. On alignment of the whole amino acid sequence, aqualysin I showed high sequence homology with the subtilisin type serine protease, and 43% identity with proteinase K, 37-30% with subtilisins and 34% with thermitase. Extremely high sequence identity was observed in the regions containing the active-site residues, corresponding to Asp32, His64 and Ser221 of subtilisin BPN'. Aqualysin I contains two disulfide bonds, Cys67-Cys99 and Cys163-Cys194, and these disulfide bonds seem to contribute to the heat stability of the enzyme. The determined positions of the twe disulfide bonds of aqualysin I agreed with those predicted previously on the basis of computer graphics of the crystallographic data for subtilisin BPN'. Therefore, these findings sugests that the three-dimensional structure of aqualysin I is similar to that of subtilisin BPN' Aqualysin I is produced as a lage precursor, which contains $NH_2-$ and COOH- terminal portions besides the mature protease sequence.
A rod-shaped virus was isolated from pepper showing mild mosic during the winter growing seasons of 2001 and 2002 in Korea. Based on its biological reactions, serological relationships, reverse transcription-poly-merase chain reaction (RT-PCR) using specific primers, and nucleotide sequence analysis of coat protein (CP) gene, the isolated virus was identified as Tobacco mild green mosaic virus (TMGMV) and designated as Korean pepper isolate (TMGMV-KP). Crude sap from infected tissue was mechanically transmitted to various indicator plants, which produced characteristic symptoms of tobamovirus infection. However, no symptom was observed in Gomphorena globosa. In RT-PCR assays with specific primers toy respective detection of TMGMV, Tobacco mosaic virus (TMV), Pepper mild mottle virue (PMMoV), and Tomato mosaic virus (ToMV), a single strong band of about 500 bp in length was produced from the sample used only with TMGMV primers. The amplified DNA was cloned and the nucleotide sequence was determined. Sequence comparisons with the CP gene of other tobamoviruses indicated that TMGMV-KP shared 99.3% identity with TMGMV Japanese isolate and only 59.1, 58.6, and 58.1% identity with TMV, PMMoV and ToMV, respectively. This is the first report of TMGMV in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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