The in vitro antibody discovery technologies revolutionized the generation of target-specific antibodies that traditionally relied on the humoral response of immunized animals. An antibody library, a large collection of diverse, pre-constructed antibodies, can be rapidly screened using in vitro display technologies such as phage display. One of the keys to successful in vitro antibody discovery is the quality of the library diversity. Antibody diversity can be obtained either from natural B-cell sources or by the synthetic methods that combinatorially generate random nucleotide sequences. While the functionality of a natural antibody library depends largely upon the library size, various other factors can affect the quality of a synthetic antibody library, making the design and construction of synthetic antibody libraries complicated and challenging. In this review, we present various library designs and diversification methods for synthetic antibody library. From simple degenerate oligonucleotide synthesis to trinucleotide synthesis to physicochemically optimized library design, the synthetic approach is evolving beyond the simple emulation of natural antibodies, into a highly sophisticated method that is capable of producing high quality antibodies suitable for therapeutic, diagnostic, and other demanding applications. [BMB Reports 2015; 48(9): 489-494]
$Kalopanax$$pictus$ is a long-lived deciduous perennial tree in the family Araliaceae mainly distributed in the East Asia. In Korea, this species is of ecological and medical importance. Because typical populations of this species are small and distributed in patches, $K.$$pictus$ has been considered as a narrow habitat species. To understand the genetic diversity and population structure of this species, the sequence variation of the nuclear ribosomal DNA (nrDNA) internal transcribed spacer (ITS) region was analyzed among 18 different $K.$$pictus$ populations in the present investigation. The nrDNA ITS sequences of Korean populations investigated in this study showed identical of 616 bp in length, and no any nucleotide variation was found in the entire nrDNA ITS region sequence. This result suggested that the $K.$$pictus$ populations in Korea might belong to the same isolate, and no mutation was found in the nrDNA ITS region. Compared with other known ITS sequence sources from $K.$$pictus$ populations, only four variable nucleotide sites were found within the entire ITS region. Very narrow genetic diversity appearing in the population level of $K.$$pictus$ makes us hypothesize that their relatively isolated habitats. The long-lived traits might be one main reason. However, another probability was that the nr-DNA ITS region might be noneffective in classifying populations of $K.$$pictus$. Thus, to further understand the phylogenetic relationship of $K.$$pictus$ populations, more samplings should be performed based on more DNA sequences.
Alam, M. Zahangir;Lee, Yun-Mi;Son, Hyo-Jung;Hanna, Lauren H.;Riley, David G.;Mannen, Hideyuki;Sasazaki, Shinji;Park, Se Pill;Kim, Jong-Joo
Animal Bioscience
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v.34
no.5
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pp.789-800
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2021
Objective: Conservation and genetic improvement of cattle breeds require information about genetic diversity and population structure of the cattle. In this study, we investigated the genetic diversity and population structure of the three cattle breeds in the Korean peninsula. Methods: Jeju Black, Hanwoo, Holstein cattle in Korea, together with six foreign breeds were examined. Genetic diversity within the cattle breeds was analyzed with minor allele frequency (MAF), observed and expected heterozygosity (HO and HE), inbreeding coefficient (FIS) and past effective population size. Molecular variance and population structure between the nine breeds were analyzed using a model-based clustering method. Genetic distances between breeds were evaluated with Nei's genetic distance and Weir and Cockerham's FST. Results: Our results revealed that Jeju Black cattle had lowest level of heterozygosity (HE = 0.21) among the studied taurine breeds, and an average MAF of 0.16. The level of inbreeding was -0.076 for Jeju Black, while -0.018 to -0.118 for the other breeds. Principle component analysis and neighbor-joining tree showed a clear separation of Jeju Black cattle from other local (Hanwoo and Japanese cattle) and taurine/indicine cattle breeds in evolutionary process, and a distinct pattern of admixture of Jeju Black cattle having no clustering with other studied populations. The FST value between Jeju Black cattle and Hanwoo was 0.106, which was lowest across the pair of breeds ranging from 0.161 to 0.274, indicating some degree of genetic closeness of Jeju Black cattle with Hanwoo. The past effective population size of Jeju Black cattle was very small, i.e. 38 in 13 generation ago, whereas 209 for Hanwoo. Conclusion: This study indicates genetic uniqueness of Jeju Black cattle. However, a small effective population size of Jeju Black cattle indicates the requirement for an implementation of a sustainable breeding policy to increase the population for genetic improvement and future conservation.
Objective: Yunnan is not only a frontier zone that connects China with South and Southeast Asia, but also represents an admixture zone between taurine (Bos taurus) and zebu (Bos indicus) cattle. The purpose of this study is to understand the level of genomic diversity and the extent of admixture in each Yunnan native cattle breed. Methods: All 120 individuals were genotyped using Illumina BovineHD BeadChip (777,962 single nucleotide polymorphisms [SNPs]). Quality control and genomic diversity indexes were calculated using PLINK software. The principal component analysis (PCA) was assessed using SMARTPCA program implemented in EIGENSOFT software. The ADMIXTURE software was used to reveal admixture patterns among breeds. Results: A total of 604,630 SNPs was obtained after quality control procedures. Among six breeds, the highest level of mean heterozygosity was found in Zhaotong cattle from Northeastern Yunnan, whereas the lowest level of heterozygosity was detected in Dehong humped cattle from Western Yunnan. The PCA based on a pruned dataset of 233,788 SNPs clearly separated Dehong humped cattle (supposed to be a pure zebu breed) from other five breeds. The admixture analysis further revealed two clusters (K = 2 with the lowest cross validation error), corresponding to taurine and zebu cattle lineages. All six breeds except for Dehong humped cattle showed different degrees of admixture between taurine and zebu cattle. As expected, Dehong humped cattle showed no signature of taurine cattle influence. Conclusion: Overall, considerable genomic diversity was found in six Yunnan native cattle breeds except for Dehong humped cattle from Western Yunnan. Dehong humped cattle is a pure zebu breed, while other five breeds had admixed origins with different extents of admixture between taurine and zebu cattle. Such admixture by crossbreeding between zebu and taurine cattle facilitated the spread of zebu cattle from tropical and subtropical regions to other highland regions in Yunnan.
China has numerous native domestic goat breeds, but so far there has been no extensive study on genetic diversity, population demographic history, and origin of Chinese goats. To determine the origin and genetic diversity of Chinese goats, we analyzed the complete mtDNA D-loop sequences of 183 goats from 13 breeds. The haplotype diversity value found in each breed ranged from 0.9333 to 1.0000. The nucleotide diversity value ranged from 0.006337 to 0.025194. Our results showed that there were four mtDNA lineages (A, B, C and D), in which lineage A was predominant, lineage B was moderate, and lineages C and D were at low frequencies. Lineages C and D were observed only in the Tibetan breed. The results revealed multiple maternal origins of Chinese domestic goats. There was weaker geographical structuring in the 13 Chinese goat populations, which suggested that there existed high gene flow among goat populations caused by the extensive transportation of goats in the course of history.
The bacterial diversity of 10 marine sponges belonging to the species Cliona celata, an unidentified Cliona species, Haliclona cinerea, Halichondria okadai, Hymeniacidon sinapium, Lissodendoryx isodictyalis, Penares incrustans, Spirastrella abata, and Spirastrella panis collected from Jeju Island and Chuja Island was investigated using amplicon pyrosequencing of the 16S rRNA genes. The microbial diversity of these sponges has as of yet rarely or never been investigated. All sponges, except Cliona celata, Lissodendoryx isodictyalis, and Penares incrustans, showed simple bacterial diversity, in which one or two bacterial OTUs occupied more than 50% of the pyrosequencing reads and their OTU rank abundance curves saturated quickly. Most of the predominant OTUs belonged to Alpha-, Beta-, or Gammaproteobacteria. Some of the OTUs from the sponges with low diversity were distantly (88%~89%) or moderately (93%~97%) related to known sequences in the GenBank nucleotide database. Phylogenetic analysis showed that many of the representative sequences of the OTUs were related to the sequences originating from sponges and corals, and formed sponge-specific or -related clades. The marine sponges investigated herein harbored unexplored bacterial diversity, and further studies should be done to understand the microbes present in sponges.
The 886-bp sequence of the mitochondrial region encoding the cytb gene was used to identify the origin of the Goryeong (GR) population of Pungitius kaibarae and to characterize genetic diversity and structure among wild populations. The GR population showed the lowest haplotype diversity (Hd=0.000), while the highest haplotype diversity was confirmed at 0.755 among the Goseoung (GS) population. Nucleotide diversity ranged was the highest diversity at 0.00291 in the GS population and the lowest diversity at 0.00000 in the GR population. The GR population was genetically closest to the Pohang (PH) population. The haplotype network confirmed that the GR population was most similar to the PH population. The GR population also clustered with the PH population with high bootstrap support (98%) in a phylogenetic tree. We thus conclude that the GR population is derived from a population similar to the PH population.
The partial sequences of mtDNA cytochrome b gene in two subspecies of striped field mouse(Apodemus agrarius coreae and A. agrarius manchuricus) from Korea and northeast China were analyzed to determine the degree of genetic diversity in ech subspecies and to confirm their subspecific difference. In 18 specimens of A. agrarius coreae, ten haplotypes were resulted, and in two specimens of A. agrarius manchuricus. one haplotype was revealed. Tamura-Nei nucleotide distance among ten haplotypes in subspecies coreae ranged 0.36 to 1.86%. and nucleotide distance between two subspecies (coreae and manchuricus) was 0.37 to 1.47%: maximum infrasubspecific divergence in coreae was greater than maximum intersubspecific difference between two subspecies. Moreover, no major subgroup was resulted when 11 haplotypes in two subspecies were compared. Our sequence result was not cancordant with the morphological data studied so far, and it is concluded that cytochrome b gene sequence is not a good genetic marker to distinguish two subspecies of A. agrarius. In futurem, mtDNA control region analyses seemded to be necessary to reveal genetic relationship between these two subspecies of A. agrarius.
Genetic variation in the Asian shore crab Hemigrapsus sanguineus was determined from partial mitochondrial DNA (mtDNA) sequences of the cytochrome b (Cytb) gene. Samples included 143 crabs from six localities along three coastlines in South Korea. A nucleotide sequence analysis revealed 38 variable sites in a 470-bp sequence, which defined 37 haplotypes. The haplotypes were not associated geographically and had a shallow genealogy. Pairwise $F_{ST}$ tests and a two-dimensional scaling analysis revealed no significant genetic differentiation among most of the populations. The low pairwise comparison values, but significant genetic differentiation of a northeastern population from all other populations, might have been influenced by a restriction in gene flow caused by hydrographic conditions such as ocean boundaries. The high haplotype diversity, low nucleotide diversity, and time since H. sanguineus expansion in Korean coastal waters indicate rapid population growth and a recent, sudden expansion in the Late Pleistocene.
Kim, Sang-Gyu;Morishima, Kagayaki;Arai, Katsutoshi
Animal cells and systems
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v.14
no.3
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pp.197-206
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2010
The population structure of brown sole was examined in a total of 308 samples collected from three geographical groups: one locality (Gangneung) on the east side of the Korean Peninsula, two localities (Erimo and Tomakomai) on the southeastern side and four localities (Onishika, Teshio, Tomamae and Yoichi) on the northwestern side of Hokkaido Island, Japan, by using sequences of 484 bp from the 5' end of the control region of mtDNA. We detected 225 haplotypes, but 183 of them were unique to an individual. A total of 116 nucleotide sites were variable. Haplotype diversity (h) was very high, ranging from 0.989 to 1.000, and nucleotide diversity (${\pi}$) was detected between 0.015 and 0.022. Genetic distances (${\Phi}_{ST}$) within populations, among populations and among geographical groups were low (0.0002 to 0.0014). No significant difference was detected by the AMOVA test (P < 0.05). Pairwise $F_{ST}$ values between sampling localities were also low and not significant. Genetic differentiation was not detected among sampling localities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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