The microbiological and chemical identification of antibiotic residues was attempted for livestock and seafood products including pork (n=34), beef (n=34), chicken (n=32), flatfish (n=37), armorclad rockfish (n=36), and sea bream (n=27). The meat (n=100) and seafood (n=100) samples were collected from 9 markets in 5 major Korean cities. Antibiotic substances were identified from the classes of tetracyclines, macrolides, penicillins, aminoglycosides, polyethers, peptides, sulfonamides, quinolones, chlorampenicols, and novobiocins using a microbiological assay, the Charm II test and high performance liquid chromatography (HPLC) with ultra violet (UV) and fluorescence detectors. The results showed that 2 tetracyclines (oxytetracycline and tetracycline) and 3 quinolones (ciprofloxacin, norfloxacin, and enrofloxacin) were detected in 4 samples of flatfish among all 100 seafood samples tested. No antibiotic residues were detected in the 100 livestock product samples tested. The amounts (min-max, mg/kg) of the residual antibiotics were as follows; tetracycline 0.78-0.85, oxytetracycline 0.49-0.74, ciprofloxacin 0.09-0.83, norfloxacin 0.01-0.21, enrofloxacin 0.12-2.98. These data indicate that the total detection rate of antibiotics in livestock and seafood products was approximately 2%.
본 연구에서는 우유에서 플루오르퀴놀론계 합성 항균제의 확인과 정량을 위하여 HPLC를 이용한 방법을 개발하였다. 우유 내 단백질을 제거하기 위하여 삼염화초산을 사용하였고 아세토니트릴로 추출하였다. 그리고 $Strata^{TM}$-X 카트리지로 정제한 후 $C_{18}$ 칼럼을 이용한 HPLC로 분석하였다. 높은 감도를 얻기 위하여 형광 검출기를 사용하였고, 최적파장 Ex: 278 nm, Em: 456 nm에서 분석한 결과 우유 내에서 정량한계와 회수율은 각각 ofloxacin 40 ${\mu}g$/kg, 73.6-95.2%, norfloxacin 10 ${\mu}g$/kg, 77.3-91.9%, ciprofloxacin 20 ${\mu}g$/kg, 91.6-94.3%, enrofloxacin 10 ${\mu}g$/kg, 81.0-87.8%, sarafloxacin 10 ${\mu}g$/kg, 71.3-81.0%, orbifloxacin 10 ${\mu}g$/kg, 89.4-90.8%, danofloxcin 2 ${\mu}g$/kg, 69.4-85.5%이었다.
A field test using Nophazin (drying off period therapeutics) was done from May, 1989 to October, 1989. 299 quarters of 75 cows from 28 herds were tested. The results were summarized as follows. 1. At the day 7 after parturition, CMT-was 81.60%, clots were removed perfectly, removal rate of hard, hot, pain was 99.6%, only one hard 0.35% was maintained. Recovery rate of general symptoms was 100%. 2. Recovery rate in Nophazin treatment was 100% in Micro-coccus SPP, Corynebacterium SPP, and unisolated, 97.06% in Enterobacterid SPP, 95.58% in Staphylococcus SPP, 91.67% in other Bacilli, 89.19% in Streptococcus SPP, Overall recovery rate was 95.32%, And fungi did not react. 3. The ratio of isolated microorganisms was Staphylococcus SPP 49.8%, Streptococcus SPP 16.3%, Enterobacteria SPP 15.0%, Micrococcus SPP 7.9% Corynebacterium SPP 4.4%, Pseudomonas SPP 2.6%, Bacilli 2.6% and Fungi 1.3%. 4. The range of sensitivity of each microorganism to therapeutics is as follow : Staphylococcus SPP 61.1∼94.7%, Streptococcus SPP 51.4∼91.9%, Micrococcus SPP 44.4∼94.4%, Corynebacterium SPP 70∼80%, Enterobacteria SPP 11.8∼88.2%, and other Gram negative bacilli 8.3∼83.3%. Overall sensitivity was in the range of 50.4∼92.0%, Microorganisms showed the highest sensitivity (80∼94.7%) to Nophazin. 5. New intramammary infection rate was 3.96% (9 strains) at paturition, 8.37% (19 strains) at the day 7 after paturition. Persistent organism wits 6.17% .(14 strains). 6. There was no side effect of Nophazin treatment.
Ornithobacterium rhinotracheale(OR)은 최근에 알려진 그람음성 간균으로서 가금류에서 호흡기감염을 일으킨다. OR균의 항생제 감수성과 OR에 대한 국내발생현황을 조사하기 위하여 11개 OR분리주의 8중 항생제에 대한 최소발육억제농도(MIC)와 국내 달의 OR 항체보유율을 조사하였다. 모든 분리주는 ampicillin, tetracycline 및 doxycycline에 대하여 높은 감수성을 나타내었다. MIC는 각각 0.38~2 ${\mu}g$ /ml, 0.094~3 ${\mu}g$/ml, 0.094~3 ${\mu}g$/ml으로 ciprofloxacin, norfloxacin, enrofloxacin및 ofloxacin의 MIC는 대부분 3 ${\mu}g$/ml~48 ${\mu}g$/ml로 나타났고 gentamicin에 대하여는 모든 분리주가 저항성을 나타내었다. 시판되는 OR ELISA검사 kit를 사용하여, 국내에서 사육하는 육계 및 육용종계와 산란계 188계군에 대한 항체보유율을 검사한 결과, 육계 5계군(4%),육용종계 17계군(50%),산란계 16계군(55.2%)이 OR항체 양성계군으로 나타났다. 이 결과로 보아 OR은 국내 양계장내 광범위하게 만연되어 있을 것으로 보인다.
수용성 키토산의 농도와 가교제 (글루타알데히드)의 양을 변화시키면서 미네랄오일 내에서 키토산용액의 유화법에 의해 수용성 키토산 미세구를 제조하였다. 그러고 약물이 봉입되어진 수용성 키토산 미세구의 분해에 따른 형태의 변화, 약물의 봉입효율, 약물 방출 거동과 같은 물리화학적 특성을 규명하였다. Norfloxacion 이 봉입된 수용성 키토산 미세구는 표면의 약물에 의해 나타나는 과량의 약물 방출이 없는 높은 약물 봉입 함량을 보였다. 표면에 약물이 존재하지 않음을 선 회절 분석으로 확인하였다. 수용성 키토산 미세구의 분해 특성과 약물방출 거동을 관찰한 결과 가교제의 양이 약물의 봉입량, 방출, 그리고 분해에 중요한 역할을 하는 것을 확인하였다. 수용성 키토산 미세구는 가교제의 양이 증가함에 따라 분해속도가 느렸으며, 이와 동시에 약물이 천천히 방출되었음을 확인하였다.
넙치에서 분리된 Edwardsiella tarda 49균주에 대한 8종류 항균제의 최소 억제 농도를 broth dilution 법으로 조사하였다. E. tarda는 ampicillin과 amoxicillin에 대해 각각 38.8%와 61.2%의 내성률을 가지고 있었고 ciprofloxacin과 norfloxacin에 대해 4.1%의 내성률을 나타내었다. E. tarda에 대한 oxytetracycline의 $MIC_{50}$ 값은 $64{\mu}g/ml$ 이었고 amoxicillin의 $MIC_{50}$은 $32{\mu}g/ml$, oxolinic acid의 $MIC_{50}$ 값은 $8{\mu}g/ml$이었다. Ciprofloxacin의 $MIC_{50}$ 값은 $0.25{\mu}g/ml$로 조사한 8종류 항균제 중에서 가장 낮았다.
A simultaneous analytical method was developed and validated for the analysis of prohibited fluoroquinolone (FQ) antibiotics including norfloxacin, ofloxacin, and pefloxacin, released by aquaculture in seawater and effluents. The samples were filtered, and extracts were obtained using a solid phase extraction cartridge with methanol (MeOH). The extracts were concentrated, and analyzed using ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Two different columns and four different mobile phases were compared to achieve optimal separation and sensitivity for target compounds. Typical validation parameters including linearity, recovery of surrogate standard, instrument detection limit (IDL), limit of quantification (LOQ), and method detection limit (MDL) were evaluated. The linearity of calibration curves was over 0.999. Recoveries of surrogate ranged from 87.6% to 113%. The LOQ of target compounds was approximately 3-8 times lower than those reported in previous studies. The IDL and MDL were 0.06-0.57 and 0.06-0.37 ng/L, respectively. Seven effluent samples collected from an aquaculture located in Jeju were analyzed; however, not all target compounds were detected in the samples, suggesting that the banned antibiotics were not used. Overall, this established method was able to simultaneously analyze the three FQ antibiotics, and may be useful for monitoring prohibited antibiotics in the fishery industry.
지금까지 사용해온 많은 항균제들에 대한 내성의 획득은 어병세균의 박멸을 어렵게 만드는 심각한 문제를 야기하고 있다. 이 연구에서는 최근 인간의 세균성 질병치료 목적으로 사용하기 시작하거나 개발중인 new quinolone계 약물 14종을 대상으로 군산근교와 뱀장어(Anguilla japonica) 양만장 사육수에서 분리한 75종의 Edwardsiella tarda균에 대한 항균활성을 측정함으로써 장래의 신규 수산용 항균제 개발에 필요한 정보를 얻고자 시도하였다. Broth dilution assay에 의해 측정한 in vitro 항균활성시험에서 DU-6859는 $MIC_{50}$ 값 $0.05{\mu}g$/ml로 가장 강력한 약효를 보여주었다. $MIC_{50}$값 0.2-$0.78{\mu}g$/ml의 범위에 드는 약물들인 T-3762, Bay-y3118, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin 및 tosufloxacin은 그 다음으로 강력한 약물군을 형성하였다. 한편 difloxacin, sparfloxacin, fleroxacin, Q-35, amifloxain, lomefloxacin 및 enoxain 등은 약효가 약한 약물들로서 $MIC_{50}$값이 1.56-$3.13{\mu}g$/ml 범위에 속하였다. 이들 항균제에 대해서 내성(MIC 값이 $v$/ml 이상으로 정하였을 때)을 가지고 있는 균수는 T-3762 및 Bay-y3118은 3주, norfloxacin은 5주, tosufloxacin 12주, ciprofloxacin 및 ofloxacin 13주, sparfloxacin 16주, fleroxacin 19주, amifloxacin 및 lomefloxacin 31주, Q-35 36주, enoxacin 41주, difloxacin 44주로 각각 나타났다. DU-6859의 경우에는 내성이 있는 균주가 전혀 발견되지 않았다. 이 연구 결과들은 new quinolone계 약물들 사이에도 Edwardsiella tarda균에 대한 항균활성이 다양함을 시사하며 또한 향후 항균제 도입에 중요한 참고자료로 이용될 수 있을 것이다.
The present study was performed to evaluate whether the application of Fenbufen is reasonable for predicting the convulsive liability of the quinolone derivatives and to examine whether pentylenetetrazole (PTZ) can be used as a screening tool for their Central Nervous System (CNS) toxic pontential. The convulsive activity of the quinolones was markedly potentiated by the pretreatment of Fenbufen. In combination with Fenbufen, enoxacin (ENX), norfloxacin (XFLX), and ciprofloxacin (CPFX) provoked convlusions and subsequent death at the intravenous doses of 0.5mg/kg, 10mg/kg, and 40mg/kg, respectively, whereas ofloxacin (OFLX) and pefloxacin (PFLX) did not induce convulsions and death even at a relatively high dose of 100mg/kg iv.
The objective of this study was to compare occurrence of the shipping fever associated with vaccination and mass medication in Korean Native Cow. Lack of vaccination (Pasteurella haemolytica, infectious bovine rhinotracheitis, bovine viral diarrhea, parainfluenza 3, and bovine respiratory syncytial virus) and mass medication before and after transportation, 67% of gram-negative cocci were detected. However, with vaccination and mass medication, only 33% of Gram-negative cocci were detected. When antimicrobial susceptibility for the detected bacterium was tested, apramycin, ampicillin, amilacin, clindamycin, gentamycin, kanamycin, penicillin, and streptomycin were resistant, whereas tylocin, amoxicillin, linocospetin, nalidixic acid, norfloxacin, oxalinic acid, and cefotaxime were susceptible. Morbidity and average therapeutic effect were 33% and 1.0time with vaccination and mass medication and were 78% and 5.3 times without vaccination and mass medication, respectively. Therefore, the results suggest that shipping fever would be considerably decreased with vaccination including mass medication before and after transportation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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