Stenotrophomonas sp. OK-5 capable of degrading TNT has been found to have three nitroreductase fractions designated as NTR fractions I, II, and III. NTR in a previous study. This study was attempted to reveal physiological and molecular characteristics of NTR fractions I, II, and III in strain OK-5. Several chemicals (e.g., EDTA, NaCl, dithiothreitol, $\beta$-mercaptoethanol) were tested for their effect on enzyme activity of NTRs, demonstrating that enzyme activities of NTR fractions I, II, and III from OK-5 were inhibited in the presence of $\beta$-mercaptoethanol. Substrate specificity test showed that NTR fractions I, II, and III all have over 70% enzyme activities for nitrobenzene or RDX as a substrate. N-terminal amino acid sequence of NTR fraction I from Stenotrophomonas sp. OK-5 was $^1MSDLLNADAVVQLFRTARDS^20$ and exhibited 70% sequence homology with that of NTR from Xanthomonas campestris. NTR I gene from Stenotrophomonas sp. OK-5 (SmOK5nrI) shared extensive sequence homology in deduced amino acid sequence of PCR product with NTRs from Xanthomonas campestris (81 %), X. axonopodis (75%), Streptomyces avermitilis(30%), whereas they had low homology with that from P. putida KT2440 (pnrB) (16%).
Mitochondria participate in various intracellular metabolic pathways such as generating intracellular ATP, synthesizing several essential molecules, regulating calcium homeostasis, and producing the cell's reactive oxygen species (ROS). Emerging studies have demonstrated newly discovered roles of mitochondria, which participate in the regulation of innate immune responses by modulating NLRP3 inflammasomes. Here, we review the recently proposed pathways to be involved in mitochondria-mediated regulation of inflammasome activation and inflammation: 1) mitochondrial ROS, 2) calcium mobilization, 3) nicotinamide adenine dinucleotide ($NAD^+$) reduction, 4) cardiolipin, 5) mitofusin, 6) mitochondrial DNA, 7) mitochondrial antiviral signaling protein. Furthermore, we highlight the significance of mitophagy as a negative regulator of mitochondrial damage and NLRP3 inflammasome activation, as potentially helpful therapeutic approaches which could potentially address uncontrolled inflammation.
The NAD(P)-linked $3{\alpha}-Hydroxysteroid$$dehydrogenase(3{\alpha}-HSD)$ of rat liver cytosol is powerfully inhibited by the non-steroidal anti-inflammatory drugs in rank-order of their therapeutic potency, and this observation has now been developed into a rapid screen for predicting the potency of products that show anti-inflammatory effect. Five-plants were screened by using this method. Among them, BuOH-fraction of Mucuna birdwoodiana showed strong inhibitory effect on $3{\alpha}-HSD$, and three isoflavone compounds were isolated. Inhibitory activates of isolated compounds were compared.
$3{\alpha}-Hydroxysteroid$ dehydrogenase $(3{\alpha}-HSD)$ is one of the main enzymes involved in the metabolism of the active androgen, dihydrotestosterone. The NAD(P)-linked $3{\alpha}-HSD$ of rat liver cytosol is powerfully inhibited by the non-steroidal anti-inflammatory drugs in rank-order of their therapeutic potency. This observation has now been developed into a rapid screen for predicting the potency of products that show anti-inflammatory effect. 52-Chinese Herbs that clear heat were screened by using this method.
A recovery process of pure alumina powder from the wasted aluminum etching solution of electrolytic condenser works was studied. The possibility of this process was considered in the basis of thermodynamic data nad physico-chemical properties for the recovered materials were tested. In order to obtain pure alumina, Fe3+ and Cu2+ in the solution as impurities were solvent-extracted, respectively, and then, Al3+ was precipitated by changing the pH of the solution. As the results, more than 99.9% of Al3+ in the solution was recovered by the precipitation method. The weight of the precipitate was reduced to about 65 wt.% of the original one by calcination and the sizes of the recovered powders were in order of 3-5$\mu\textrm{m}$. The precipitates were transformed to $\alpha$-Al2O3 at the calcination temperature about 120$0^{\circ}C$.
Lovastatin is a cholesterol-lowering agent, which plays a role of an inhibitor of 3-hydroxy-3- methylglutaryl coenzyme A reductase (HMG-CoA). When thiamine was supplemented in 3L batch fermentation, the production of lovastatin was improved. At the same time, the levels of pyruvic acid and NAD(P)H were estimated in the course of the fermentation of A. terreus. For the high level production of lovastatin, semi fed-batch fermentation was performed. And the thiamine level was maintained to a concentration of 20 mg/L and glucose was supplied. The final dry cell weight was lowered by 30 % and final lovastatin concentration was increased by 33 %. Final lovastatin concentration of 3.3 g/L was achieved in 8 days.
Three kinds of organic matter such as glucose, oxalic acid, and ethanol were added to the media(N-free or $NO_{3}$-riched) and their effects on the nitrogen fixation of Nostoc pruniforme were measured by manometric technique through the experiments in vivo. 1) The organic matters used in this experiments showed effective results as a role of substrate for the fixation of atmospheric nitrogen. 2) In the nitrogen-free medium treated with the both of flucose nad ethanol, the highest nitrogen uptakes were detected in the treated of low concentrations (glucose ; 0.1%, 0.5%, ethanol : 0.1%, 0.5%). On the contrary, the highest nitrogen uptakes in $NO_{3}$-riched medium were measured at the treated of high concentrations (glucose ; 2%, 1%, ethanol ; 1.5%, 1.0%). 3) The highest nitrogen uptakes in N-free medium treated with oxalic acid were measured at the concentration of 2% and 1%, respectively. In the medium of $NO_{3}$-riched, the nitrogen uptakes were in the opposite directions.
This study was performed to investigate the morophological and positional correlation between the upper cervical vertebra, the oral structures and the pharyngeal tissues, and the correlation of these anatomical structures with dental features, such as teeth wear area nad tooth contact status, etc. Seventy patients with temporamandibular disorders and sixty three dental students without any signs and symptoms in head and neck region were selected for this study. All they had natural dentition without any fixed and removable protheses. Teeth wear area and arch width wre measured from the upper dental cast, tooth contact status were observed by T-Scan system$^\textregistered$ and four cephaloradiograpohs were taken from four head postures, namely, natural(NHP), forward(FHP), upward(UHP), and downward head postiure(DHP). 22 cephalometric items were measured on the films and the data were processed with SAS statistical program. The result of this study were as follows : 1. In normal group, angle of cervical vertebra tangent and of between hard and soft palate were broader in female subjects than those in male subjacets, but distance from subocciput to axis, size of soft palate, and pharyngeal space width were larger in male subjects. 2. In normal group with natural head posture, the items correlated each others from the three anatomical regions were distance between first nad second vertebra in posterior part, distance from the lingual surface of lower anterior teeth to anterior surface of soft palate, and distance from the hyoid bone to third vertebra. 3. Three set of items showed significant correlation each other in the four head postures in normal group. First set was the angle between hard and soft palate and the idstance from subocciput to posterior arch of first vertebra, second set was the distance between first and second vertebra in posterior part and the teeth wear area, third set was number and force of tooth contact and length of soft palate and distance from anterior tip of hyoid bone to mandibular plane.
Glucose 6-phosphate dehydrogenase (G6PDH, EC 1.1.1.49) in Deinococcus radiophilus, an extraordinarily UV-resistant bacterium, was investigated to gain insight into its resistance as it was shown to be involved in a scavenging system of superoxide $(O_2^{-1})$ and peroxide $(O_2^{-2})$ generated by UV and oxidative stresses. D. radiophilus possesses two G6PDH isoforms: G6PDH-1 and G6PDH-2, both showing dual coenzyme specificity for NAD and NADP. Both enzymes were detected throughout the growth phase; however, the substantial increase in G6PDH-1 observed at stationary phase or as the results of external oxidative stress indicates that this enzyme is inducible under stressful environmental conditions. The G6PDH-1 and G6PDH-2 were purified 122- and 44-fold (using NADP as cofactor), respectively. The purified G6PDH-1 and G6PDH-2 had the specific activity of 2,890 and 1,033 U/mg protein (using NADP as cofactor) and 3,078 and 1,076 U/mg protein (using NAD as cofactor), respectively. The isoforms also evidenced distinct structures; G6PDH-1 was a tetramer of 35 kDa subunits, whereas G6PDH-2 was a dimer of 60kDa subunits. The pIs of G6PDH-1 and G6PDH-2 were 6.4 and 5.7, respectively. Both G6PDH-1 and G6PDH-2 were inhibited by both ATP and oleic acid, but G6PDH-1 was found to be more susceptible to oleic acid than G6PDH-2. The profound inhibition of both enzymes by ${\beta}-naphthoquinone-4-sulfonic$ acid suggests the involvement of lysine at their active sites. $Cu^{2+}$ was a potent inhibitor to G6PDH-2, but a lesser degree to G6PDH-1. Both G6PDH-1 and G6PDH-2 showed an optimum activity at pH 8.0 and $30^{\circ}C$.
Recently, the importance of on-site detection of pathogens has drawn attention in the field of molecular diagnostics. Unlike in a laboratory environment, on-site detection of pathogens is performed under limited resources. In this study, we tried to optimize the experimental conditions for on-site detection of pathogens using a combination of ultra-fast convection polymerase chain reaction (cPCR), which does not require regular electricity, and nucleic acid lateral flow (NALF) immunoassay. Salmonella species was used as the model pathogen. DNA was amplified within 21 minutes (equivalent to 30 cycles of polymerase chain reaction) using ultra-fast cPCR, and the amplified DNA was detected within approximately 5 minutes using NALF immunoassay with nucleic acid detection (NAD) cassettes. In order to avoid false-positive results with NAD cassettes, we reduced the primer concentration or ultra-fast cPCR run time. For singleplex ultra-fast cPCR, the primer concentration needed to be lowered to $3{\mu}M$ or the run time needed to be reduced to 14 minutes. For duplex ultra-fast cPCR, $2{\mu}M$ of each primer set needed to be used or the run time needed to be reduced to 14 minutes. Under the conditions optimized in this study, the combination of ultra-fast cPCR and NALF immunoassay can be applied to on-site detection of pathogens. The combination can be easily applied to the detection of oral pathogens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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