Kim, Ji-Young;Choi, Jung-Nam;Kim, Pil;Sok, Dai-Eun;Nam, Soo-Wan;Lee, Choong-Hwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.1
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pp.51-54
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2009
Myxobacteria, Gram-negative soil bacteria, are a well-known producer of bioactive secondary metabolites. Therefore, this study presents a methodological approach for the high-throughput screening of secondary metabolites from 4 wild-type Myxococcus xanthus strains. First, electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) was performed using extracellular crude extracts. As a result, 22 metabolite peaks were detected, and the metabolite profiling was then conducted using the m/z value, retention time, and MS/MS fragmentation pattern analyses. Among the peaks, one unknown compound peak was identified as analogous to the myxalamid A, B, and C series. An analysis of the tandem mass spectrometric fragmentation patterns and HR-MS identified myxalamid K as a new compound derived from M. xanthus. In conclusion, LC-MS/MS-based chemical screening of diverse secondary metabolites would appear to be an effective approach for discovering unknown microbial secondary metabolites.
Antifungal activity of three Myxococcus spp., KYC 1126, 1136, and 2001, was tested in vitro against three phytopathogenic fungi (Botrytis cinerea, Colletotrichum acutatum, and Pyricularia grisea). Spore germination and mycelial growth of the three pathogenic fungi were completely inhibited by bioactive substances from a myxobacterium KYC 1126. In addition, the activity of KYC 1126 was fungicidal, but liquid culture filtrate of KYC 1126 did not affect protoplast reversion in C. acutatum. A bioassay of KYC 1126 filtrate against anthracnose in hot pepper was conducted in the greenhouse and field at 2009 and 2010. The incidence of anthracnose in control seedlings was 74%, but was reduced to 29% after KYC 1126 treatment. The control value with KYC 1126 was 60% while that with the fungicide dithianon was 42%. In the greenhouse, disease incidence with KYC 1126 was consistentely 10-35% lower than with fungicide as a positive control. The control value with KYC 1126 was 13.4% and 41.0%, whereas that with the fungicide was 52.3% and 63% in 2009 and 2010, respectively. Although anti-anthracnose activity of KYC 1126 was not maintained for long time in the field, the bacteriolytic myxobacterium KYC 1126 could be a prospective biocontrol agent.
Phenalamides $A_1{\sim}A_3$ were reisolated as cytotoxic substances from culture broth of Myxococcus stipitatus JW111. The producing strain was isolated from the marine sediment collected off the shore of Geomun Island, Korea. The active principles were extracted from cell mass with acetone and successively purified by silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, and finally recycling prep. HPLC. These compounds demonstrated significant cytotoxicity against certain human cancer cells, having $IC_50$ values ranging from 0.23 to 0.50 ${\mu}g/ml$. Moreover, they also inhibited the growth of adriamycin-resistant HCT/ADM human cancer cell line as well as its parent sensitive cell line.
Apicularen A (Api A) was recently isolated from Chondromyces sp. as a potent antitumor agent. Because of its unique chemical structure, a macrolide with a highly unsaturated amide side chain, and potent growth inhibitory effect in various cancer cell lines, Api A is currently in clinical trial for cancer therapy. In the present study, the effect of Api A on in vitro angiogenesis of bovine aortic endothelial cells (BAECS) was investigated. Api A potently inhibited the proliferation of BAECS in a dose-dependent manner. Treatment of the endothelial cells with up to 10 ng/ml of the compound did not show any cytotoxicity. In addition, it inhibited basic fibroblast growth factor (bFGF)-induced invasion and capillary tube formation of BAECS at concentrations of 2-5 ng/ml. These results, therefore, demonstrate that Apl A is a novel antiangiogenic agent and may suppress the growth of tumors, at least in part, by the inhibition of neovascularization.
An, Dongju;Park, Soohyun;Lee, Jong Suk;Cho, Kyungyun
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.42
no.4
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pp.331-338
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2014
Myxococcus stipitatus KYC4013 extract exhibited the most potent antifungal activity among the extracts of 207 Myxococcus strains isolated in Korea. High-resolution LC-MS analysis revealed that M. stipitatus KYC4013 produces five antifungal substances and three other secondary metabolites that were predicted to be melithiazol and phenalamide derivatives, respectively. The putative melithiazol derivatives were best produced in CYS medium and the putative phenalamide derivatives were best produced in VY3 medium.
Myxococcus stipitatus, a myxobacterium, forms spherical fruiting bodies with stems on edaphic substrates in enrichment cultures for isolation. However, an agar medium on which purely isolated strains of M. stipitatus form this type of fruiting bodies has not been known until now. In this study, since M. stipitatus DSM 14675 forms a hemispherical fruiting body-like structure on CYS agar medium, the effects of CYS medium components on fruiting body formation were investigated. Based on the results obtained, an agar medium on which M. stipitatus forms spherical fruiting bodies with stems was developed. Additionally, a liquid medium in which M. stipitatus grows in a dispersed manner was also formulated in this investigation.
We have developed a method for the preparation of dispersed cell suspensions of Chondromyces crocatus, which is essential for quantitative studies of fruiting body formation. Cells of C. crocatus have a tendency to aggregate in liquid, hindering quantitative studies. However, cells grown on casitone-yeast extract agar plates, containing 3% agar, allowed the preparation of well-dispersed cell suspensions. Cell suspensions at a concentration of $2{\times}10^8cells/ml$, obtained by using this method, developed typical C. crocatus fruiting bodies when placed as $20{\mu}l$ spots on agar plates with no nutrient supplementation. The addition of nutrients such as casitone altered or inhibited fruiting body formation. Fruiting body branch formation increased with increasing agar content. Under optimum conditions, the formation of fruiting body structure in C. crocatus KYC2823 was completed within 24 h.
We classified the previously reported antagonistic strains of Sorangium cellulosum into 5 subspecies (A-E). Four strains were antagonistic to Botrytis cinerea (AB group) and two strains were antagonistic to Colletotrichum acutatum (AC group). According to the genetic and sequential analyses with standard genes, xynB1, bglA2, groEL1 for grouping, all strains of AB group were belonged to subspecies C and all strains of AC group were belonged to subspecies D. In addition, high pressure liquid chromatography with the culture filtrates confirmed the genetic results, because AB group had peaks with retention time at 20-22.5 minutes, whereas AC group had no peak. There was positive relationship ($R^2=0.9652$) between the control values of infecting B. cinerea on cherry tomatoes and the main peak areas of chromatograms among the four isolates of AB group. From the subspecies results of AB group, the main peak of KYC 3270 was expected to be epothilone D. However the retention times of the standard of commercial epothilone D and the main peak of KYC 3270 culture filtrate were different as 9.9 and 11.581 min., respectively. Finally, the antagonistic metabolite of AB group was inferred as 7-ketone epothilone D.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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