Park, Young-Goo;Park, Mee-Hee;Yang, Jae-Kyung;Chung, Young-Gwan;Park, Myung-Suk
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제8권1호
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pp.32-36
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2003
Production of camptothecin ((PT) from callus cultures of Camptotheca acuminata Decne was affected by light and culture conditions. Among the culture media tested, modified B5 medium containing 3% (w/v) sucrose, 2 mg/L B,4-D, 2 times of MS medium vitamins, 500 mg/L casein hydrolysate, 250 mg/L myo-inositol, 0.05% (w/v) activated charcoal, and 0.15% (w/v) gelite was used for callus induction . The highest cell growth and CPT production were obtained in dark and green light condition, respectively. Photoperiod has no effect on cell growth and CPT production. Both cell growth and CPT production were also influenced by combination ratio of red and blue light .Cell growth and CPT production were the highest in the ratio of red and blue light,90:10.
J. S. Yang;H. J. Suh;H. S. Kang;T. S. Shin;D. S. Byun;Kim, H. R.
한국어업기술학회:학술대회논문집
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한국어업기술학회 2001년도 춘계 수산관련학회 공동학술대회발표요지집
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pp.220-221
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2001
Phytic acid (myo-inositol 1,2,3,4,5,6-hexakisdihydrogen phosphate) is one of the major storage form of phosphorous in the seeds of plants, which are the principal components of feed stuffs. Monogastric animals like Pigs and poultry as well as fish lack phytase activities in their digestive system and most undigested phytic acid was excreted in their manure. (omitted)
Streptomyces coelicolor의 전 유전체 청보를 분석한 결과(7), 유전자 ID1103135가 코드 하는 open reading frame SCO7697이 phytase[myo-inositol hexakisphosphate phosphohydrolase상동성 (3-6,8,23)]에 유의하게 유사한 것으로 판단되었다. S. coelicolor A3(2)M의 염색체 DNA를 주형으로 PCR 방법으로 SCO7697 전체를 포함하는 DNA 단편을 클로닝하였다. 두 가지의 서로 다른 길이를 갖는 클로닝 된 ID1103135 DNA 단편을 E. coli 발현용 벡터pET728a(+)에 삽입하여,두 종의 재조합 벡터 pET28-SP와 pET28-LP를 얻었다. pET28-SP 와 pET28-LP를 각각 E. coli BL2l에 도입하여, IPTG로 발현 유도된 단백질을 SDS-polyacrylamide 전기영동으로 확인한 결과, 발현은 성공적으로 이루어 졌으나 대부분불용체를 형성하고 분자량은 예상보다 약간 큰 것으로 나타났다. 불용체 형성은 단백질의 불활성화를 수반 함으로서, 배양 온도를 $37^{\circ}C$에서 $30^{\circ}C$로 변화시켜 배양하는 방법으로 발현된 단백질을 가용화 시켰다. 발현된 단백질을 추출하여 조추출물 또는 정제한 상태로 phytase활성을 측청하였으나 효소활성은 관찰할 수 없었다. 대장균 시스템에서의 발현이 효소 활성의 소실을 초래했을 가능성이 있으므로, ID1103135 유전자를 자신의 promoter를 함유하도록 PCR 클로닝하여, E. coli - Streptomyces의 shuttle vector인 pWHM3에 삽입하고, 이를 방선균 호스트인 S. lividans에 도입하였다. 형질 전환체의 세포조추출액 및 세포배양액의 phytase 활성을 측청하였으나, 역시 활성을 확인할수 없었다. 이와 같은 결과는 SCO7697이 아주 높은 확률(E value; $6e^{-89}$)로 phytase일 것으로 annotation 되었으나, 실제는 이와는 다른 기능을 함유하고 있음을 시사하고 있다.
아이스플랜트(Mesembryanthemum crystallinum)의 일반성분과 cyclitol 화합물을 분석하였으며, 기능성 식품의 소재로 활용 가능성을 알아보기 위하여 추출물의 용매분획별 항산화 효과 및 항당뇨 활성 등을 검정하였다. 무기질 함량은 K와 Na가 각각 $1,213.33{\pm}2.52$와 $545.53{\pm}12.01mg/100g$으로 가장 많았고, S, Ca, P, Mg의 순이었다. Cyclitol 화합물의 함량은 D-pinitol이 $4.04{\pm}0.08mg/g$으로 가장 많았으며, chiro-inositol과 myo-inositol은 각각 $2.82{\pm}0.01$과 $0.25{\pm}0.01mg/g$으로 비교적 적게 함유되어 있었다. 용매분획별 총페놀 함량은 chloroform과 ethyl acetate 분획에서 각각 $35.80{\pm}1.33$과 $23.70{\pm}0.62mg\;GAE/g$으로 많았다. DPPH, ABTS, FRAP 및 lipid/MA assay에 의한 항산화 활성은 공통적으로 chloroform 분획에서 가장 높은 활성을 나타내었으며, ethyl acetate 분획에서 비교적 높은 활성을 나타내었다. 항산화 활성은 용매분획별 총페놀 함량과 비례적이었다. 한편 항당뇨 효과는 ${\alpha}-glucosidase$ 저해활성에서 모든 용매분획에서 50% 이상의 활성을 나타내었으며, ethyl acetate, butanol 및 chloroform 분획에서 각각 $90.33{\pm}0.40$, $87.98{\pm}0.16$ 및 $86.38{\pm}0.51%$의 높은 활성을 나타내었다. ${\alpha}-Amylase$ 저해 활성은 $25.63{\pm}1.45{\sim}60.34{\pm}2.67%$로서 ${\alpha}-glucosidase$ 저해 활성보다는 낮았으나, 용매분획별 저해 활성은 유사한 경향을 보였다. 이와 같은 연구 결과로 볼 때 아이스플랜트가 항산화 및 항당뇨 기능성 천연소재로 활용이 가능할 것으로 생각되었다.
본 연구는 아이스플랜트의 생리활성을 향상시키고, 식생활에서의 활용가능성을 높이기 위하여 물김치 형태로 발효시켰으며, 아이스플랜트의 성분 및 몇 가지 생리활성을 발효 전과 비교하였다. 물김치 침지액의 pH는 발효 6일째까지 계속해서 낮아졌으며, lactic acid의 생성량은 발효 4일째에 가장 많았다. 아이스플랜트 물김치 건더기 중의 D-pinitol은 발효 전 $4.196{\pm}0.096mg/g$에서 6일째에는 $3.843{\pm}0.116mg/g$으로 감소하였다. 그러나 myo-inositol과 D-chiro-inositol은 각각 발효 전 $0.453{\pm}0.022$와 $2.815{\pm}0.008mg/g$에서 6일째에 $0.630{\pm}0.029$와 $4.117{\pm}0.096mg/g$으로 증가하였다. 아이스플랜트 추출물의 DPPH, ABTS radical 소거활성 및 FRAP 활성은 대체로 발효 후에 높게 나타나 유사한 경향이었으며, 1 mg/ml의 농도로 처리하였을 때 각각 발효 5일째($79.09{\pm}0.69%$), 4일째($87.55{\pm}1.21%$) 및 6일째($78.72{\pm}0.99%$)에 가장 높았다. Lipid/MA assay에 의한 항산화 활성도 대체로 발효 후에 높게 나타나 유사한 경향이었으며, 추출물을 $500{\mu}g/ml$ 처리하였을 때, 발효 4일째에 가장 높은 활성($64.65{\pm}1.63%$)을 나타났으며, 발효 5, 6일째에는 낮아지는 경향이었다. 아이스플랜트 추출물의 t-BHP, $H_2O_2$ 및 ethanol에 의하여 손상된 BNL CL.2 세포의 생존율은 각각 $14.19{\pm}0.98$, $13.80{\pm}2.25$ 및 $25.89{\pm}2.90%$이었으나, 추출물을 $200{\mu}g/ml$의 농도로 처리하였을 경우, 각각 발효 6일째에 $50.07{\pm}4.85%$, 2일째에 57.06% 및 4일째에 $66.06{\pm}1.36%$의 세포생존율을 나타내어 간세포가 회복되고 있음을 알 수 있었다. 그러나 발효 후에 간세포 보호효과가 뚜렷이 증가하지는 않았다. ${\alpha}-Glucosidase$ 저해활성은 모든 실험군에서 $83.52{\pm}2.69{\sim}92.79{\pm}2.16%$로 상당히 높게 나타났으며, 발효기간이 경과함에 따라 조금씩 증가하였다. 한편 ${\alpha}-Amylase$ 저해활성은 전체적으로 $52.64{\pm}3.26{\sim}57.56{\pm}1.21%$로 나타났으며 발효 전후에 뚜렷한 차이가 없었다. 이와 같은 결과로 볼 때, 아이스플랜트의 물김치 발효기간은 4~5일이 적정할 것으로 생각되었다. 한편 발효에 의한 기능성은 항산화효과를 제외한 간세포보호 및 ${\alpha}-Glucosidase$, ${\alpha}-Amylase$ 저해활성은 전체적으로 소폭 향상에 그쳤다. 따라서 이러한 결과를 바탕으로 발효 등 다양한 가공방법이 개발되어, 향후 아이스플랜트의 소비촉진의 계기가 되기를 기대한다.
Normal aging causes changes in the brain volume, connection, function and cognition. The brain changes with increases in age and difference of gender varies at all levels. Studies about normal brain aging using various brain magnetic resonance imaging (MRI) variables such as gray and white matter structural imaging, proton spectroscopy, apparent diffusion coefficient, diffusion tensor imaging and functional MRI are reviewed. Total volume of brain increases after birth but decreases after 9 years old. During adulthood, total volume of brain is relatively stable. After 35 years old, brain shrinks gradually. The changes of gray and white matters by aging show different features. N-acetylaspartate decreases or remains unchanged but choline, creatine and myo-inositol increase with aging. Apparent diffusion coefficient decreases till 20 years old and then becomes stable during adulthood and increase after 60 years old. Diffusion tensor properties in white matter tissue are variable during aging. Resting-state functional connectivity decreases after middle age. Structural and functional brain changes with normal aging are important for studying various psychiatric diseases such as dementia, schizophrenia and bipolar disorder. Our review may be helpful for studying longitudinal changes of these diseases and successful aging.
These studies were conducted to investigate effects of phytohormone and activated carbon on the growth and rooting of teratoma shoots induced from Nicotiana tabacum cv. NC2326 transformed by Aerobacterium tumefaciens C58. GA was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoots from teratoma shoot, however, leaves of teratoma shoot cultured on the medium with GA were pointed. ABA was also effective in promoting shoot elongation, but was not for reduction of multiple shoots. Teratoma shoot cultured on the medium with 1 n activated carbon promoted shoot elongation and inhibited the number of shoots differentiated, but was grown as abnormal shoot. Addition of 1% activated carbon and 0.5mg/l BA to culture media was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoot and for formation of round leaves as normal leaves. Though these shoots were inoculated on the rooting medium, they could not from roots but formed multiple shoots. Boric acid, myo-inositol and sucrose were also ineffective on the rooting of teratoma shoots.
본 연구는 phytate를 myo-inositol과 무기태인으로 분해시키는 효소인 phytase 생산균주의 분리 및 현미의 phytate 저감 최적 온도 및 pH에 관한 것이다. 먼저 phytase 활성 측정을 통하여 우수한 phytase 활성을 가지는 균주를 김치로부터 분리 및 선발하고 내산성과 내열성 실험으로 균주의 특성을 파악하고, 당 이용성 조사 및 16S rRNA sequence 분석으로 L. sakei가 동정되어 이 균주를 L. sakei Wikim001으로 명명하였다. L. sakei Wikim001에 의한 현미의 phytate 분해능을 확인하였으며, L. sakei Wikim001의 현미의 phytate 분해의 적정반응 pH는 5.0~6.5이며 온도는 $30{\sim}40^{\circ}C$.로 나타났다.
지렁이, vermicomposted com manure(처리구)와 composted cow manure(무처리구)에서 각각 순수 분리한 미생물의 exo- 및 endo-cellular phytase의 활성을 측정하고 처리구와 무처리구 간의 인의 함량을 비교함으로써 지렁이가 우분 내 인산가수분해효소의 활성과인의 함량에 미치는 영향을 검토하였다. 1. 미생물의 exo-cellular phytase의 활성은 EW-3,9, CT-2,4,5, SO-2,3,5 등에서만 확인되었으며 지렁이, 처리구와 무처리구 간에는 비슷한 활성을 보였으나 가장 높은 활성을 나타난 균주는 지렁이 분리한 EW-3이었다. 2. 미생물의 endo-cellular phytase의 활성은 모든 균주에서 확인되었고 지렁이와 처리구에서 분리한 균주의 효소활성이 무처리구에 비해 비교적 높은 경향을 보였으며 가장 높은 활성을 나타낸 균주는 처리구에서 분리한 CT-3이었다. 3. 가장 높은 phytase 활성을 나타낸 EW-3과 CT-3균주는 각각 Microbacterium sp.와 Corynebacterium sp.인 것으로 확인되었다. Vermicomposted cow manure의 총 인과유효인의 함량은 composted cow manure에서 보다 약 41.0%, 36.4% 정도 각각 감소하였다.
There are two groups of significant functional constituents in sesame seeds on the whole; one is the vegetable oils and another is the anti-oxidative compounds. However, although high amounts of major fatty acids are synthesized in sesame seeds, their composition is unfavorable because the contents of alpha- and gamma-linolenic acid, the essential fatty acids, are very low or do not produced in sesame seeds. So, to increase these fatty acids in sesame seeds, one strategy is to overexpress their genes, ${\omega}$-3 fatty acid desaturase for alpha-linolenic acid and delta-6 fatty acid desaturase for gamma-linolenid acid, in them. Another molecular target is to enhance alpha-tocopherol, vitamin E, because its content is very low in sesame seeds. The enzyme, gamma-tocopherol methyltransferase, catalyzes the conversion of gamma-tocophero to alpha-tocopherol. Overexpression of this enzyme in sesame seeds could be also a good molecular breeding target. Reduction of phytic acid is also another molecular target in sesame seeds because phosphorus pollution may be caused by its high content in sesame seeds. Accordingly, to do so, one of target enzymes could be myo-inositol 1-phosphate synthase which is a key regulatory enzyme in the pathway of phytic aicd biosyntheses. In this lecture, a molecular strategy for development of value-added sesame crop is described in association with some results of our experiments involved in the molecular characterizations of the genes mentioned above.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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