The effect of acute cadmium-neuropathy on phospholipid metabolism in rat sciatic nerve was investigated. An animal model of cadmium neuropathy was induced by feeding diet containing cadmium to Sprague-Dawley rat for two weeks. Four weeks aged Sprague-Dawley rats were divided into four groups : normal control group, 10ppm-cadmium treated group, 100ppm-cadmium treated group, 1000ppm-cadmium treated group, reference drug, myo-inositol-treated group. All rats were sacrificed at the end of two weeks. The rate of incorporation of 2-[3H]myo-inositol into polyphosphinositide was significantly decreased while the rates of incorporation into phospholipid of titratedserine, ethanolamine and choline were unchanged in sciatic nerve obtained from cadmium-treated rat. Continuously the activities of three enzymes concerned with inositol phospholiped metabolism were measured in homogenates of rat sciatic nerves. Cystidine diglyceride transferase and phophatidylinositol kinase showed significantly decreased activities while phosphatidylinositol-4-phosphate kinase did not show any significant change in activity by cadmium treatment. However these deficits of inositol phospholipid metabolism were ameliorated by myo-inositol administration and these effectiveness were more potent in lower dose cadmiumtreated rats than higher dose cadmium-treated rats. These results suggest that cadmium intoxicated peripheral nerve with perturbation of the ployphosphoinositide metabolism and alteration of the enzyme activity which concerned with myo-inositol metabolism.
Cloned myo-inositol-1-phosphate synthase (INOS) of Drosophila melanogaster was expressed in Escherichia coli, and purified using a His-affinity column. The purified INOS required NAD$\^$+/ for the conversion of glucose-6-phosphate to inositol-1-phosphate. The optimum pH for myo-inositol-1-phosphate synthase is 7.5, and the maximum activity was measured at 40$^{\circ}C$. The molecular weight of the native enzyme, as determined by gel filtration, was approximately M$\_$r/ 271,000${\pm}$15,000. A single subunit of approximately M$\_$r/ 62,000${\pm}$5,000 was detected upon SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The Michaelis ($K_{m}$) and dissociation constants for glucose-6-phosphate were 3.5 and 3.7 mM, whereas for the cofactor NAD$\^$+/ these were 0.42 and 0.4 mM, respectively.
The objective of this study was to examine the effect of vitamin B (pantothenic acid, folic acid, and myo-inositol) that was supplemented to embryo culture medium on in vitro development of parthenogenetically activated (PA) pig embryos. Cumulus-oocyte complexes derived from slaughtered ovaries were matured in TCM-199 supplemented with porcine follicular fluid, cysteine, pyruvate, EGF, insulin, and hormones (hCG and eCG) for the first 22 h and then further cultured in hormone-free medium for an additional 22 h. After maturation culture, metaphase II oocytes that extruded 1st polar body were electrically activated and treated with $5.0\;{\mu}g/ml$ cytochalasin B for 4 h. Then, PA embryos were cultured for 7 days in a modified NCSU-23 that was supplemented with pantothenic acid, myo-inositol, or folic acid at different concentrations ($3{\sim}300\;{\mu}M$) according to the experimental design. Myo-inositol added to culture medium did not show any beneficial or inhibitory effects on embryo cleavage and blastocyst formation. However, $300\;{\mu}M$ pantothenic acid significantly inhibited blastocyst formation compared to control (no addition) (24% vs. 36%, p<0.05). Folic acid ($300\;{\mu}M$) significantly (p<0.05) increased blastocyst formation (56%) compared to control (41%). Our results demonstrated that in vitro development of PA embryos was significantly influenced by vitamin B and addition of $300\;{\mu}M$ folic acid to culture medium improved in vitro development of pig PA embryos.
myo-Inositol (MI)을 대사하여 다른 물질로 전환하는 미생물을 과수원 토양으로부터 분리하였다. 분리균 YB-46은 유일한 탄소원으로 MI이 첨가된 배지에서 성장하였고 16S rDNA 염기서열에 따라 Enterobacter 속의 균주로 추정되었다. Fosmid pCC1FOS 벡터를 사용하여 제조된 거대 유전체 은행으로부터 MI을 미지의 대사 물질로 전환하는 Escherichia coli 형질전환주를 선발하였다. 이로부터 플라스미드를 분리하고 삽입된 유전자의 일부 염기서열을 결정한 결과 336 아미노 잔기로 구성된 myo-inositol dehytrogenase (IolG)를 암호화하는 iolG 유전자가 발견되었다. 분리균 YB-46의 IolG는 E. aerogenes와 Bacillus subtilis의 IolG와 약 50% 수준의 상동성을 보였다. 카르복실 말단에 hexahistidine이 연결되도록 제조한 His-tagged IoG (HtIolG)의 유전자를 재조합 대장균에서 발현하여 균체 파쇄액으로부터 HtIolG를 정제하였다. 정제된 HtIolG는 $45^{\circ}C$와 pH 10.5에서 최대 활성을 보였고 MI과 D-glucose에 대한 활성이 가장 높았으며 D-chiro-inositol, D-mannitol 및 D-xylose에도 90% 이상의 활성을 보였다. 최적 반응조건에서 MI을 기질로 하여 반응 동력학적 계수를 측정한 결과 $K_m$과 $V_{max}$가 1.83 mM과 $0.724{\mu}mol/min/mg$로 확인되었다. HtIolG의 활성은 $Zn^{2+}$에 의해 1.7배 증가하였으며, $Co^{2+}$와 SDS에 의해서는 크게 감소하였다.
1. myo-inositol의 산화(酸化) 생성물(生成物)인 inosose를 환원(還元)하여 ax.- 및 eq.-alcohol에 도달(到達)시켰다. 2. 2-O-(p-hydroxybenzoyl)-myo-inositol [IX], 4-O-(p-hydroxybenzoyl)-myo-inositol [X], O-(p-hydroxybenzoyl)-scyllo-inositol [XX], 그리고 2-O-(p-hydroxybenzoyl)-epi-inositol [XXVI] 등(等) 신화합물(新化合物) 4종(種)을 합성(合成)하였고 이것을 얻기 위하여 합성(合成)한 [V], [VI], [VII], [VIII], [XVIII], [XIX], [XXIV], [XXV] 등(等) 8종(種) 화합물(化合物)도 아직까지의 문헌(文獻)에 기재(記載)가 없는 화합물(化合物)들이다. 3. 여기서 합성(合成)한 ester [IX] [X], [XX], [XXVI] 4종(種)은 모두 항균력(抗菌力)이 나타나며 epi-inositol ester [XXVI] 의 Aspergillus oryzae에 대(對)한 항균력(抗菌力)이 가장 강력(强力)하게 나타난다. 이와 같이 항균력(抗菌力)은 화합물(化合物)의 입체구조(立體構造)와 관련(關聯)되는 것 같다.
Jo, You-Young;Kim, Sun-Hee;Yang, Young-Yell;Kang, Choong-Min;Sohng, Jae-Kyung;Suh, Joo-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권6호
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pp.906-911
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2003
The function of genes related to spectinomycin biosynthesis (spcD, speA, speB, spcS2) from Streptomyces spectabilis ATCC 27741, a spectinomycin producer, was analyzed. Each gene was subcloned from a spectinomycin biosynthetic gene cluster and overexpressed in E. coli BL21 (DE3) using pET vector. After incubating each purified protein with its possible substrates, the final products were analyzed using high-performance liquid chromatography (HPLC). From these results, spcD, speA, and speB have been identified to be dTDP-glucose synthase, myo-inositol monophosphatase, and myo-inositol dehydrogenase, respectively. In addition, the results suggest that the spcS2 gene product functions downstream of the speB gene product in the biosynthetic pathway of spectinomycin. Taken together, the present study elucidates the early steps of the biosynthetic pathway for 6-deoxyhexose (6-DOH) part (actinospectose) and aminocyclitol part (actinamine) of spectinomycin.
미오-이노시톨과 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산 및 올레산등 5종의 지방산 메틸에스테르를 디메틸술폭시드 용매내에서 에스테르교환반응을 행하였다. 에스테르교환반응생성물은 얇은막 크로마토그래피, 관 크로마토그래피에 의하여 각각의 에스테르를 분리할 수 있고 미오-이노시톨 모노에스테르는 향류분배 방법에 의하여 잘 분리할 수 있다. 모노에스테르의 수용액에 대한 표면장력, 기포력, 유화력등을 측정하고 색소법에 의한 임계미셀농도를 추정하고 HLB값을 산정하였다. 이 결과로 미오-이노시톨모노에스테르는 계면활성을 나타낸다는 사실을 알았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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