쥐와포자충(MCR주)을 장기간에 걸쳐 그 생명을 유지시키기 위하여 냉동 보존을 시도하였다. 그 오오시스트를 냉동보호제를 첨가하지 않고 증류수에 현탁시켜 $-20^{\circ}C$에서 24시간 예비냉각시킨 다음 $-70^{\circ}C$에 냉동보존하였다. 냉동 오오시스트를 $5^\circ}C$에서 해동시켜 마우스에 접종시킨 바 15개월간 냉동보존시켜토 사멸하지 않고 마우스에의 감염성이 유지되었다. 한편, 2.5% 중크롬산칼륨에 현탁시켜 6.5개월간 $5^{\circ}C$에 냉장한 오오시스트는 이미 사멸하여 감염성이 소실되었다.
Japanese encephalitis has been prevalent for long time in the Far East and many patients have been reported in both South East and Mid-West Asia recently. Recently, vaccine was used in prevention of this viral disease of man which was derived from formalin inactivated virus inoculated into mouse brain, but live attenuated active vaccine for human is not developed yet. Author inoculated Japanese encephalitis virus into several cell culture strains for development of live attenuated encephalitis virus strain and the results were as follows: 1. Japanese encephalitis virus was inactivated rapidly in cell free medium at $36^{\circ}C$ and totally inactivated by 72 hours. 2. In growth curve of Japanese encephalitis virus in HeLa cell cultures, maximal multiplication of the virus was occured at 4th day and virus multiplication was continued for at least 12 days. 3. After succeeding passage of the virus in HeLa cell cultures and human esophagus epithelial cell cultures, infectivity of virus for mice was disappeared from 2nd passage in HeLa cell cultures and 3rd passage in esophagus epithelial cell cultures. 4. In inoculation to monkey kidney epithelial cells and chick embryo cell cultures, infectivity of the virus for mice was continued after 10th passages.
크립토스포리디움의 활성 및 감염성 판정을 위해 Direct RT-PCR, 세포배양 후 RT-PCR 및 면역형광염색법을 비교한 결과는 다음과 같다. 1) 크립토스포리디움의 HSP70 gene에 대해 direct RT-PCR한 결과, 민감도가 매우 높아 저농도로 존재하는 환경시료에서의 크립토스포리디움 활성을 모니터링하는데 장점이 있을 것으로 보이나, 감염성의 판정은 알 수 없으며, 정량화가 안되는 단점이 있었다. 2) ${\beta}-tubulin$ gene에 대해 RT-nested PCR을 한 결과 크립 토스포리디움의 난포낭이 $1{\times}10^4$ 세포수정도 되어야 검출이 되는 것으로 나타나 HSP70 gene에 대한 RT-PCR결과와 비교할 때 10,000배 이상 민감도가 떨어지는 것으로 나타났다. 3) 세포배양 후 RT-PCR 또는 면역형광염색법을 이용할 경우에는 민감도가 direct RT-PCR보다 다소 떨어지는 단점이 있었으나 크립토스포리디움의 오염원이나 오염이 심한 지역의 감염성 조사에 적합할 것으로 나타났으나, 정량화가 필요한 경우에는 세포배양 후 면역형광염색법이 효과적일 것으로 나타났다.
Listeria monocytogenes is a facultative bacterium that cause severe clinical disease including meningoencephalitis, septicaemia, and abortion in pregnant women, newborn infants, the debilitated elderly or immunocompromised people. In preliminary experiments on murine listeriosis we noticed suppurative gastritis in mice infected with L. monocytogenes by the intragastric route. The aims of the present study were ⅰ) to describe the histopathology of the experimentally listeria-induced gastroenteritis ⅱ) to investigate the influence of bacterial strain and laboratory mouse strain on infectivity and on the severity of the infection; [3] to examine possible effects of preliminary intragastric administration of sodium bicarbonate. (omitted)
Eight monoclonal antibodies(MAbs) against bovine coronavirus(BCV) were produced and characterized. Three MAbs(1G9, 4H12, 5C1) specific to the S glycoprotein and two HE glycoprotein-specific MAbs(2A5, 5G4) were found to neutralize the BCV in fluorescence focus neutralization(FFN) test. Two HE-specific MAbs from the neutralizing MAbs inhibited the hemagglutinating activity of the BCV. None of the N protein-specific MAbs(1C1, 5A12, 6H1) neutralized the virus infectivity. Bovine coronavirus and mouse hepatitis virus, which belong to group II coronaviruses, were differentiated from other groups of coronaviruses(porcine transmissible gastroenteritis virus, porcine epidemic diarrhea virus, canine coronavirus) by all MAbs in fluorescence antibody test(FA), but not in FFN test.
Present study was performed to investigate the host-parasite relationship of the Korean Trichinella isolate (KTI). In the experiment to observe the infectivity of KTI to several kinds of animals, the reproductive capacity index (RCT) was highest in cats, and that in mice, hamsters and rats was followe4 in descending order. However, birds, i.e. wild goose and chicken, did not infect with KTI. The number of larvae per a gram of muscle (LPG: 377) was highest in the tongue of cats experimentally infected with KTI larvae. LPG in the diaphragm, anterior leg, back, posterior leg and abdominal muscles were 313, 246, 234, 225 and 170 respectively. Muscle larvae recovered at 55 days after infection were revealed the highest infectivity (RCI: 137.2) in mice. RCI was comparatively low in the mice infected with less than 25 day-old and more than 300 day-old larvae. In the experiment to observe the susceptibility of KTI by the mouse strain, ICR (RCI: 137.2), C57BL/6 (RCI: 108.8), DBA/2 (RCI: 107.1), C3H (RCI: 98.7), BALB/c (RCI: 96.9), FVB (RCI: 96.1) and B6C3F1 (RCI: 85.3) were very susceptible. However, BDF1 (RCI: 57.7) and CBA (RCI. 57.1) were revealed the moderate susceptibility, and B6CBAF1 (RCI: 23.1) was shown the lowest. The infection sites of adults were posteriorly transferred in the small intestine of experimental mice according to the infection periods of muscle larvae. The infection characteristics of KTI observed in this study may be useful as the basic data in the advanced studies, furthermore in the study of other Trichinella isolates.
Hantaan virus(HV) 76-118 strain was inoculated into suckling ICR mice by intra-nasal route with an inoculum of $10LD_{50}$. Mortality was 65% at the 3rd week after inoculation, but declined to 35% at the 4th week. Infectivity was determined by the measuring immuno-fluorescent antibody in sera. The peak of infectivity was 80% at the 4'th week after inoculation. Viremia was reached peak level of $1.7{\times}10^4\;PFU/ml$ by day 10. Immunofluorescent antibody and neutralizing antibody appeared by 2 weeks and 15-17 days respectively, but achieved similar titer by 35 days. By using a monoclonal antibody to HV 76-118, viral antigens were initially detected in inguinal and axillary lymph node by 2 days. Viral antigens in bone marrow and lung were delayed much more than in those of lymph node. These were similar with those of intra-peritoneal and intra-muscular route. Immune complex against IgG, IgM and C3 appeared by 16 days, 14 days, and 18 days respectively. The pattern of immunofluorescence in the basement membrane of glomeruli was diffuse membranous. Spotted pattern was also observed in the tissue stained with anti-mouse C3 antibody. By 20 days, control tissue was also shown immune complex in the glomeruli.
Cryptosporidium parvum oocysts were isolated from a child suffering from acute gastroenteritis and successfully passaged in a calf and mice (designated hereafter SNU-H1) in the Republic of Korea; its molecular genotype has been analyzed. The GAG microsatellite region was amplified by a polymerase chain reaction (PCR), with a 238 base pair product, which is commonly displayed in C. parvum. The isolate was shown to be a mixture of the genotypes 1 (anthroponotic) and 2 (zoonotic). To study its infectivity in animals, 2 calves and 3 strains of mice were infected with the SNU-H1; in these animals, the propagation of both genotypes was successful. In immunosup-pressed (ImSP) BALB/c and C57BU6 mice the number of oocysts decreased after day 10 post-infection (PI); but in ImSP ICR mice, they remained constant until day 27 PI. The results show that both the C. parvum genotypes 1 and 2 can be propagated in calves and ImSP mice.
In the genus Cryptosporidium, there are more than 14 species with different sizes and habitats, as well as different hosts. Among these, C. parvum and C. hominis are known to be human pathogens. As C. parvum can survive exposure to harsh environmental conditions, including various disinfectants or high doses of radiation, it is considered to be an important environmental pathogen that may be a threat to human health. However, the resistance of other Cryptosporidium species to various environmental conditions is unknown. In this study, resistance against ${\gamma}$-irradiation was compared between C. parvum and C. muris using in vivo infection in mice. The capability of C. muris to infect mice could be eliminated with 1,000 Gy of ${\gamma}$-irradiation, while C. parvum remained infective in mice after up to 1,000 Gy of ${\gamma}$-irradiation, although the peak number of oocysts per gram of feces decreased to 16% that of non-irradiated oocysts. The difference in radioresistance between these 2 Cryptosporidium species should be investigated by further studies.
실험적으로 스파르가눔을 프라지콴텔 처치, 감마선 조사 및 기계적 절단을 시행하고 마우스에 경구감염시켜 감염력을 관찰하였다. 스파르가눔은 유혈목이(Rhabdophis tigrina)로 부터 분리 수집한 것 또는 실험감염 마우스로 부터 회수한 것이었으며 마우스는 서울대학교 동물실험실로 부터 공급받은 ICR계이었다. 스파르가눔은 $10{\;}\mu\textrm{g}/ml$ 농도의 프라지콴텔용액(대조군: Tyrode용액에서 4시간 배양)에 넣어 $36^{\circ}C$ 배양기에서 30분, 1, 2 및 4시간 동안 배양한 다음 각 실험군당 4들마리의 마우스에 각각 5마리씩 경구감염시키고 1개월 후에 충체를 회수하였던 바, 각각 평균 80%(대조군), 100%, 80%, 80% 및 76%의 회수율을 나타내었다. 스파르가눔을 $Cs^{l37}$ 감마선으로 10, 30, 50, 75, 100, 150 및 1000 Gy로 조사한 다음 각 군당 2틱마리의 마우스에 각각 5마리씩 경구감염시키고 1개월 후에 충체를 회수하였던 바, 각각 평균 96%(대조군), 100%, 76%, 93%, 77%, 69%, 56% 및 5%의 회수율을 나타내었다. 두절의 전단으로 부터 각각 0.5, 1, 2 및 3 mm 부위를 잘라서 각 군당 4-5마리의 마우스에 각각 5마리씩 경구감염시키고 1개월 후에 충체를 회수하였던 바, 80%, 90%, 70%, 88% 및 90%(대조군)의 회수율을 나타내었다. 이상의 결과로 스파르가눔이 프라지콴텔, 감마선 및 기계적 절단에 대하여 매우 저항성이 높으며 마우스에서의 감염력 및 재생력을 나타내는 부위가 스파르가눔의 두절 앞 끝에 위치함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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