Anticarcinogenic activity of astaxanthin-contatining egg yolk(designate AEY) was investigated for mouse ascites carcinogenesis induced by mouse Sarcoma-180(S-180) cells. Female ICR mice(8mice/treatment, 7∼8weeks of age, 25±1g) were injected, i.p. with S-180 cells(1×107cell/ml PBS). Two days later, each mouse was given 0.1ml PBS containing AEY(10, 25 or 50ug/g body weight) or control egg yolk (CEY; 50ug/g body weight) every other day for 7 times. Control mice were only given 0.1ml S-180 cells and 0.1ml PBS. Mice treated with 25ug/g body weight of AEY showed 24.8 days of life, which was equivalent to 138% of control mice's life(180.0 dyas). Based on dose-dependant experiment of AFY, mice treated with 10ug/g body weight showed slightly longer life(19.4 days) relative to mice treated with control mice, and mice treated with 50ug/g body weight exhibited 21.9 days of life. Mice treated with any dose of AEY exhibited longer life than mice with CEY 50ug/g body weight. Body weight of mice treated with AEY was reduced relative to that of control mice CEY-treated mice. These results suggest than AEY inhibits the carcinogenesis of mouse ascites induced by S-180 cells.
목단피의 mouse 복수암에 대한 항암성을 다른 생약제의 항암성과 비교하여 연구하였다. 천연생약제(목단피, 주목, 울금, 인경쓱, 여정실, 맥문동) methanol 추출물을 hexane, chloroform ($CHCl_3$), ethylacetate (EtOAc), butanol (BuOH)로 fractionation하여 mouse leukemia L1210 cell과 Sarcoma 180 (S-180) cell에 강한 독성을 나타낸 fraction에 대해 mouse 복수암 억제실험을 실시하였다. 복수형 종양세포 S-180을 ICR mouse (male, $6{\sim}7$주령, $23g{\pm}3g$, 처리당 7마리)의 복부에 주사 ($1{\times}10^{6}$ cells/0.1 ml PBS)한 1일 후 부터 10% DMSO에 용해한 시료 ($30{\mu}g/g$ body weight)를 매일 0.1ml씩 10일간 주사하고 수명연장 효과와 몸무게의 변화를 조사하였다. 처리 fraction 중에서 목단피의 EtOAc fraction이 가장 강한 항암성을 보였는데, 수명연장에서는 대조구의 17.2일 (100%)에 비하여 28.7일로서 167%로 연장되었으며, 체중 증가율도 대조구보다 낮았다 (p<0.05). 목단피의 농도별 (5, 10, 30, $60{\mu}g/g$ body weight) 항암효과는 $30{\mu}g$에서 가장 높았고, $60{\mu}g$처리구 에서는 독성이 나타났다. 목단피의 EtOAc fraction으로부터 GC-MS에 의해 잠정적으로 동정된 2-methoxyphenol, 1-(4-hydroxy-3- methoxyphenyl)-ethanone, 8-methyl-2,4(1H,3H)-pteridinedione, 2,5-furandicarboxylic dimethyl ester 가 mouse 복수암 억제에 관련이 있는 주요 화합물로 추정된다.
왕겨가 Agaricus blazei Murill (AB: 신령버섯)균사체 액체배양 추출물의 항암성을 증가시키는지에 관한 연구를 수행하였다. AB균사체를 대두박을 기본으로 한 액체배지에 다양한 조건으로 배양하여, $\beta$-glucan 함량, Brix, 균사체를 측정하여 적정 생육조건을 선정하고, 이들의 열수추출물의 S-180 cell로 유도한 mouse 복수암에 대한 항암성을 조사하였다. AB균사체는 $25^{\circ}C$에서 5일간 배양하였을 때 최적 생육을 나타내었고, 이 배양물이 다른 조건에서 배양한 배양물보다 우수한 항암성을 나타내었다. AB균사체의 생육 및 항암성은 변온배양에 따른 효과는 없었다. 따라서 이 최적배양조건($25^{\circ}C$, 5일 배양)에서 AB균사체를 1% 왕겨분말이 함유된 액체배지에 배양하고, 이의 열수 추출물의 항암성을 검증하였다. 1% 왕겨가 함유된 액체배지에서 배양한 열수추출물의 항암성은 왕겨가 함유되지 않은 배지의 열수추출물보다 항암성이 유의성 있게 증가되었다(p<0.05). 왕겨의 첨가는 AB균사체의 생육을 오히려 촉진시켰다. 이 결과는 왕겨가 AB균사체 뿐 만 아니라 다른 버섯균사체 액체배양물의 항암성 증진을 위한 원료로 활용될 수 있을 것임을 의미한다.
재래식 버섯균사체메주로부터 제조된 재래식 버섯균사체 된장의 항종양성, 항산화성 및 항돌연변이성을 연구하였다. 항종양성 (S-180 세포로 유발한 mouse ascites cancer) 에서는 느타리, 영지, 상황, 신령 버섯균사체 된장이 각각 33, 30, 26, 25% 억제하여 재래식 된장(11%)에 비해 매우 우수한 항종양성을 나타내었다. 버섯균사체 된장은 S. typhimurium TA98에 대한 IQ와 AFB$_1$에 의한 돌연변이성을 각각 39.7~46.1%, 38.0~39.7% 억제하여 대조된장(32.0, 33.2%)에 비해 항돌연변이성이 우수하였다. S. fyphimurium TA 100에 대해서는 IQ와 AFB$_1$의 돌연변이성을 각각 31.9~35.6%, 24.9~30.4% 억제하여 대조된장(27.5, 22.5%)에 비해 항돌연변이성이 좋았다. 항산화성 역시 버섯균사체된장이 대조된장에 비해 효과가 우수하였다 관련 물질로서 $\beta$-D-g1ucan 함량은 버섯균사체된장의 경우 재래식 된장에 비하여 3~8배, 총 Phenol성 화합물과 isoflavone 함량은 느타리버섯균사체된장과 신령버섯균사체가 가장 높았다.
신령버섯균사체(Agaricus blazei mycelia: ABM)를 대두박이 함유된 액체배지에 배양하고, 이것을 자가분해($53^{\circ}C$, pH 5.5, 120 rpm, 3 hr)하여 항암성이 강한 isoflavone-conjugated glycoprotein (Gluvone 이라 명명)을 분리하였다. Gluvone은 지금까지 알려진 당단백질과는 달리 분자량이 작고(9,400 Da), isoflavone이 결합되어 있다는 점이 다르다, Gluvone은 60% 탄수화물(glucose, fructose, ribose), 31% 단백질 및 2% isoflavone (daidzein, genistein)으로 구성되어 있었다. 이 Gluvone은 S-180 복수암세포, MCF-7 인체유선암세포에 대한 독성이 강하였고, S-180 세포로 유발한 mouse 복수암을 강하게 억제하였다.
Nattokinase (NK, E.C. 3.4.21.62) is a serine protease produced by Bacillus subtilis natto that shows promise for the treatment of thrombotic disease. In this study, we assessed the effects of NK on the development of hepatocellular carcinoma (HCC), a principal malignancy of the liver that causes morbidity and mortality worldwide. Crude extracts of NK (NCE) were isolated from fermentation medium by centrifugation and separated into three fractions (<10 K, 100~30 K and >30K). Orthotopic HCC mouse models were established and NCE was administered by oral gavage. H&E staining was performed to examine the pathology of HCC livers. Immunohistochemistry and immunofluorescence were used to evaluate FOXM1, CD31, CD44 and vimentin expression in the liver. Compared to PBS groups, NCE increased the survival rates of HCC-bearing mice to 31% and decreased ascites. Low-intensity ultrasound imaging showed that the hypoechoic mass area was lower in NCE-treated mice and that tumor growth significantly decreased. IHC staining showed that the expression of FOXM1 was inhibited by NCE treatment. Immunofluorescence results revealed lower levels of CD31, CD44 and vimentin in the NCE groups. Taken together, these data demonstrate that NCE from Bacillus subtilis natto improves survival and inhibits tumor growth in HCC mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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