The coat protein (CP) gene of cucumber mosaic virus-As (CMV-As) strain was engineered for expression in the plant by using the cauliflower mosaic virus 35S transcript regulatory sequences. The CP gene was cloned into an Agrobacterium-derived binary vector. A chimeric gene was constructed by the cDNA of CMV-As CP and plant expression vector pBI121. The clone, pCMAS66, was first introduced into the phagemid vector pSPORT1 for situating sense orientation for translation and making restriction sites in order to re-introduce plant expression vector, pHI121. The resulting subclone pCASCP02 and plant expression vector pBI121 were treated with BamHI-SacI for excising the target gene and removing GUS gene, respectively. After Agrobacterium transformation by freeze-thaw technique, the clone, pCMASCP121-123 which contains sense orientation of the target gene, was selected and confirmed by restriction endonuclease analysis. The CMV-As CP gene was introduced into A. tumefaciens. The results on tobacco plant transformation with the vector system revealed that the system could be successfully introduced and showed high frequency of selection to putative transformations.
Phan, Mi Sa Vo;Seo, Jang-Kyun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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제30권2호
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pp.159-167
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2014
Molecular and biological characteristics of an isolate of Cucumber mosaic virus (CMV) from Glycine soja (wild soybean), named as CMV-209, was examined in this study. Comparison of nucleotide sequences and phylogenetic analyses of CMV-209 with the other CMV strains revealed that CMV-209 belonged to CMV subgroup I. However, CMV-209 showed some genetic distance from the CMV strains assigned to subgroup IA or subgroup IB. Infectious full-genome cDNA clones of CMV-209 were generated under the control of the Cauliflower mosaic virus 35S promoter. Infectivity of the CMV-209 clones was evaluated in Nicotiana benthamiana and various legume species. Our assays revealed that CMV-209 could systemically infect Glycine soja (wild soybean) and Pisum sativum (pea) as well as N. benthamiana, but not the other legume species.
Tobacco mosaic tobamovirus (TMV), cucumber mosaic cucumovirus (CMV), cucumber green mottle mosaic tobamovirus (CGMMV) and zucchini yellow mosaic potyvirus (ZYMV) from individual fruits and seeds of hot pepper and cucumber were detected by the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The dilution end-points for RT-PCR in curde sap from TMV. and CMV - infected hot pepper leaves and CMV - and CGMMV-infected cucumber leaves were 10-5. However, the amount of PCR product obtained from preparation of ZYMV-infected cucumber leaf was 10-fold lower than those of CMV or CGMMV-infected cucumber leaves. In hot pepper, both TMV and CMV were detected in all parts of the fruit wall tissue, but the yields of PCR products in the fruit stalk and its surrounding tissues were higher than those of the end parts of the fruit. On the other hand, in cucumber fruit infected with CMV, CGMMV or ZYMV, the fruit wall tissue and seed located in both stalk and end parts showed higher yields of PCR products than those of intermediate parts. Of five viruses that were analysed, only TMV in hot pepper seed, and CGMMV and CMV in cucumber seed were detected in testa parts.
Gentian plants (Gentiana spp.) showing yellow ringspot, mosaic, necrotic fleck and malformation were collected from their growing areas in Taegu, Kyungpook province and Alpine Agricultural Experiment Station, Korea. Three viruses isolated from the naturally infected gentian were identified as broad bean wilt virus (BBWV), cucumber mosaic virus (CMV) and clover yellow vein virus identified as broad bean wilt virus (CIYVV) by their host range, immunosorbent electron microscopy (ISEM) and electron microscopy. Electron microscopic examination of negatively stained preparations showed that BBWV and CMV are spherical particles of 28 nm and 30 nm in diameter, and CIYVV is filamentous particles of ca. 780 nm in length. By ISEM, BBWV was detected mainly in gentian showing yellow ringspot and mottle, CIYVV in necrotic fleck leaf of gentian and CMV in narrow and distorted mosaic leaf of gentian. BBWV and CMV are the most prevalent in the cultivated gentian. In ultrathin sections of BBWV infected tissues, large aggregates of crystalline array of virus particles and vesicular body were found in the cytoplasm and vacuole of mesophyll cells. In case of CIYVV, pinwheel- and laminated aggregate-type inclusions as well as filamentous virus particles were observed in the cytoplasm of mesophyll cells.
Turnip mosaic potyviruses (TuMV) were isolated from Rorippa indica and Armoracia lapathifolia showing mosaic symptoms in field. Identification of the TuMVs were carried out by host reactions of indicator plants, electron micrograph, serological properties and reverse transcription-poly-merase chain reaction (RT-PCR). Both viruses systemically infected Chenopodium quinoa, Nicotiana clevelandii, Brassica rapa, B. campestris subsp. pekinensis, B. juncea and Raphanus sativus, and developed local infection on inoculated leaves of C. quinoa, C. amaranticola, C. album, N. tabacum cv. Xanthi nc and Gomphrena grobosa. However, the viruses did not infect on N. glutinosa, Cucumis sativus and Vigna unguiculata. The filamentous particles, about 720 nm in length, and inclusion bodies were observed from the infected leaf tissues by dipping on electron microscopy. Crude sap of leaf infected with the viruses was reacted positively with an antiserum of TuMV in agar gel double diffusion. For detection of the viruses, RT-PCR was carried out with TuMV--specfic oligonucleotide primer. The RT-PCR products, a 1,092 bp DNA fragment, were obtained from naturally infected leaves of R. indica and A. lapathifolia. In inoculation test to seven cruciferous weeds with TuMV, infection occurred in Arabis glabra, Barbarea orthoceras, Capsella bursa-pastoris, Draba nomorosa var. hebecarpa, Rorippa cantoniensis and Thlaspi arvense.
Park, Gug-Seoun;Kim, Jae-Hyun;Kim, Jeong-Soo;Park, Jang-Kyung
The Plant Pathology Journal
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제20권2호
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pp.131-134
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2004
A strain of Cucumber mosaic virus (CMV) was isolated from a weed, water chickweed (Stellaria aquatica), growing in the pepper field in Chunchon, Korea. This isolate, CMV-Sa, was differentiated from other CMVs based on biological properties and nucleotide sequence analysis of the coat protein (CP) gene. CMV-Sa showed different reactions to all the tested plants, except Capsicum annuum and Cucumis sativus, when compar-ed with those of CMV-Mf (subgroup I) and CMV-PaFM (subgroup II). Remarkably, in Nicotiana tabacum cvs. Samsun, Xanthi-nc and Ky-57, CMV-Sa induced local necrotic ring spots on the inoculated leaves and venal wave pattern and mosaic on the upper leaves. RNA analysis, serology, and RT-PCR of CP gene showed that CMV-Sa belonged to subgroup I of CMV. However, restriction enzyme analysis of the cDNA using AluI, HhaI, HincII, HindIII, HinfI and MspI showed that CMV-Sa was distinct from that of CMV-Mf. Based on comparison of the nucleotide of CP gene and deduced amino acid sequences between other CMV strains, CMV-Sa was closely related to CMV-Mf with 93.7% and 97.2 % identity, respectively.
Phan, Mi Sa Vo;Seo, Jang-Kyun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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제30권3호
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pp.316-322
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2014
Recently, a Cucumber mosaic virus (CMV) strain, named as CMV-209, was isolated from Glycine soja. In this study, symptom expression of CMV-209 was analyzed in detail in Nicotiana benthamiana by comparing with that of CMV-Fny, which is a representative strain of CMV. Using infectious cDNA clones of CMV strains 209 and Fny, symptom expression of various pseudorecombinants between these two strains were examined in the early and late infection stages. In the early infection stage, the pseudorecombinants containing Fny-RNA2 induced stunting and leaf distortion on the newly emerged leaves whereas the pseudorecombinants containing 209-RNA2 caused no obvious symptoms. In the late infection stage, the pseudorecombinants containing 209-RNA1 and Fny-RNA2 induced severe leaf distortion and stunting, while CMV-209 induced mild symptom and CMV-Fny caused typical mosaic, general stunting, and leaf distortion symptoms, indicating that RNA 2 encodes a symptom determinant(s) of CMV, which is capable of enhancing symptoms. Furthermore, our results support the possibility that natural recombination between compatible viruses can result in emergence of novel viruses causing severe damages in crop fields.
The severities of major tobacco diseases had been surveyed throughout northern Kyeongbuk, a major flue-cured tobacco growing district in Korea, in relation to the actual control method used by the farmers in 1992. At seedling stage, anthracnose caused by Colletotrichum nicotianae was major disease of the plant due to poor damage of the temporary transplanting pots. Mosaic caused by tobacco mosaic virus(TMV) was very severe in certain of greenhouses. Although viral disease caused by TMV, cucumber mosaic virus(CMV) and by potato virus Y(PVY) were severe in fields, but mosaic by TMV was major of the diseases. Potato virus Y was found later than that in Honam district. The late occurrence of the disease might be caused the difference between cultivating method of potato plants in northern Kyeongbuk and that in Honam district. In fields suffered from hail disaster, the damage of tobacco plants by angular leaf spot was severe. Most of tobacco growers had wrong information about the practical methods not only of milk treatment for the protection of the plants from TMV, but also of fungicide applications for the control of other major diseases. It suggested that education on the methods to the farmers must be very important for control of the diseases.
최근 각종 건설현장에서 최신측량기술을 이용한 다양한 정보 취득을 통해 시공성 및 안전성을 높이는 연구가 활발히 진행되고 있다. 디지털 영상은 영상 취득이 간편할 뿐만 아니라 영상으로부터 다양한 정보를 취득할 수 있기 때문에 최근 영상처리기술의 발전과 더불어 많은 활용성이 기대되고 있다. 본 연구에서는 터널과 같은 지하공간의 경우 일반렌즈로는 영상 촬영이 어려운 단점을 극복하기 위하여 어안렌즈를 활용한 영상 취득을 제안하였으며, 터널벽면을 모자이크 영상으로 매핑하는 프로그램을 개발하였다. 터널벽면에 대한 모자이크영상은 터널현장에서 절리면의 검출과 콘크리트 라이닝의 균열, 누수, 백화, 박리 등의 이상을 검측하고 분석하는데 활용될 수 있다.
본 연구에서는 모자이크 영상에 대하여 정량적인 품질평가지수에 대한 적용 가능성을 제시하였다. 우선, 영상 품질평가를 위해 접합영상의 접합선을 이용한 연속성 평가와 색상을 이용한 유사성(similarity) 및 대비(contrast)를 이용하여 품질평가지수를 산정하였다. 선정된 품질평가 항목을 기반으로 최종적인 품질평가지수를 산정하여 실험자에 의한 주관적 평가와의 비교, 검증을 수행하였다. 그 결과 정량적 품질평가지수가 주관적 평가지수와 유사한 결과를 나타냄으로써 제시한 영상 품질평가지수를 이용하여 제작된 모자이크 영상에 대한 정량적이고 객관적인 모자이크 영상의 품질평가가 가능하다는 것을 보여주었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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