Radiation technique has been used to develope mutant rice. Suwon 345 rice seeds were irradiated with 250 Gy gamma ray. Morphological characteristics of the variants in M$_{8}$ generation were observed and random amplified polymorphic DNA(RAPD) analysis was carried out. Plant height, panicle length, 1,000 grain weight and lodging were very different in mutants compared with donor cultivar. RAPD analysis showed that polymorphic bands were presented in several primers of the mutants. In comparison with original variety, variants were classified into four group through UPGMA analysis. A group has mutation trait in panicle length, B group in plant height and C group in 1,000 grain weight. Among mutants, no. 46 and 147 was ranked as salt tolerance and the malonaldehyde content of these mutants was more increased than that of original variety. Valuable mutants obtained will be useful for developing new cultivars and for studing gene function in molecular level.l.
The shade avoidance syndrome is a morphological and physiological response when plants are exposed to shade. Recent work in Arabidopsis had begun to define the molecular components of the shade avoidance syndrome in dicotyledonous model plant. However, little is known about the shade avoidance response networks in agriculturally important monocotyledon crops such as rice. Here, we found that the degree of bending at the lamina joint is inversely proportional to the R:FR ratio. To elucidate which phytochrome is involved in this response, we did lamina joint inclination assay with the rice phytochrome-deficient mutants (osphyA, osphyB, and osphyC) and the wild type plants. Whereas the osphyA and osphyC knockout mutants bent at the lamina joint in the far-red rich condition as the wild type plants, the osphyB knockout mutants no longer bent at the lamina joint in the far-red rich condition. These results suggest that PHYB acts as a sole photoreceptor in the lamina joint inclination response in rice.
Tobacco proembryos were irradiated with 100 Gy of heavy-ion beams($^{14}\textrm{N}$, $^{20}\textrm{Ne}$: 135 Mev/u) after 24 to 96 hours of pollination as a mutagen and screened $\textrm{M}_{1}$ generation for morphological mutants and salt-tolerant plants. Morphological and physiological characteristics of the salt-tolerant plants derived from the irradiated proembryo are discussed in this report. Mutants irradiated proembryos with the beams after pollination produced various kinds of morphological variation. A total of 17 salt-tolerant plants were selected from tobacco cultivar (BY-4) by treatment with $^{14}\textrm{N}$ beam. Shapes of filament and pollen grain of most salt-tolerant plants were abnormal compared with non-irradiated wild type, and seeds weight and fertility obviously decreased. The germination rates of the several $\textrm{M}_{2}$ lines on the saline and the mannitol condition were higher than that of wild type.
Recent identification and characterization of plant homeobox genes suggest that they play important roles in morphogenetic events. OSH1, one of the rice homeobox genes, is thought to be related to organ development since the changes of OSH1 gene expression cause morphological abnormalities of leaves by the ectopic expression and is expressed during early embryogenesis. In this experiment, the expression pattern of OSH1 was analyzedinmutants by in situ hybridization, and OSH1's potential as a molecular marker was explored. Region-specific expression of OSH1 during early embryogenesis shows that OSH1 could be used as a molecular marker for characterizing embryo mutants. Although several organless and shootless mutants showed normal expression of OSM1, some mutants exhibited abnormal expression patterns. In a minute organless cle1-1 embryo whose epidermis resembled morphologically the epithelium of scutellum, OSH1 expression was limited to a small basal region. This expression pattern suggests the gross deletion of the basal part. In a radicleless mutant, odm115, OSH1 expression was detected in a basal region instead of subcentral region of the ventral side. Together with other characteristics (short embryo and normal adventitious roots), odm115 was estimated to be derived from the deletion of basal region. Among five shootless mutants, three showed normal expression of OSH1. In the shl2 embryo, no expression of OSH1 was observed. In the shl1 embryo, however, OSH1 expression was extended to a dorsal side, indicating that SHL2 might be related to dorsoventral patterning. The above results of in situ hybrydization clearly indicate that OSH1 can be utilized as a marker for characterizing gene functions of embryo mutants.
An efficient screening method was developed for rapid selection of a few overproducers of itaconic acid (IA) among the great many mutants derived from mother strains of Aspergillus terreus. For this purpose, an attempt was made to reveal the relationships of the growth rate and sporulation of each mutant on PDA solid medium with its IA productivity in the final liquid production-culture. As a result, it was possible to classify the mutated strains into 5 groups (from [A] to [E] group) according to theirmorphologies (i.e., growth rate and sporulation extent) on the PDA slants. Notably, most of the high-yielding mutants of IA were observed to belong to [A]group which had the properties of the highest growth rate and sporulation among the 5 groups, whereas the mutant groups of [C], [D] and [E] with the contrasting morphological features showed significant reductions in their IA productivities. From these results, it was concluded that the probability of selecting IA overproducing mutants could be remarkably enhanced when the mutated colonies showing faster growth rates are firstly selected on the PDA plate, and then further screening process is performed on the basis of the sporulation extents of the mutants selected. Consequently, through the application of the strategy developed in this study, costs and time involvedin the labor-intensive task of strain improvement could be reduced to a great extent, because the time-consuming liquid culture processes did not need to performed for the unfavorable mutants belonging to the groups other than group [A].
To investigate the mutagenecity of sodium azide (SA) and to select mutants having various agronomic characteristics in rice (Oryza sativa L. ssp. japonica), dry seeds of rice variety 'Suweon 472' were treated with 0, 0.5, 1.0, 2.0, and 4.0 mM SA solutions prepared in 0.1 M phosphate buffer (pH 3.0). Germination rate, seedling height and sterility were investigated in $M_1$ generation and chlorophyll mutations were observed in $M_3$ generation. Germination rate and seedling height decreased as the increase of SA concentration in $M_1$ generation, the maximum seed sterility (40.8%) was found at 4.0 mM SA concentration. Chlorophyll mutants were occurred in $M_3$ generation and the frequency calculated on a line basis was 13.5% at the same treatment. Many kinds of mutations for morphological and agronomic characters were observed and mutations with short culm and glabrous leaf were frequently found in $M_3$ generation. Interestingly, five mutant lines resistant to blast or bacterial blight (BB) were selected and evaluated with several isolates in $M_3$ generation although Suweon 472 has been known to be susceptible to blast and BB. These mutants showed all resistance to seven isolates of blast and a total of 76 lines among 2,567 lines evaluated showed resistant to race K1 of bacterial blight. Two mutant lines (440172 and 41272) showed different reaction to BB isolates from the other resistant mutants. A few kinds of endosperm mutants were also identified and most of them were waxy mutants.
Full-length cDNAs are essential for the correct annotation of genomic sequences and for the functional analysis of genes and their products. To elucidate the functions of a large population of Chinese cabbage (Brassica rapa) genes and to search efficiently for agriculturally useful genes, we have been taking advantage of the full-length cDNA Over-eXpresser (FOX) gene hunting system. With oligo dT column it purify the each mRNA from the flower organs, leaf and stem tissue. And about 120,000 cDNAs from the library were transformed into $\lambda$-pFLCIII-F vector. Of which 115,000 cDNAs from the library were transformed into T-DNA binary vector, pBigs for transformation study. We used normalized full-length cDNA and introduced each cDNA into Arabidopsis by in planta transformation. Full-length Chinese cabbage cDNAs were expressed independently under the CaMV 35S promoter in Arabidopsis. Selfed seeds were harvested from transgenic Arabidopsis. We had selected 2,500 transgenic plants by hygromycin antibiotic tolerant test, and obtained a number of transgenic mutants. Each transgenic Arabidopsis was investigated in morphological changes, fertility and leaf colour. As a result, 285 possible morphological mutants were identified. Introduced cDNA was isolated by PCR amplification of the genomic DNA from the transgenic mutants. Sequencing result and BLAST analysis showed that most of the introduced cDNA were complete cDNAs and functional genes. Also, we examined the effect of Bromelain on enhancing resistance to soft rot in transgenic Chinese cabbage 'Osome'. The bromelain gene identified from FOX hunting system was transformed into Chinese cabbage using Agrobacterium methods. Transformants were screened by PCR, then RT-PCR and real time PCR were performed to analyze gene expression of cysteine protease in the T1 and T2 generations. The anti-bacterial activity of bromelain was tested in Chinese cabbages infected with soft rot bacteria. The results showed that the over-expressed bromelain gene from pineapple conferred enhanced resistance to soft rot in Chinese cabbage.
Candida albicans, the major human fungal pathogen, undergoes morphological transition from the budding yeast form to filamentous growth in response to nitrogen starvation. In this study, we identified a new function of GST2, whose expression was required for filamentous growth of C. albicans under nitrogen-limiting conditions. The Gst2p showed Gst activity and required response to oxidative stress. The ${\Delta}gst2$ mutant displayed predominantly yeast phase growth in low ammonium media. Such morphological defect of ${\Delta}gst2$ mutants was not rescued by overexpression of Mep2p, Cph1p, or Efg1p, but was rescued by either overexpression of a hyperactive $RAS1^{G13V}$ allele or through exogenous addition of cyclic AMP. In addition, the ${\Delta}gst2$ mutants had lower levels of RAS1 transcripts than wild-type cells under conditions of nitrogen starvation. These results were consistent with the Ras1-cAMP pathway as a possible downstream target of Gst2p. These findings suggest that Gst2p is a significant component of nitrogen starvation-induced filamentation in C. albicans.
The aim of this study was to investigate the regulation of lantipeptide production in Streptomyces globisporus SP6C4, which produces the novel antifungal lantipeptides conprimycin and grisin, and to identify the role of cytochrome P450 (P450) in tis regulation. To investigate the regulation of lantipeptide production, we created gene deletion mutants, including ΔP450, ΔtsrD, ΔlanM, ΔP450ΔtsrD, and ΔP450ΔlanM. These mutants were characterized in terms of their morphology, sporulation, attachment, and antifungal activity against Fusarium oxysporum. The gene deletion mutants showed distinct characteristics compared to the wild-type strain. Among them, the ΔP450ΔlanM double mutant exhibited a recovery of antifungal activity against F. oxysporum, indicating that P450 plays a significant role in regulating lantipeptide production in S. globisporus SP6C4. Our findings highlight the significant role of P450 in the regulation of lantipeptide production and morphological processes in S. globisporus. The results suggest a potential link between P450-mediated metabolic pathways and the regulation of growth and secondary metabolism in SP6C4, thereby highlighting P450 as a putative target for the development of new antifungal agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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