• 한국임상수의학회지
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• 제14권2호
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• pp.230-234
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• 1997

In vitro effect of cortisol on the proliferation of canine peripheral blood mononuclear cells (MNC) was examined. The MNC was isolated from peripheral blood by a gradient centrifugation with Picoll-Hypaque. The cell proliferation assayed using a noneradioactive 5-Bromo-2'-deoxy-uridine (BrdU) kit. The MNC proliferated well in response to either phrtobeRagg$]$utinin-p (PHA-P) or culture supernatant from MNC stimulated with PHA-p. However, these proliferative responses of MNC were not affected by addition of coitisol of 1 to 1,OOfl ng/ml. The addition of cortisol in MNC culture with either PHA-P or corture supernatBnt from MNC stimulated with PHA-P far 4 days wag not also influenced on the viabilities of cultured MNC. In conclusions it was able to assay the cell proliferation with BrdU instead of radioactive isotope e.g. tritiated thymidine (3H-TdR). These results suggested that cortisol does not at least influence on MNC proliferation in vitro.

• 한국임상수의학회지
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• 제15권1호
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• pp.110-115
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• 1998

인삼 PD saponin(GPD)으로 배양한 고양이 말초혈액 단핵구세포(afNC) 배양상충 액에서 말초혈액 다형핵백혈구(PMNC)에 대한 interleukin(IL) 8 양 유주활성에 잔하여 검토 하였다. PMNC의 유주활성은 Hoyden chamber 변법으로 측정하였다. GPD를 첨가하여 배양 한 MNC배양상층액중에는 rMNC에 대한유주활성이 인정되었다. PMNC에 대하여 GPD 로 배양한 MNC 배양상층액중에 존재하는 유주활성이 IL 8 양 물질인지를 알아보기 위해 human recombinant IL 8을 이용하여 고양이 PMNC에 대해 유주팔성을 측정한 결과, GPD 로 배양한 MNC 배양상층액의 경우와 동등한 활성이 나타났다. Human IL 8 mAb를 사용하 여 GPD로 배양한 MNC 배양상층액중의 유주활성에 대한 중화반응을 살펴본 결과, GPD로 배양잔 MNC 배양상충액 및 human IL 8에 의해 증가되었던 PMNC의 유주활성은 IL 8 cAb의 첨가농토가 증가함에 따라 활성이 완전히 억제되었다. 또한 GPD로 배양한 고양이 MNC 배양상충액중의 유주활성은 열처리(4, 30, 37, 60 및 $100{\circ}C$) 및 산(pH 3.0)과 알카리 (pH 9.0)처리에도 안정성을 보여 human IL 8의 물리화학적 성상과 매우 유사하였다. 따라서 GPD로 배양한 MNC 배양상충액중에 존재하는 고양이 PMNC에 대한 유주활성은 feline IL 8 양 물질임을 강하게 시사하였다.

• 한국임상수의학회지
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• 제16권1호
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• pp.31-36
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• 1999

The aim of this study is to determine the phagocytosis-promoting factor(s) for feline peripheral blood polymorphonuclear cells (PMN) by culture supernatant from mono-nuclear cells (MNC) treated with egg white derivatives (EWD). The phagocytic activity of PMN was analyzed by a flow cytometry system. The EWD did not show direct effect on the phagocytic response of PMN. The phagocytic activity of PMN was enhanced by culture supernatant from MNC but not PMN treated with EWD. Therefore, it was suggested that the enhanced phagocytic activity of feline PMN could be mediated by humoral factor(s) released from MNC treated with EWD. Thus, the phagocytosis-promoting factor(s) in supernatant fraction from MNC culture treated with EWD were isolated by reverse phase high pressure liquid chromatography. The resulting supernatant fraction on 29.02 minutes of retention time showed high phagocytic activity of PMN. The molecular weight of this supernatant fraction was 16 to 18 kDa when analyzed by capillary electrophoresis. The isoelectric point was pH 5.76 when assessed by ion-exchange chromatography. These results suggest that EWD stimulates feline MNC to elaborate a phagocytosis-promoting factor, 16 to 18 kDa of molecular weight, which could be an important mediator for the enhancement of phagocytic activity of feline peripheral blood phagocytes. Further study will be needed to elucidate this phagocytic factor.

• 대한수의학회지
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• 제40권2호
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• pp.393-401
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• 2000

계난백유래물질(EWD)로 배양한 고양이 말초혈액 단핵구세포(MNC)의 배양상충액에서 다형핵백혈구(PMN)에 대한 유주성인자를 조사하였다. EWD로 배양한 MNC 배양상층액과 human recombinant (hr) interleukin (IL-8)는 고양이 PMN의 유주성을 현저하게 증가시켰다. 이 유주활성물질을 규명하기 위해 EWD 처리 MNC 배양상충액을 gel electro-phoresis(denaturing 조건 18% loading gel 및 nondenaturing 조건 12.5% loading gel)를 실시한 결과, EWD로 배양한 MNC 배양상충액과 hr IL-8는 모두 분자량 6~8kDa에서 band를 나타내었다. Denaturing 조건에서 6~8kDa band의 gel slices에서 용출시킨 용출액에서도 고양이 PMN의 유주활성이 인정되었다. EWD로 배양한 MNC 배양상층액, hr IL-8 및 용출액에 의한 유도된 고양이 PMN의 유주활성은 rabbit anti-feline polyclonal IgG(RAF pIgG)와 hr IL-8에 대한 mAb에 의해 농도의존적으로 억제되었다. 또한 RAF pIgG는 hr IL-8와 결합을 보임으로써 사람의 IL-8와 교차반응을 시사하였다. 이상의 결과로부터 EWD로 배양한 고양이 MNC는 분자량 6~8kDa의 IL-8 양(樣) 유주성인자를 분비하여 PMN의 유주성을 유도하는 것으로 사료되었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제16권1호
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• pp.37-41
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• 1999

The immunostimulating effects of egg white derivatives (EWD) on the phagocytic response of feline peripheral blood polymorphonuclear cells (PMN) as well as mono- nuclear cells (MNC) were examined. The phagocytic activity was analyzed by a flow cytometry system. The EWD showed directly an enhanced effect on the phagocytic response of MNC but not PMN. The phagocytic activity of MNC was enhanced by culture supernatant from MNC and PMN treated with EWD, respectively. Similarly, the phagocytic activity of PMN was enhanced by culture supernatant from MNC but not PMN treated with EWD. It was, therefore, indicated that the enhanced phagocytic activity of feline PMN could be mainly mediated by humoral factor(s) released from MNC treated with EWD. These results suggested that EWD could enhance the phagocytosis of feline peripheral blood phagocytes.

• 한국임상수의학회지
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• 제15권1호
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• pp.116-123
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• 1998

고양이 말초혈액 탐식세포(단핵구세포(MNC) 및 다형핵백혈구(PMNC))의 탐식능 에 있어서 인삼 saponin(ginseng total saponin(G75), ginseng PT saponin(GPT) 및 ginseng PD saponin(GPD))의 면역증강 효과를 flow cytometry를 이용하여 분석하였다. 인삼 ssponins을 직접 첨가하여 배양한 MNC 및 PMNC에서는 탐식중강 효과가 나타나지 않았다. 각각의 인삼 saponin을 첨가하여 배양한 PMNC 및 MNC 배양상충액의 존재하에 PMNC 및 MNC의 탐식능을 겅토한 결과, MNC의 탐식능은 Gff 첨가 PMNC 배양상충액과 GTS 및 GPT 첨가 MNC 배양상충액의 존재하에서 약간의 탐식증강 효과를 보였다. PMNC 탐식능의 경우에는 GPD 첨가 PMNC 배양상충액에서 미약한 탐식증강 효과가 나타났으나, 각각의 인 삼 saponin 첨가 MNC 배양상충액 존재하에서는 모두 현저한 탐식중강 효과를 나타내었다. 이상의 결과로부터 고양이 말초혈액 탐식세포의 탐식증강 효과는 인삼 saponin의 직접적인 작용보다는 인삼 saponin에 의해 활성화된 단핵구세포에서 분비되는 가용성물질에 의해 단 핵구세포보다는 다형핵백혈구에서 현저하게 탐식효과가 증강되는 것으로 판단되었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제20권1호
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• pp.1-6
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• 2003

돼지 말초혈액 다형핵 백혈구(polymorphonuclear cell; PMN)의 유주성에 있어서 conjugated linoleic acid(CLA) 이성체(CLA mixture, 10t-12c CLA, 9c-11t CLA, 9c-11c CLA 및 9t-11t CLA)의 면역증강 효과를 검토하였다. PMN에 대한 유주성은 Boyden chamber 변법으로 측정하였다. CLA 이성체들을 고농도(50∼200μM)로 사용하였을 경우 말초혈액 단핵구 세포(mononuclear cell; MNC) 및 PMN의 cell viability가 감소되거나 세포가 사멸하였다. 따라서 cell viability가 높고 세포독성을 나타내지 않는 20μM 농도로 유주활성 실험을 하였다. CLA 이성체들은 돼지 말초혈액 PMN의 유주활성에 직접적인 효과는 없었다. CLA 이성체로 배양한 MNC의 배양상층액 중 CLA mixture, 10t-12c CLA 및 9c-11t CLA 처리군에서는 PMN의 유주활성이 현저하게 증강되었으나 9c-11c CLA 및 9t-11t CLA로 배양한 MNC 배양상층액에서는 PMN의 유주활성이 나타나지 않았다. 이러한 유주성 증강효과는 checkerboard assay를 실시한 결과 진성의 유주활성이었다. 유주성 인자인 porcine recombinant (pr) interleukin(IL)-8을 이용하여 돼지 PMN에 대한 유주성을 검토한 결과, pr IL-8에 의한 PMN의 유주활성은 CLA로 배양한 MNC 배양상층액에 의한 것과 동등한 활성을 보였다. 또한 CLA로 배양한 MNC 배양상층액의 PMN에 대한 유주성을 anti-pr IL-8pAb를 사용하여 중화반응을 실시한 결과, CLA mixture로 배양한 MNC 배양상층액에 의해 증가된 PMN의 유주활성은 anti-pr IL-8 pAb 첨가에 의해 억제되어, 본 유주활성은 MNC에서 분비되는 IL-8으로 인한 것임을 강하게 시사하였다. 이상의 결과로부터 CLA 중 CLA mixture, 10t-12c CLA 및 9c-11t CLA 이성체가 돼지 말초혈액 다형핵 백혈구의 유주활성에 증강효과를 가지고 있으며, 이러한 증강효과는 CLA로 자극된 MNC에 의해 생성되는 IL-8 인자에 의한 것임을 알 수 있었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제15권1호
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• pp.104-109
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• 1998

고양이 말초혈액 다형핵백혈구(PMNC)의 유주성에 있어서 인삼 saponins(ginseng total ssponin(GTS), ginseng PT saponin(GfT) 및 ginseng PD saponin(GPD))의 면역증강 효과를 검토하였다. PMNC에 대한 유주성을 hoyden chamber 변법으로 측정한 결과, GTS, GPT, GPD는 PMNC에 대해 직접적인 유주활성을 나타내지 않았다. 또한 인삼 saponins을 첨가하여 배양한 PMNC 배양상충액의 경우게는 미약한 유주활성을 나타내었다. 그러나 GPf및 GPD를 첨가하여 배양한 말초혈액 단핵구세포(MNC)배양상충액에서는 PMNC의 유주활성이 현저하게 증가하였다. PMNC에 대해 유주활성이 인정된 GPI)로 배양한 MNC 배양상충액을 이용하여 checkerboard assay를 실시한 결과 배양상충액의 농도차에 의존하는 진의 유주활성임을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 인삼 saponine 중 GPT 및 GPD가 고양 이 말초혈액 다형핵백혈구의 유주성을 중강시키는 효과가 있으며, 이것은 이들 saponins에 의해 활성화된 단핵구세포에서 분비되는 유주성인자에 의해 다형핵백혈구의 유주활성이 증 강되는 것으로 사료되었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제20권4호
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• pp.437-442
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• 2003

CLA를 급여시킨 돼지에 있어 말초 혈액 세포의 변화와 탐식세포의 탐식반응을 조사하였다. 100일령, 평균체 중 80kg인 거세 수퇘지에게 10t-l2c CLA와 CLA mixture를 각각 사료 중에 5% 첨가하여 총 4주간에 걸쳐 자유급여 시켰다. 급여 전 (0주), 급여 2주후, 4주후 그리고 급여 중지 후인 5주차에 각각 혈액세포 수치(PCV 백혈구수 및 백혈구 감별계산치)의 변화와 탐식세포의 탐식활성을 측정하였다. CLA의 급여 따른 PCV의 수치에 있어서는 아무런 변화가 없었다. 그러나 10t-l2c CLA 또는 CLA mixture가 함유된 사료를 급여한 돼지에 있어서 CLA를 급여하지 않은 돼지에 비해 백혈구수 특히 호중구 수가 현저히 증가하였다. 말초혈액 단핵구세포(mononuclear cells; MNC)와 다형핵백혈구(polymorphonuclear cells; PMN)의 탐식능를 유세포분석기로 분석한 결과, 10t-l2c CLA 또는 CLA mixture 급여와 상관없이 MNC와 단구세포들(monocyte-rich cells)의 탐식능에는 변화가 없었다. 그러나 PMN의 탐식 활성은 CLA 무급여 대조돼지들에 비해 CLA 급여군은 2주에서 5주차에 걸쳐 증가된 탐식능를 나타내었다. 이상의 결과로부터 돼지에 CLA 급여는 호중구수 증가와 호중구 탐식능 증가를 유도할 수 있음을 제시하였으며 향후 생체방어 증강을 위해 CLA를 임상적으로 투여할 수 있을 것으로 보인다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2003년도 생물공학의 동향(XII)
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• pp.95-97
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• 2003

본 연구에서는 손상된 심근의 재생을 위하여 골수단핵세포를 SD 래트에 이식하였고 5주 후에 심근의 재생, 신생혈관의 형성과 더불어 심장의 기능이 향상되었음을 확인할 수 있었다. 골수단핵세포를 손상된 심근경색 부위에 넣어주는 것은 추가 보완 실험을 통하여 심근경색의 치료법으로서 이용될 수 있을 것이다.