An experiment was conducted to investigate types of injury inflicted by the stone leek leafminer, Liriomyza chinensis Kato (Diptera: Agromyzidae) on welsh onion. A feeding scar made by an adult female was a hole round in shape, with diameter of 0.08 mm and 0.48 mm in lesion, resulting in a white spot, many of which often form vertical dotted lines on a leaf. Egg spots were oval with 0.1 ${\times}$0.14 mm in size, one or several of which often form a V-shape in group. Feeding by adults began immediately after emergence and was very active from 4th to 5th day. Oviposition was done from 2nd to 6th day after emergence. In both feeding and oviposition, they were more active in the day time. Larvae after emergence crawled up the leaf at first, and then moved up and down to feed on mesophyll. When in high density, they feed on leaf from leaf tip to bottom, and let the leaf die. Area of damage per one larva was calculated as 72.1 $\textrm{mm}^2$. The aged larvae escaped from the leaf in early morning, usually between 5 and 7 am. Most pupation sites were distributed near plants,5cm in soil depth and within 10 cm away from the plant. Pupae of L. chinensis overwintered 10cm below soil surface and emerged from early May to late June the next year Adults then moved to welsh onions near over wintering sites, nursery, transplanted, and levee.
This paper deals with the studies on the occurence of a new virus disease of sesame and the identification of the causal virus. The virus disease of sesame has been regarded as a widespread disease in the sesame-growing areas in the southern part of Korea. The disease was found to be caused by watermelon mosaic virus (WMV). During the years since 1978, stunting of sesame plants, with yellow mosaic, necrotic spot, and malformation, were collected from 17 different places. Virus isolates from 27 out of 32 samples were identified as WMV. Natural infection of squash, pumpkin, cucumber, and watermelon by WMV as well as sesame was proved. The virus is inactivated at temperatures of 55 to $60^{\circ}C$, at dilution of $10^{-3}\;to\;10^{-4}$, and in the aging of 10 to 14 days at about $20^{\circ}C$. Sesame, Chenopodium amaranticelor, pea, bean, as well as many plants of the Cucurbitaceae, are susceptible to the sesame-isolates of WMV. In negatively stained preparations, particles of the virus appear under the electron microscope as flexible filaments of about $750\~800nm$ in length. Cylindrical inclusions and virus particles were found in the cytoplasm of mesophyll cells by ultra-thin sections of WMV infected tissues.
A virus named Cymbidium mild mosaic virus(Cy MMV), was mechanically transmitted to Chenopodium amaranticolor from the leaves of Cymbidium with mild mosaic symptoms. The virus was cultured in C. amaranticolor, in which it produced local chlorotic and ring spots, followed by systemic vein clearing with distortion. CyMMV infected 7 out of 35 species of plants. In C. amaranticolor juice infectivity was lost by heating at $90^{\circ}C$ for 10 miuntes, and by aging at$20^{\circ}C$ for 60 days, and by diluting at $10^{-6}$ when bioassayed on C. amaranticolor. CyMMV was not transmitted by Myzus persicae. The virus was purified after clarification of homogenized C. amaranticolor leaf tissues with chloroform, by differential centrifugation followed by sucrose density gradient centrifugation. Electron microscopic examination of purified preparation showed spherical particles of 28nm in diameter. The UV absorption spectrum of purified preparation was typical of u nucleoprotein (max. at 261nm. min. at 243nm), and showed 260/280=1.72 and max/min=1.26. The value of the sedimentation coefficient of the virus was S20.w=126. In gel-diffusion tests, CyMMV antiserum reacted with CarMV, but not with any of four other viruses (BBWV, CRSV, CMV, TBRV) having similar particles and properties in vitro. In ultra-thin sections of CyMMV infected tissues, a large number of virus particles were found in the cytoplasm of mesophyll cells and in xylem vessels.
Protoplasts were isolated from cotyledons, hypocotyls, and mesophyll tissues of three species of Capsicum species (C. anuumm, C. bacatuum, and C. chacoense). Combination of Cellulysin (1%) and Macero-zyme (0.25%) in 0.65 M sorbitol was found to be the most effective for the digestion of cell wall, regardless of the Capsicum species. Antioxidant MES (2-[N-Morpholino]ethanesulfonic acid) in the enzyme solution helped protoplasts overcome browning. After 5 days of initial culture, Cell division occurred in modified K8p medium containing 1~5 mg/L zeatin, 0.5 mg/L IAA, 0.1~0.5 mg/L TDZ, and 1 mg/L 2,4-D under continuous dark condition at $25^{\circ}C$. Semi-solid agarose culture method was more effective than liquid culture, and it also protected the cells from browning caused by polyphenolic compound released during protoplast culture. A total of 4000 calli were obtained from protoplast culture of different capsicum species. All of these calli were transferred to the 100 combinations of regeneration media using various plant growth regulators; TDZ, IAA, 2ip, BAP, NAA, and zeatin. These calli derived from protoplast of three species of capsicum were, however, not differentiated into shoots.
To select $SO_2$-resistant tree species, leaf disks of 6mm in diameter, cut from the leaves of 6 species (Wistaria floribunda, Magnolia obovata, Rosa multiflora, Liriodendron tulipifera, Robinia pseudo-acacia and Acer palmatum) were floated on 25ml of testing medium and placed on laboratory under fluorescent lamp (1,500 Lux) for 20 hours. Chlorophyll content and acidity of the testing medium were measured. Testing medium was prepared by diluting $H_2SO_4$, $H_2SO_3$ and $Na_2SO_4$ with distilled water for various stoichiometric $SO_2$ concentrations, 0, 25, 50, 100 and 250 ppm. Total chlorophyll content was more decreased after treatment than before treatment, and was decreased more severely in $H_2SO_3$ sources, followed by $H_2SO_4$ and $Na_2SO_4$, sources. Decreasing rate of total chlorophyll content was generally large in Acer palmatum. Magnolia obovata and Wistaria floribunda, and was relatively small in Rosa multiflora, Liriodendron tulipifera and Robinia pseudo-acacia. Decreasing rate of chlorophyll content may be useful index for judging susceptifility of the leaf to $SO_2$. The acidity of the testing medium was generally decreased after treatment, and it means that cell leakage was occurred during treatment. The differences in medium acidity between before and after treatment may be poot index for susceptibility of the leaf to $SO_2$ owing to the difference among tree species in development of leaf mesophyll, acidity maintaining mechanism and butter capacity of the leaf tissue.
The leaf mesophyll protoplasts of Populus alba ${\times}$ glandulosa were isolated from leaf of plantlet in vitro and cultured for plant regeneration. The MS medium (minus $NH_4NO_3$) with 0.5 mg/l BAP and 2.0 mg/l 2, 4-D showed the moderate frequency of dividing protoplasts cultured by the liquid plating method during the first week of culture. The percentage of colony formation was revealed the highest frequency by the gauze contained semi-solid agar plating method after 5 weeks cultured. Ridding out the gauze, the micro-callus was formed on the same semi-solid medium in 8 weeks after protoplasts culture. For proliferation of callus, mini-callus was transferred on the MS solid medium with 0.5 mg/l 2, 4-D and 0.1 mg/l BAP 12 weeks after culture. Shoot regeneration occurred when the calli derived from protoplasts were cultured on MS medium with 1.0 mg/l zeatin and such shoots could be readily rooted on the one half strengthen MS medium with non-phytohormone. Rooting shoots were planted in green-house 22 weeks after protoplast culture.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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1995.06b
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pp.27-53
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1995
In plant pathology there is an increasing necessity for improved cytological techniques as basis for the localization of cellular substances within the dynamic fine structure of the host-(plant)-pathogen-interaction. Low temperature (LT) preparation techniques (shock freezing, freeze substitution, LT embedding) are now successfully applied in plant pathology. They are regarded as important tools to stabilize the dynamic plant-pathogen-interaction as it exists under physiological conditions. - The main advantage of LT techniques versus conventional chemical fixation is seen in the maintenance of the hydration shell of molecules and macromolecular structures. This results in an improved fine structural preservation and in a superior retention of the antigenicity of proteins. - A well defined ultrastructure of small, fungal organisms and large biological samples such as plant material and as well as the plant-pathogen (fungus) infection sites are presented. The mesophyll tissue of Arabidopsis thaliana is characterized by homogeneously structured cytoplasm closely attached to the cell wall. From analyses of the compatible interaction between Erysiphe graminis f. sp. hordei on barley (Hordeum vulgare), various steps in the infection sequence can be identified. Infection sites of powdery mildew on primary leaves of barley are analysed with regard to the fine structural preservation of the haustoria. The presentation s focussed on the ultrastructure of the extrahaustorial matrix and the extrahaustorial membrane. - The integration of improved cellular preservation with a molecular analysis of the infected host cell is achieved by the application of secondary probing techniques, i.e. immunocytochemistry. Recent data on the characterization of freeze substituted powdery mildew and urst infected plant tissue by immunogold methodology are described with special emphasis on the localization of THRGP-like (threonine-hydrxyproline-rich glycoprotein) epitopes. Infection sites of powdery mildew on barley, stem rust as well as leaf rust (Puccinia recondita) on primary leaves of wheat were probed with a polyclonal antiserum to maize THRGP. Cross-reactivity with the anti-THRGP antiserum was observed over the extrahaustorial matrix of the both compatible and incompatible plant-pathogen interactions. The highly localized accumulation of THRGP-like epitopes at the extrahaustorial host-pathogen interface suggests the involvement of structural, interfacial proteins during the infection of monocotyledonous plants by obligate, biotrophic fungi.
This experiment was carried out to find the growth response and changes of nitrate and soluble sugar content in tomato leaves with salt stress. Tomato (Solanum lycopericum) seedlings were grown under different electrical conductivity (EC) levels adjusted with $CaCl_2$ as 1, 2, and $6dS\;m^{-1}$. The growth response and contents of nitrate and soluble sugar in tomato plants were examined at 7 and 14 days after salt treatment. Leaf area and dry weight ratio of shoot to root of tomato plants were decreased as EC level increased. Photosynthetic rate of leaves was reduced under high EC level due to the stomatal closure and the reduction of transpiration rate. The soluble sugar and starch content were lower in the tomato leaves grown under high EC level. Total nitrogen and nitrate contents were decreased in high EC level, whereas the ammonium content was increased. High-salt stress induced the accumulation of salt crystal in mesophyll cells of tomato leaf.
This study was conducted to investigate the anatomical and ultrastructural responses of the oxyfluorfen-tolerant and -susceptible rice cultivars with barnyardgrass, a typical susceptible weed by oxyfluorfen and the herbicides having similar mode of action treatment. After the treatment of $10^{-5}M$ oxyfluorfen, the tolerant rice cultivars no showed the structural damage of leaf surface, but the susceptible rice cultivate was damaged in the wax and the susceptible barnyardgrass was even destroyed in the tissue irregularly. Also in the susceptible rice cultivars and barnyardgrass the thickness of leaf blade was greatly decreased. The anatomical change was not observed in the tolerant rice cultivars but epidermal cells, mesophyll cells and bundle sheath cells were badly broken in the susceptible rice cultivars and barnyardgrass and especially after 24 hours of the treatment the structure of susceptible rice cultivars was completely disintegrated. The irregularity of chloroplast shape and the distortion of chloroplast envelope were generally observed and the starch tended to decrease by oxyfluorfen treatment regardless of rice cultivars. Such a structural damage were appeared more badly in the susceptible rice cultivars and bamyardgrass than in the tolerant rice cultivars. By the treatment of diphenyl ether herbicides, the thickness of leaf blade greatly reduced in the order of oxyfluorfen > acifluorfen > bifenox > oxadiazon, and the susceptible rice cultivars showed more reduction than the tolerant rice cultivars. Especially, the susceptible rice cultivars showed that the leaf structure was badly broken down with damage epidermal cells and bundle sheath cells.
Factors affecting isolation and fusion of protoplasts of three Quercus species were investigated and procedures for isolation, purification and fusion of protoplasts of the three species were also established. Unhardened leaves and rapidly growing callus cultures were good source of viable protoplasts. The optimum composition of enzyme mixture for rapid isolation of protoplasts from leaf mesophyll tissues and calli was Cellulase Onozuka R-10 (20g/l, Macerozyme R-10(10g/l), Pectinase(250 units/l, $CaCl_2$, $2H_2O$(14mM), $MgSO_4{\cdot}7H_2O$(1.8mM), $KNO_3$(1.0mM), $H_3BO_3$(1.0mM), $KH_2PO_4$(0.2mM), KI($1.0{\mu}M$), 1,4-dithiothreitol (0.1mM) and mannitol (0.6M). Optimum density of protoplasts for maximum fusion was $2{\times}10^5/ml$ which was the highest protoplast density given in this study. Optimum concentration and duration of PEG 1450 treatment for inducing fusion appeared to be 29%(W/V) final PEG 1450 concentration and 5-10 minutes, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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