Abstract
The leaf mesophyll protoplasts of Populus alba ${\times}$ glandulosa were isolated from leaf of plantlet in vitro and cultured for plant regeneration. The MS medium (minus $NH_4NO_3$) with 0.5 mg/l BAP and 2.0 mg/l 2, 4-D showed the moderate frequency of dividing protoplasts cultured by the liquid plating method during the first week of culture. The percentage of colony formation was revealed the highest frequency by the gauze contained semi-solid agar plating method after 5 weeks cultured. Ridding out the gauze, the micro-callus was formed on the same semi-solid medium in 8 weeks after protoplasts culture. For proliferation of callus, mini-callus was transferred on the MS solid medium with 0.5 mg/l 2, 4-D and 0.1 mg/l BAP 12 weeks after culture. Shoot regeneration occurred when the calli derived from protoplasts were cultured on MS medium with 1.0 mg/l zeatin and such shoots could be readily rooted on the one half strengthen MS medium with non-phytohormone. Rooting shoots were planted in green-house 22 weeks after protoplast culture.
현사시(Populus alba ${\times}$ glandulosa) 기내배양(器內培養)한 엽육조직(葉肉組織)에서 원형질체(原形質體)를 분리(分離), 배양(培養)하여 식물체(植物體) 재분화(再分化) 과정(過程)에 관(關)해 조사(調査) 검토(檢討)하였다. $NH_4NO_3$를 뺀 MS배지(培地)에 BAP 0.5mg/l와 2.4-D 2.0mg/l를 첨가(添加)하여 liquid plating 법(法)으로 원형질체(原形質體)를 배양(培養)하였을때 비교적(比較的) 높은 세포분열(細胞分裂)이 일어났다. colony 형성율(形成率)은 gauze를 넣은 semi-solid agar plating 법(法)에서 가장 높게 일어나서 배양(培養) 5주후(週後)에는 micro-callus가 형성(形成)되었다. gauze를 제거(除去)한 후(後)에는 원형질체(原形質體) 분리배양후(分離培養後) 8주(週)가 되었을때 mini-callus가 형성(形成)되었으며 이들 callus는 2, 4-D 0.5mg/l와 BAP 0.1mg/l를 첨가(添加)한 MS배지에서 증식되었다. shoot 형성(形成)은 zeatin 1.0mg/l를 첨가(添加)한 배지에서 이식한지 3주(週)만에 일어나기 시작했으며 6주후(週後)에 뿌리발달을 도모하고져 생장조절물질(生長調節物質)이 첨가(添加)되지 않은 1/2MS배지로 이식하였다. 이식한지 4주후(週後)에 많은 뿌리가 형성(形成)되었다. 발근(發根)이 된 개체(個體)는 온실(温室)에 이식(移植)하였는데 원형질체(原形質體)를 분리(分離)하여 완전식물체(完全植物體)로 분화(分化)시켜 온실(温室)에 이식(移植)하기 까지는 22주(週)가 걸렸다.
(College of Agriculture, Kyungpook National University)
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