The purpose of this study was to determine the effects of bisphenol A (BPA), which is known to have estrogenic activity, on the early development of medaka fish (Oryzias latipes). The fertilized eggs of medaka were treated with BPA at different concentrations for 3 weeks. Embryonic growth, deformation, hatching success, and gonadal differentiation were determined to observe the effects of this chemical. Also we tried to measure the estrogenic activity of bisphenol A using ELISA and RT-PCR methods. By using this techniques, we evaluated the induction of vitellogenin, an estrogen-regulated gene from the whole body-homogenates of larvae. At results, a reduced blood circulation was seen in embryos and peritoneal edema and hindrance of yolk-sac absorption were observed in larvae of treated group. However, BPA at the concentrations tested (2~200 ㎍/L) did not have severe adverse effects on the early life-stages. According to the observation of gonadal histology, inter-sex or sex -reversal was not found in all test fish. After the exposure was ended, vitellogenin mRNA and protein levels were measured in larvae and then their levels were found to be increased in treated group with 200㎍/L. These results indicate that BPA can induce the expression of vitellogenin in early life-stages as well as in adult male fish.
내분비계장애물질에 대한 검색기법의 하나로 수컷 어류의 교배행위 및 생식력에 대한 in vivo 연구를 시도하였다. 수컷 송사리(Oryzias latipes)에 대표적 에스트로젠인 17$\beta$-estradiol를 2 및 20 $\mu\textrm{g}$/L의 농도로 각 노출군당 5마리씩 14일간 노출시킨 후 각 군당 임의로 2마리씩 선택하여 Prostaglandin F2$\alpha$를 주사한 3마리의 정상 암컷 송사리와의 교배행위를 비디오 카메라를 이용하여 1시간 동안 녹화하여 분석하였다. (중략)
해양생태독성평가를 위한 표준시험방법 개발을 위하여 해양생태계의 대표 소비자인 어류를 이용한 시험방법을 정립하였다. 표준시험생물은 송사리(Oryzias latipes)와 넙치(Paralichthys olivaceus)를 선정하였으며, endpoint는 7일 자어 사망률(7 day-$LC_{50}$)로 설정하였다. 표준시험방법은 미환경보호국(USEPA, 1994)의 어류독성시험법을 참고하였으나, 시험생물은 생태적 대표성 및 종의 유용성 등을 고려하여 재설정하였다. 송사리는 실험실 사육이 가능하고 광염성이며, 넙치는 국내 연안 생태계의 대표 어류이자 상업용 종묘 생산 시설을 통하여 연중 시험생물 확보가 가능한 점을 고려하여 선정하였다. 염분 내성 및 표준물질독성실험결과, 송사리는 $0{\sim}35\;psu$ 구간에서 전개체가 생존하였으며, 넙치는 염분이 20 psu 이상에서만 실험이 가능하였다. 독성시험기간은 7일이며, 시험구내의 용존산소가 4mg/L 이상을 유지하는 한 시험용액의 교환없이 수행하는 비교환정수방식을 택하였다. 시험생물의 연령은 부화 후 초기 사망률과 시험시 취급이 용이한 크기로 선정하였으며, 송사리의 경우 부화 후 7일(전장 약 5 mm), 넙치의 경우 25일(전장 약 10 mm)로 선정하였다. 시험적합도 기준은 대조구에서의 생존율이 80% 이상으로 설정하였으며, 표준독성물질에 의한 민감도를 어류 독성 시험시 동일한 방법을 이용한 결과를 제시하도록 하였다.
International Journal of Fuzzy Logic and Intelligent Systems
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제7권1호
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pp.58-65
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2007
Behavioral sequences of the medaka (Oryzias latipes) were continuously investigated through an automatic image recognition system in response to medaka treated with the insecticide and medaka not treated with the insecticide, diazinon (0.1 mg/l) during a 1 hour period. The observation of behavior through the movement tracking program showed many patterns of the medaka. After much observation, behavioral patterns were divided into four basic patterns: active-smooth, active-shaking, inactive-smooth, and inactive-shaking. The "smooth" and "shaking" patterns were shown as normal movement behavior. However, the "shaking" pattern was more frequently observed than the "smooth" pattern in medaka specimens that were treated with insecticide. Each pattern was classified using classification methods after the feature choice. It provides a natural way to incorporate prior knowledge from human experts in fish behavior and contains the information in a logical expression tree. The main focus of this study was. to determine whether the decision tree could be useful for interpreting and classifying behavior patterns of the medaka.
우리나라에서 널리 사용되고 있는 제초제인 뷰타클로르의 어류에 대한 독성영향을 알아보고자 송사리(Oryzias latipes, Medaka)의 생육단계별 급성 독성시험(acute toxicity test)과 송사리 수정란을 이용하여 초기생활사 독성시험(early-life stage toxicity test)을 수행하였다. 급성 독성시험결과 부화 후 1일, 1주, 2주, 2개월 그리고 5개월 된 송사리의 96시간 반수치 농도($LC_{50}$)는 각각 0.68, 0.52, 0.38, 1.09 그리고 $0.45\;mg\;L^{-1}$으로 부화 후 2주된 치어가 가장 높은 감수성을 보였다. 초기생활사 독성시험결과, 부화기간은 $7{\sim}8$일, 부화율은 87%이상으로 모든 시험구에서 통계적으로 대조구와 유의성이 없었다. 그러나 부화후 생존율은 0.05와 $0.1\;mg\;L^{-1}$ 농도에서 90% 유의수준(p<0.1)에서 통계적으로 대조구와 유의성이 있었다. 이상어 발생율은 0.025, 0.05 그리고 $0.1\;mg\;L^{-1}$ 농도에서 각각 2.1, 2.3 그리고 10%이었고 척추기형과 안면이상 및 난황 흡수가 지연되는 비정상적인 형태를 보였다. 시험 종료 후 생존한 송사리의 전장 및 무게 감소는 농도 상관성을 보였으며, 특히 송사리의 무게는 $0.05\;mg\;L^{-1}$ 농도에서는 90% 유의수준(p<0.1)에서 통계적으로 대조구와 유의성이 있었고, $0.1\;mg\;L^{-1}$ 농도에서는 95% 유의수준(p<.0.05)에서 통계적으로 대조구에 비해 유의성 있는 감소를 보여 송사리 성장 인자 중 전장보다는 무게가 민감한 독성지표로 판단되었다. 이런 결과를 근거로 하여 최저영향농도(LDEC), 무영향농도(NOEC) 그리고 최대허용농도(MATC)는 각각 0.025, 0.013, $0.018\;mg\;L^{-1}$로 산출하였다.
Endocrine disrupting chemicals probably cause the cytological or/and morphological changes of germinal cells in gonad. Accordingly, this study was aimed to make sure that the effect of hormone-mimicking chemicals on gonad morphology such as decrease of germinal cells, inhibition of cellular maturation and change in the ratio of germinal cells in the different developmental phase can be observed by histopathological procedures and can be a useful bio-indicator for the evaluation of endocrine disruption by environmental chemicals. In this experiment, female Japanese medaka were exposured to quercetin, a phytoestrogen, at the concentration of 100 $\mu\textrm{g}$/L. quercetin showed the significant decrease in the number and rate of vitellogenic follicular oocytes in the treated group for 4 and 6 weeks. The weak development of yolk could be also observed. We could conclude that quercetin has anti-estrogenic or androgen-like potency by exerting the inhibition effect on oogenesis in fish female- gonad. From the result of this study, the applied methods and techniques can be evaluated to be a useful biomonitoring means for water pollution, expecting a good result of the subsequent study on apoptosis.
제초제 alachlor에 대한 송사리 및 지렁이 독성시험을 실시하고 국내 잔류실태조사 결과를 바탕으로 생태 위해성평가를 실시하였다. 송사리 독성시험 결과, 96시간 $LC_{50}$는 $1.8\;mg\;L^{-1}$이었으며, 수정란을 사용한 초기생장단계 독성시험에서는 부화율에 대한 NOEC가 $100\;{\mu}g\;L^{-1}$으로 나타났다. 한편, 지렁이 급성독성시험에서 $LC_{50}$(14일)는 $94.1\;mg\;kg^{-1}$, NOEC는 $55.0\;mg\;kg^{-1}$으로 나타났으며, 체중감소가 유의적으로 나타난 농도는 $71.5\;mg\;kg^{-1}$이었다. Alachlor의 국내 하천 및 토양 중 노출수준은 국립환경과학원에서 실시하고 있는 "내분비계장애물질의 환경 중 잔류실태 조사" 결과를 토대로 하였는데 $1999{\sim}2004$년 동안 조사결과, 하천 및 토양에서 각각 $ND{\sim}0.54\;{\mu}g\;L^{-1}$, $ND{\sim}0.9{\mu}g\;kg^{-1}$의 범위로 검출되었다. 위해도 산출을 위한 환경 중 노출수준은 PEC가 아닌 하천 및 토양 중 실제 검출농도로 산출하였다. 독성값은 급성 독성 NOEC를 사용하였으며, 평가계수를 100으로 적용했을 때 PNEC는 송사리 독성시험과 지렁이 독성시험에서 각각 $1.0{\mu}g\;L^{-1}$ 및 $0.55\;mg\;kg^{-1}$으로 산출되었다. 본 독성시험을 통한 PNEC에 비해 잔류실태조사에서의 일반 하천과 토양에서의 노출수준은 매우 낮았으며, alachlor의 최대 검출농도를 나타낸 지점(수계 $0.54{\mu}g\;L^{-1}$, 토양 $0.9{\mu}g\;kg^{-1}$)을 적용했을 경우, alachlor물질에 대한 HQ는 1 이하로 낮게 나타남에 따라 국내 일반 하천과 토양에서의 위해도는 낮은 수준이었다. 한편 외국의 경우, 일반 하천에서 뿐만 아니라 제초제 제조 또는 사용지역을 중심으로 한 모니터링도 이루어지고 있으며, 따라서 이러한 오염원 지역에서의 위해도는 높을 가능성이 있다. 국내의 경우 일반 하천과 토양에서는 alachlor에 대한 생태 위해도는 현저히 낮은 수준이지만 향후에는 제초제 사용 빈도가 높은 지역을 중심으로 한 모니터링 실시와 장기노출에 따른 민감 독성자료를 활용한 위해성평가가 필요하다고 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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