To identify the effects embryo developmental stage and gelrite concentration on plant regeneration in seed culture of rice, mature and immature seeds of rice were cultured on the $N_{6}$ medium supplemented with2 mg/$\ell$ 2.4-D and different levels of gelrite(0.2~1.0%). The calli formed immature embryos were produced more plants than those from mature embryos. The maximum frequency of plant regeneration was achieved in the culture of the calli of immature embryos which was harvested at the 21$^{th}$ day after pollination. The plant regeneration on the medium with gelrite was more accelerate than that on the medium with agar. The highest frequency(55%) of plant regeneration was obtained from the calli transferred to the medium with 6g/$\ell$ gelrite.
Xanthoceras sorbifolium Bunge (yellowhorn) is a woody tree in the soapberry family, Sapindaceae, native to northern China. This species has been identified as a major woody bioenergy plant for bio-diesel production because of high oil content in seed. But the flowers do not bear fruit well while the many flowers blooming. This study was performed to regenerate in vitro plantlet using adventitious shoot formation. To establish the protocol of plant regeneration, adventitious shoots formation rate in the culture of cotyledon of immature zygotic embryos was 68.6% in 1/2 MS medium with 0.5 mg l-1 BA and 3% sucrose (w/v). In the culture of cotyledons of mature zygotic embryos, induction of adventitious shoots was needed to contain high sucrose in pre-culture medium and the frequency of shoot induction was 64.4%. Multiple shoots were induced in 0.5 mg l-1 TDZ, and rooting of shoot was induced 4.0 mg l-1 IBA. Flow cytometry analysis revealed that all the regenerated plantlets were diploid.
벼의 종자배양에서 식물체 재분화 능력을 향상시키기 위하여 2 mg/L의 2,4-D와 여러 가지 농도의 copper (0~5.0mg/L)가 첨가된 MS배지에 종자배양 한 바 캘러스 생장정도는 copper 농도에 따라 다르게 나타났는데 특히, 2.5 mg/L의 copper가 첨가된 배지에서 가장 양호하였다. 그리고 캘러스 형성률과 copper 농도 간에는 유의성 있는 차이가 인정되지 않았다. 식물체 재분화 배지에 2.5 mg/L의 copper의 첨가는 Indica 품종들의 식물체 재분화 효율을 크게 향상시켰다. Copper가 첨가되지 않은 N$_{6}$배지에서 Indica 6품종의 평균재분화율은 2.4%이었으나, copper가 첨가된 배지에서 27.4%로 높게 나타났다.
Jeon, Woong Bae;Lee, Man Bo;Kim, Dae Yeon;Hong, Min Jeong;Lee, Yong Jin;Seo, Yong Weon
한국육종학회지
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제42권4호
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pp.351-356
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2010
Brachypodium distachyon is rapidly emerged in biological study and has been currently used as a model system for genetics and functional studies for crop improvement and biofuel production. Phosphinothricin (PPT) has been widely used as a selectable agent, which raises ammonium content and induces toxicity in non-transformed plant cells. However PPT selection is not much effective on Brachypodium callus consequently reducing transformation efficiency. In order to identify the efficient conditions of PPT selection, calli obtained from mature seeds of Brachypodium (PI 254867) were cultured on the callus inducing medium (CIM) or regeneration medium (ReM) containing serial dilutions of the PPT (0, 2, 5, 10, and 15 mg/l) in dark or light condition. Callus growth and ammonium content of each treatment were measured 2 weeks after the treatment. Although callus growth and ammonium content did not show much difference in CIM, slow callus growth and increased ammonium accumulation were found in ReM. No significant difference of ammonium accumulation in response to PPT was found between dark and light conditions. In order to identify major factors affecting increased ammonium accumulation, callus was cultured on the media in combined with phytohormones (2,4-D or kinetin) and carbon sources (sucrose or maltose) containing with PPT (5 mg/l). The highest ammonium content in callus was found in the kinetin and maltose media.
Plant regeneration was accomplished from protoplast culture of rice (Oryza sativa L. cv. Taebaeg). Embryogenic callus was induced from mature seed on MS medium containing 5 mM proline, 2.5 mg/L 2,4-D, 30 g/L sucrose in the dark at 28$^{\circ}C$ and used to establish embryogenic cell suspension culture. Suspension cells were subcultured every one week in N6 medium supplemented with 5 mM proline, 200 mg/L casein hydrolysate, 2.5 mg/L 2,4-D and amino acids of AA medium. Suspension cultures were composed of cells that were densely cytoplasmic, potentially embryogenic and were at least maintained for more than 6 months in liquid medium. Protoplasts were isolated from fast-growing suspension culture cells and cultured in a slightly modified KpR medium by mixed nurse culture. Isolated protoplasts began to divide within 5~7 days and thereafter, protoplast-derived calli were sequentially transferred to callus proliferating medium that soft agar MS medium contained 2 mg/L 2,4-D and produced distinct embryogenic cells. Microcolonies were then transferred to solid medium which consisted of MS medium containing 5 mg/L kinetin, 1 mg/L NAA, 1 mg/L ABA, 30 g/L sucrose and 10 g/L sorbitol under fluorescent light. Mulitple shoots of 4~5 per callus emerged and were transferred to hormone-free MS medium for root initiation. Thereafter, The plantlets were transferred to pots of soil to mature in the culture room.
갈대의 성숙종자로부터 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 종자로부터 캘러스 유도 및 식물체 재분화 체계를 확립하였다. 종자로부터 캘러스 유도시 첨가되는 auxin으로는 2,4-D가 가장 효율적이었으며, 1.0 mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BA가 첨가된 MS 배지에서 가장 높은 빈도로 캘러스가 유도되었다. 캘러스로부터 식물체 재분화는 cytokinin류인 BA와 kinetin이 첨가되지 않은 MS 배지에서 59.6%로 높은 재분화 효율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 성숙종자로부터의 고효율 재분화 시스템은 유전자 형질전환기술을 이용한 신품종 갈대 개발에 유용하게 이용 될 수 있을 것이다.
이탈리안 라이그래스의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 ‘Jeanne’ 'Florida-80', 'Metro'세 가지 품종의 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 캘러스로부터 식물체 재분화에 미치는 배지 첨가물질의 영향을 조사하였다. 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도시에 첨가되는 식물 생장조절물질로는 모든 품종에서 2,4-D의 경우 5mg/L의 농도로 첨가된 MS 배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었으며, dicamba의 경우 7mg/L의 농도로 첨가해주었을 때 배발생 캘러스의 유도율이 가장 높았다. 배발생 캘러스로부터 식물체 재분화는 배발생 캘러스를 1mg/L 2,4-D와 5mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 배양했을 때 가장 높은 식물체 재분화율을 나타내었다. 광조건에 따른 배양효율의 차이는 모든 품종에서 배발생 캘러스의 유도시에 암상태에서 배양한 캘러스로부터 식물체 재분화율이 광상태에서 배양한 캘러스의 재분화율 보다 약10%정도 높게 나타났다. Casein hydrolyaste와 L-proline의 경우 동시에 배지에 혼용 첨가해 주었을 때 배발생 캘러스 유도율과 식물체 재분화율이 증가되었다. 본 연구를 통하여 확립된 효율적인 배발생 캘러스의 유도 및 식물체 재분화체계는 분자육종을 통한 신품종 이탈리안 라이그래스의 개발에 유용하게 이용되어질 수 있을 것이다.
Zygotic embryos were excised from immature and mature seeds of the Himalayan yew, Taxus wallichiana. The embryos germinated precociously when kept in darkness for 5 weeks and developed into full seedlings within 10-12 weeks. The highest rate of embryo germination ($81\%$) was obtained in modified Lloyd & McCown' s woody plant medium containing macro and micronutrients at half strength supplemented with $1\%$ activated charcoal, which supported both the best embryonic growth ($43\%$) and seedling development ($32\%$). However, the supplementation of basal media with kinetin, thidiazuron, 6-benzyl aminopurine or $GA_3$ had no effect on the germination of the embryos. The embryos derived from immature seeds germinated but the frequency of embryonic growth was better in mature seeds. Stratification of seeds effected precocious germination of embryos. Seeds kept at $4^{\circ}C$ for 1 week germinated earlier and at a higher frequency irrespective of the stage of seed maturity, while the germination rate declined with prolonged cold treatment for 1 month at that same temperature. Analysis of taxanes in germinating seedlings revealed that root tissues contained high levels of taxol, 10-deacetyl-baccatin ill and baccatin ill as compared to shoots. Thus embryo culture technique appears to overcome the lengthy dormancy requirement of T. wallichiana seeds.
Park, Jae-Ho;Jeong, Jin-Boo;De Lumen, Ben O.;Jeong, Hyung-Jin
한국자원식물학회지
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제20권6호
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pp.518-523
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2007
Lunasin is small subunit peptide of coded from Gm2S-1 gene in soybean. It has been previously demonstrated that lunasin is a novel and promising cancer preventive peptide. Lunasin peptide is found only in the seed and not other tissues. And lunasin peptide starts to appear at 5 weeks after flowering and remains in the mature seed. We report here firstly lunasin peptide identified from soybean callus induced by the tissue culture and demonstrate its anticancer properties. The lunasin was identified and purified from soybean callus aged for 6 months. The callus lunasin($1{\mu}M$) inhibited the acetylation of histone H3 and H4 by 58.8% and 56.5%, respectively. And it fully inhibited foci formation compared to the values of the positive control(no lunasin) and negative control(no MCA). Purified lunasin was able to internalize into the cell and localized in the nucleus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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