Results obtained from the observation of 1,000 matured resting conidia of Pyricularia oryzae CAV. were as fellows. The percentage of a condium conitaining was 95.5, while that of a multinucleate conidium was 4.5. Formation of the three-celled mature conidium containing a nucleus in each cell, which was derived from the immatured conidium, could be recognized. Chromosomes could be observed in the conidium when the nuclear division took place. The number of chromosomes was n=3, 4, 5 or 6 but rile majority was 5. The nucleus was moved into the germ-tube from the conidium by following ways: (a) a resting nucleus divided into two nuclei in the conidium and one of them was moved into the germ-tube. The other nucleus remained in the conidium (43 per cent): (b) a nucleus was moved into the germ-tube from the conidium without nuclear division (57 Per cent). The appressorium without a nucleus was abundantly observed when stain was made. However, tile number of a mononucleate appressorium was 476 out of 500 appressoria which had nuclear sap. On the ground of this experiment, we could support the conidium of blast fungus contained mononucleus and also homokaryon seemed to b: appealed on the conidia even though those were multilocular. As the results, it could be concluded that use of inoculum derived from single spore isolate was reasonable for any experiments in the rice blast fungus.
The objective of this study was to determine the microtubule assembly and chromatin configuration during the first cell cycle in bovine oocytes following injection of spermatozoon, sperm head and tail. The microtubule and chromatin configuration was imaged with fluorescent labeled monoclonal ${\alpha}$-tubulin antibody and propidium iodide under laser scanning confocal microscope. Microtubule and chromatin dynamics in bovine oocytes following intracytoplasmic sperm injection (ICSI) were not different from those observed during in vitro fertilization (IVF). Following ICSI, the microtubular aster was observed around sperm midpiece. During pronuclear formation, the sperm aster was enlarged and seen around male and female pronuclei. At mitotic metaphase, the microtubular spindle assemble astral poles and chromosomes were aligned on the spindle equator. At mitosis, asters were concentrated to each spindle pole and they filled the cytoplasm. After injection of the isolated sperm head, the microtubular aster was not seen around sperm head in any cases (0/18). Instead, microtubules were organized from the cytoplasm, which filled the whole cytoplasm during pronuclear apposition. These microtubules seem to move male and female pronuclei. These results suggest that isolated sperm head can develop into normal pronucleus in mature bovine oocytes, and competent to participate syngamy with the ootid chromatin. The functional microtubules following isolated sperm head injection in bovine oocytes appeared to be organized solely from maternal stores.
Phytase from Escherichia coli WC7 was purified from cell extracts and its molecular mass was estimated to be 45 kDa by SDS-PAGE. Its optimum temperature and pH for phytate hydrolysis was 6$0^{\circ}C$ and pH 5.0, respectively. The enzyme was stable up to 6$0^{\circ}C$ and over broad pH range (pH 2-12). The enzyme had higher affinity for sodium phytate than p-nitrophenylphosphate (pNPP). That is, the apparent Km value for sodium phytate and pNPP were $0.15\pm$0.02 mM and 2.82$\pm$0.05 mM, respectively. The gene encoding the phytase was cloned in E. coli XL1-Blue. Sequence analysis showed an open reading frame of 1241 Up encoding a signal peptide (22 aa) and a mature enzyme (410 aa). WC7 phytase was expressed up to 17.5 U/ml in the transformed E. coli XL1-Blue/pUEP, which was 23-fold higher than the activity from wild strain.
Sperrnatogenesis, the process by which the male germ-line stem cells(GSCs; type A spermatogonia) divide and differentiate to produce the mature spermatozoa, occurs in the seminiferous tubules of the testis. The GSCs proliferate actively to produce two types of cells: other GSCs and differentiating spermatogonia. GSCs have unipotentcy, devoted solely to the generation of sperm. The function of GSCs has broad implications for development, disease, and evolution. Spermatogenesis is fundamental for propagation of species and the defects of this system can result in infertility or disease. The ability to identify, isolate, culture, and alter GSCs will allow powerful new approaches in animal transgenesis and human gene therapy relating to infertility. Until recently, research on stem cells in the testis has been limited because of technical difficulties in isolating and identifying these cell populations. Here, we were trying to find out optimal conditions for in vitro culture of GSCs for identifying and isolating GSCs. We collected mouse GSCs from 3-days old mouse by two-step enzyme digestion method. GSCs were plated and grown on mouse embryonic fibroblasts in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) containing 15% fatal bovine serum, 10 mM 2-mercaptoethanol, 1% non-essential amino acids, 1 ng/$m\ell$ bFGF, 10 $\mu$M forskolin, 1500 U/$m\ell$ human recombinant leukemia inhibitory factor (LIF). Over a period 3∼5 days, GSCs gave rise to large multicellular colonies resembling those of mouse pluripotent stem cells. After 5th passages, cells within the colonies continued to be alkaline phosphatase and Oct-4 positive and tested positive against a panel of two immunological markers(Integrin $\alpha$ 6 and Integrin $\beta$ 1) that have been recognized generally to characterize GSCs. SSEA-1, SSEA-3, and SSEA-4 also showed positive signals. Based on our data, these GSCs-derived cultures meet the criteria for GSCs itself and even other pluripotent stem cells. We reported here the establishment of in vitro cultures from mouse male GSCs.
A system for the production of transgenic plants has been developed for Italian ryegrass(Lolium mult리orum Lam.) via Agrobacterium-mediated transformation of embryogenic callus. Mature seed-derived calli were infected and co-cultured with Agrobacterium EHA101 carrying standard binary vector pIG121Hm encoding the hygromycin phosphotransferase(HPT), neomycin phosphotransferase II (NPTII) and intron-oontaining $\beta$g1ucuronidase( intron-GUS) genes in the T-DNA region. The effects of several factors on transformation and the expression of the GUS gene were investigated. Inclusion of 200${\mu}M$ acetosyringone(AS) in inoculation and co-cultivation media lead to a significant increase in stable transformation efficiency. Increasing Agrobacterium cell density up to 1.0 in $OD_{600}$ during infection increased transfonnation efficiency of embryogenic calli. The highest transfonnation efficiency was obtained when embryogenic calli were incoulated with Agrobacterium in the presence of 0.1% Tween20 and 200${\mu}M$ AS. Hygromycin resistant calli were developed into complete plants via somatic embryogenesis. GUS histochemical assay and PCR analysis of transgenic plants demonstrated that transgenes were integrated into the genome of Italian ryegrass.
The purpose of this study was to compare echocardiographic parameters of cloned beagle dogs with the previously reported reference range. Seven cloned dogs were assessed for anatomical features and cardiac function through left- and right-sided heart and right ventricle outflow tract from M-mode, 2D-mode, pulsed wave Doppler and tissue Doppler imaging. In all the cloned dogs, there were no abnormalities in anatomical structure and measurements were within the normal reference range. In addition, left- and right-sided myocardial function was within the normal reference range. Especially, pulmonary hypertension and right-sided heart failure frequently encountered in cloned animals were not recognized in cloned dogs. In conclusion, no evidence of cardiovascular dysfunction in mature cloned dogs could be identified either at birth or the growing stage in this study. Therefore, serious adverse effects of somatic cell nuclear transfer technology including transgenesis on cardiac morphology and function were not found in cloned dogs.
Isotocin (IT), a nonapeptide homolog of oxytocin in mammals, has been suggested to be involved in physiological processes including social behaviors, stress responses, and osmoregulation in teleost fish. To study its structure and function, the gene encoding the IT precursor was cloned from the genomic DNA and brain cDNA of the cinnamon clownfish, Amphiprion melanopus. The IT precursor gene consists of three exons separated by two introns, and encodes an open reading frame of 156 amino acid (aa) residues, comprising a putative signal peptide of 19 aa, a mature IT protein of 9 aa, a proteolytic processing site of 3 aa, and 125 aa of neurophysin. Tissue-specific analysis of the IT precursor transcript indicated its expression in the brain and gonads of A. melanopus. To examine its osmoregulatory effects, the salinity of the seawater (34 ppt) used for rearing A. melanopus was lowered to 15 ppt. Histological analysis of the gills indicated the apparent disappearance of an apical crypt on the surface of the gill lamella of A. melanopus, as pavement cells covered the surface upon acclimation to the lower salinity. The level of Na+/K+-ATPase activity in the gills was increased during the initial stage of acclimation, followed by a decrease to its normal level, suggesting its involvement in osmoregulation and homeostasis. The only slight increase in the level of IT precursor transcript in the A. melanopus brain upon low-salinity acclimation suggested that IT played a minor role, if any, in the process of osmoregulation.
Kim Do Nyun;Oh Sang Taek;Lee Jae Myun;Lee Won-Keun;Lee Suk Kyeong
Journal of Life Science
/
v.15
no.6
s.73
/
pp.909-915
/
2005
We investigated microRNA (miRNA) biogenesis of Epstein-Barr virus (EBV) which is the first virus shown to produce viral miRNAs. As expected, expression of all the reported EBV miRNAs were detected by Northen blot in an EBV-infected B cell line, B95-8; BHRF1-1, BHIU1-2, BHRF1-3, BART1, and BART2. The putative EBV pri-miRWAs and pre-miRNAs predicted from the known mature EBV miRNA sequences were detected by RT-PCR in B95-8 cells. Many animal miRNA genes exist as clusters of 2-7 genes and they are expressed polycistronically. As the EBV miRNAs are clustered in two regions of the EBV genome, we examined whether these clustered EBV miRNA genes are also expressed polycistronically. A long polycistronic transcript with the expected size (1602 bp) corresponding to the BHRF1-1~BHRF1-2~BHRF1-3 was amplified. However, any polycistronic transcript containing both BART1 and BART2 was detectable in B95-8. These results suggest that EBV miRNAs may be processed in a similar way with animal miRNAs and that some of the clustered EBV miRNAs can be transcribed polycistronically.
Jo, Hannah;Eom, Young Woo;Kim, Hyun-Soo;Park, Hong Jun;Kim, Hee Man;Cho, Mee-Yon
Gut and Liver
/
v.12
no.6
/
pp.664-673
/
2018
Background/Aims: Regulatory dendritic cells (rDCs), which can be induced by mesenchymal stem cells (MSCs), play an important role in inducing and maintaining homeostasis of regulatory T cells and exhibit anti-inflammatory functions. In this study, we investigated whether MSCs could differentiate DCs into rDCs and compared the therapeutic effects of rDCs and MSCs on dextran sodium sulfate (DSS)-induced chronic colitis mice. Methods: Immature DCs (imDCs) and lipopolysaccharide (LPS)-treated mature DCs (mDCs) were co-cultured with MSCs for 48 hours, and then the profiles of surface markers and cytokines and regulatory roles of these DCs for primary splenocytes were analyzed. In addition, the therapeutic effects of MSCs and DCs co-cultured with MSCs were compared in chronic colitis mice. Results: After co-culture of imDCs (MSC-DCs) or LPS-treated mDCs (LPS+MSC-DCs) with MSCs, the expression of CD11c, CD80, CD86, interleukin 6 (IL-6), tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), and interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$), was decreased, but that of CD11b, IL-10, and transforming growth factor-${\beta}$ (TGF-${\beta}$) was increased. Furthermore, MSC-DCs and LPS+MSC-DCs induced the expression of CD4, CD25, and Foxp3 in primary splenocytes isolated from mice. In DSS-induced colitis mice, MSCs and MSC-DCs increased colon length, body weight, and survival rate and induced histological improvement. Moreover, in the colon tissues, the expression of IL-6, TNF-${\alpha}$, and IFN-${\gamma}$ decreased, but that of IL-10, TGF-${\beta}$, and Foxp3 increased in the MSC- and MSC-DC-injected groups. Conclusions: Our data suggest that MSCs differentiate DCs into rDCs, which ameliorate chronic colitis. Thus, rDCs stimulated by MSCs may be therapeutically useful for the treatment of chronic inflammatory diseases.
Recombination activating gene-2 (RAG-2) plays a crucial role in the development of lymphocytes by mediating recombination of T cell receptors and immunoglobulins, and loss of RAG-2 causes severe combined immunodeficiency (SCID) in humans. Rag-2 knockout mice created using homologous recombination in ES cells have served as a valuable immunodeficient platform, but concerns have persisted on the specificity of Rag-2-related phenotypes in these animals due to the limitations associated with the genome engineering method used. To precisely investigate the function of Rag-2, we recently established a new Rag-2 knockout FVB mouse line ($Rag-2^{-/-}$) manifesting lymphopenia by employing a CRISPR/Cas9 system at Center for Mouse Models of Human Disease. In this study, we further characterized their phenotypes focusing on histopathological analysis of lymphoid organs. $Rag-2^{-/-}$ mice showed no abnormality in development compared to their WT littermates for 26 weeks. At necropsy, gross examination revealed significantly smaller spleens and thymuses in $Rag-2^{-/-}$ mice, while histopathological investigation revealed hypoplastic white pulps with intact red pulps in the spleen, severe atrophy of the thymic cortex and disappearance of follicles in lymph nodes. However, no perceivable change was observed in the bone marrow. Moreover, our analyses showed a specific reduction of lymphocytes with a complete loss of mature T cells and B cells in the lymphoid organs, while natural killer cells and splenic megakaryocytes were increased in $Rag-2^{-/-}$ mice. These findings indicate that our $Rag-2^{-/-}$ mice show systemic lymphopenia with the relevant histopathological changes in the lymphoid organs, suggesting them as an improved Rag-2-related immunodeficient model.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.