To establish in vitro mass production system of grape anthocyanin pigments through callus and cell suspension culture, the effects of nitrogen amount and the ratio of $NO_3^-$/$NH_4^+$ in the medium on cell growth and anthocyanin production were investigated. Total nitrogen amount and the ratio of $NO_3^-$/$NH_4^+$ in the medium strongly affected anthocyanin production and cell growth. When $NH_4^+$ was fixed, the cell growth was promoted by 50 mM total nitrogen (20 mM $NO_3^-$ : 30 mM $NH_4^+$ ) than other nitrogen combinations, and was strongly inhibited when $NO_3^-$ was lacking (0 mM $NO_3^-$ : 60 mM $NH_4^+$ ) while anthocyanin production was increased. When $NO_3^-$ was fixed, the cell growth was promoted by 70 mM total nitrogen (40 mM $NO_3^-$ : 30 mM $NH_4^+$) than other nitrogen combinations, and was strongly inhibited when $NO_3^-$ was lacking (0 mM $NO_3^-$ : 60 mM $NH_4^+$ ) while anthocyanin production was increased. Cell growth was gradually increased by all nitrogen combinations, but anthocyanin production reached its peak on day 4 in culture. Anthocyanin content increased with decreasing cell density. Sucrose was rapidly hydrolyzed to fructose and glucose within 4 days. Glucose and fructose concentrations in the medium increased and peaked at the 4th day. The anthocyanin content of $NH_4^+$-free 2% sucrose media was 2 times (200 $\mu\textrm{g}$/g) higher than that of 1% sucrose. When $NO_3^-$ was lacking, the highest anthocyanin production was observed at 4% sucrose after 12 days of culture, and increased along with the sucrose concentration.
The sedimentation processes and heavy metal distributions at the Nakdong estuary were investigated during October 1987 and September 1988. The depositional sedimentary environment of the studied area was estuarine environments and was divided into three provinces depending on its textural parameters such as barrier, tidal falt, and water passes. The relationship between the textural parameters showed that the barrier was under strong wave action, that the tidal flat was under relatively weak wind-driven currents, and that the water passes were under strong and continuous tidal currents. Each environments was resulted from different transport mechanism. the sand barrier sediments were transported by all three populations including suspension, saltation, and bed load, and water pass-deposited sediments were by the bad load with some suspension population. In water mass over the studied area, the concentrations of heavy metals including Cu, Cd, $Cr^{+6}$, Pb and Zn were recorded to be 27.8, 6.7, 20.4, 16.3, and 37.3 ppb in their highest concentrations, respectively. and those in sediments were 20.0, 1.65, 25.4, 15.4, and 132.0 ppm, respectively. The total up take factored of Cu, Cd, $Cr^{+6}$, Pb, and Zn by V. Muller (corbicula fluminea) were 1600, 310, 310, 490 and 7900, respectively.
Gardenia callus was induced in MS medium containing $10{\;}{\mu}M$ of 2,4 diphenoxy acetic acid (2,4-D), $1{\;}{\mu}M$ kinetin, and 3% sucrose in the dark. $B_5$ medium was identified to be the most adequate medium for cell growth. Indole-3-acetic acid (IAA) was better growth regulator than 2,4-D not only for cell growth but slso for carotenoid production. Ligt also played a critical role on synthesis of carotenoid. Gardenia cells grown in $B_5$ medium could utilize a polysaccharide, soluble starch, as a carbon source. The cell growth was stimulated in $B_5$ medium fortified with 0.2% yeast extract. The optimum pH for cell growth was 5.7. High density cultures can be maintained by increasing inoculum size and medium concentration accordingly. Specific growth rate and mass doubling time were 0.095 $day^{-1}$ and 7.3 days, respectively. The cell immobilized in alginate tends to formulate more enlarged vacuoles containing yellow pigment compared with those of suspended cell. Carotenoid content of immobilized cell was about $264.4{\;}{\mu}g/g$ fresh weight (F.W.) corresponding twice of the content of suspended cell ($112.08{\;}{\mu}g/g$ F.W.). The color of gardenia cell was shifted from yellow to red when carbohydrase-secreting fungus, Trichoderma reesei, was co-cultivated with gardenia cells.
An MR(Magneto-Rheological) fluids damper is designed and applied to vibration suppression of a 1/4 car model. The damping constant of MR damper changes according to input current which is controlled in a semi-active way. Several control algorithms are compared in simulations and experiments. The advantage of the proposed Frequency shaped LQ control is that passenger comfort is emphasized in the range of 4~8Hz and driving safety is emphasized around the resonance frequency of unsprung mass.
This study was carried out to investigate the appropriate medium and constitutionof growth regulators for somatic embryogenesis for development of rapid mass propagation system via somatic embrygenesis in Rehmennia glutinosa. Embryogenic callus formation from leaf explant was more effective when 4mg / l BA with 0.5mg / l NAA than that of treated with only auxins or cytokinins. LS medium was suitable for embryogenic callus formation. LS medium with 4mg / l BA with 0.5mg / l NAA was effective for the maintenance and proliferation of embryogenic callus. In suspension culture, addition of 1mg / l BA to LS medium was proper for somatic embryogenesis. The highest rate of shoot developement form cotyledon stage embryo was obtained in 1/2 LS medium and plantlet survived by 75% after transplanted to the soil. after 4 weeks.
Kwon Shin Han;Song Hi Sup;Kim Jae Rhee;Tomio Yamaguchi
Korean journal of applied entomology
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v.12
no.1
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pp.23-27
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1973
In an effort to find effective inoculation method of Fusarium nivale, this experiment was conducted. The results obtained are summarized as follows: (1) Distilled water-spore suspension of this fungus was inoculated on rice seedling and the result showed that negligible disease symptoms were observed when the inoculated plants were placed in a moist chamber for one day, whereas considerable symptoms were indicated when kept for two days. (2) After giving physical wounds by wind or wooden stick to the rice seedling, distilled water-spore suspenion was sprayed on them and considerable diseased spots were formed. (3) Sufficient disease occurrence was due to the addition of $1\%$ rice leaf extract, glucose, polypeptone, and yeast extract solution to the spore suspension. (4) In distilled water, spore germination was poor, while in nutrient added solution good germination rate as well as anastomosis was found. (5) A new rice variety Tong-il turned out to be more susceptible to Fusarium nivale than Pung-kwang.
Kim, Yong-Ki;Hong, Sung-Jun;Jee, Hyung-Jin;Park, Jong-Ho;Han, Eun-Jung;Park, Kyung-Seok;Lee, Sang-Yeob;Lee, Seong-Don
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.14
no.2
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pp.148-156
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2010
S59-4 isolate was evaluated as a potential biocontrol agent using in vivo wounded garlic bulb assay. When the spore suspension ($10^5$ spores/$m\ell$) of Penicillium hirsutum was co-inoculated with cell suspension of S59-4 isolate on wounded garlics, the isolate showed high suppressive effect to disease development. The isolate was identified as Pantoea agglomerans S59-4(Pa59-4) through Biolog system. Furthermore, soaking garlic bulbs in the suspension of Pa59-4 significantly reduced garlic decay caused by P. hirsutum. The optimal concentration of Pa59-4 for controlling garlic blue mold was $10^7\sim10^8$ cfu/$m\ell$. And suppressive effect of Pa59-4 on garlic storage decay reduced as inoculation concentration of Penicillium hirsutum increased. In addition in order to investigate population dynamics of Pa59-4 on application site of garlic cloves, two antibiotic markers, pimaricin and vancomycin were selected. Bacterial density of Pa59-4 on the wounded garlic cloves increased continuously both under room temperature condition and low temperature condition until 30days after application of Pa59-4, meanwhile that of Pa59-4 on intact garlic cloves increased until 15days after application of Pa59-4 and thereafter decreased continuously. Two culture media for mass-production of Pa59-4, LB medium and TSB medium, were selected. By-product of bio-fungicide formulated by mixing white carbon and bacterial suspension of Pa59-4 suppressed by 40 to 50% garlic blue mold. Above results suggest that Pa59-4 be a promising control agent against garlic blue mold.
In order to identify PCP glucose conjugates transformed from PCP in soybean and rice cell suspension cultures, the purified metabolites were acetylated, purified twice by HPLC using a normal and a reversed phase column, and then subjected to fast atom bombardment(FAB) mass spectrometric analysis. As were the conjugates, their acetylated derivatives of the glucose conjugates formed at the early stage(48 hr) of metabolism were separated by HPLC into three fractions. FABMS analysis of each fraction revealed that, at least in two fractions, the locations of the spectral peaks were practically coincident with those deducible from the structures of pentachlorophenyl and tetrachlorophenyl ${\beta}-D-glucopyranosides$. Based on information obtained from mass spectral and chromatographic analysis of not only the water-soluble metabolites but also aglycones and glycone, it is concluded that PCP is primarily metabolized to glucose conjugates, which account for more than 50% recovery of the PCP-conveyed radioactivity from the water soluble metabolites : The conjugates are mainly made up of pentachlorophenyl ${\beta}-D-glucopyranoside$, tetrachlorophenyl ${\beta}-D-glucopyranosides$( probably 2 or more isomers), and 2-hydroxy-3,4,5,6-tetrachlorophenyl ${\beta}-D-glucopyranoside$.
Purpose: ((R)-1-(2-chlorophenyl)-N-1-[$^{11}$C]methyl-N(1-propyl)-3-isoquinoline carboxamide ((R)-PK11195) is a specific ligand for the peripheral type benzodiazepine receptor and a marker of activated microglia, used to measure inflammation in neurologic disorders. We report here that a direct and simple radiosynthesis of [$^{11}$C](R)-PK11195 in mild condition using NaH suspension in DMF and one-step loop method. Materials and Methods: (R)-N-Desmethyl-PK11195 (1 mg) in DMSO (0.1 mL) and NaH suspension in DMF (0.1 mL) were injected into a semi-prep HPLC loop. [$^{11}$C]methyl iodide was passed through HPLC loop at room temperature. Purification was performed using semi-preparative HPLC. Aliquots eluted at 11.3 min were collected and analyzed by analytical HPLC and mass spectrometer. Results: The labeling efficiency of [$^{11}$C](R)-PK11195 was 71.8$\pm$8.5%. The specific activity was 11.8:$\pm$6.4 GBq/$\mu$mol and radiochemical purity was higher than 99.2%. The mass spectrum of the product eluted at 11.3 min showed m/z peaks at 353.1 (M+1), indicating the mass and structure of (R)-PK11195. Conclusion: By the one-step loop method with the [$^{11}$C]CH3l automated synthesis module, [$^{11}C$](R)-PK11195 could be easily prepared in high radiochemical yield using NaH suspension in DMF.
To improve the productivity of peroxidase (POD) of cell line SP-47 derived from cell suspension cultures of sweet potato (Ipomoea batatas (L) Lam.cv White Star), we optimized culture conditions including the composition and concentration of plant growth regulators and carbon source, and the cell inoculum size. When one g (fr wt) of cells was inoculated into 50 mL TL medium supplemented with l mg/L 2,4-D and 30g/L sucrose in 300 mL Erlenmeyer flask at 25$^{\circ}C$ in the dark (100rpm), the POD activity per g cell dry wt was maximized to be about 6,800 units after 25 days of subculture, which was about 30 times higher than that of intact roots of horseradish plants grown in the greenhouse, but the cell growth was maximum after 15 days of subculture. The protein content per g cell dry wt maintained almost plateau and after 25 days of subculture decreased as culture Proceeded further whereas the POD specific activity (unit/mg protein) was about two times higher after subculture and continuously increased from 12 days to the end of cultures (40 days). The POD isozyme patterns showed almost the same regardless of cell growth stage, but some acidic isozymes were slightly increased after 25 days of subculture. These results indicate that POD activity in suspension cultures of sweet potato is closely associated with cell growth and stresses derived from cell culture renditions and medium depletion. Due to its high POD activity the SPL47cell line seems to be suitable for the mass production of POD.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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