The locus coeruleus(LG) is known to be observed a sexual dimorphism in rat CNS. LC is the largest collections of norepinephrine(NE)-containing neurons in the mammalian brain. Especially in rat, all LC neurons contained NE unlike other mammalians, so that specific reactions were found in the tyrosine-hydroxylase(TH) immunoreactive neurons. Sexual dimorphism of rat LC has affected by genes before sex hormone appeared, thereafter affected by sex hormones. In these day, many scientists founded morphological differences between male and female LC morphology, but differences of entire structure was not founded. Thus we investigated sex differences of the LC neuron's morphology in rat by three-dimensional(3-D) reconstruction using Confocal laser scanning microscopy(CLSM). We reported that neuron's shape was relatively-large multipolar neurons and neuron's processes in dorsal LC proceeded to ventral direction in the male and female rat. Male had a longer anterior-posterior length than female had in dorsal LC. In addition to middle-LC, male rat's LC had a more thicker posterior region but had not viewed in a previous study. In reverse, female rat's LC had a thicker anterior region like a previous study. This results using 3-D reconstruction by CLSM showed that the male's LC was more wide-ranging than female's relatively.
배추의 약(anther) 발달에 관여하는 유전자를 분리, 특성을 구명하고, 궁극적인 목표로는 특이 발현을 조절하는 프로모터를 분리 작물의 웅성불임 유기 및 임성화복에 응용하고자 본 연구를 수행하였다. 배추 약 cDNA 유전자 은행으로부터 차별화 선별(differential screening)에 의해 얻어진 15개의 약특이 유전자들의 부분 염기서열 결정 후 기존에 보고된 유전자들과 상동성 검색을 통해 그 기능을 추정해 본 결과 cDNA clone BAN52는 polygalacturonase, BAN84는 ascorbate oxidase, BAN101은 $H^+-translocating$ ATPase, BAN2는 pectin esterase 유전자와 상동성을 보였으나, 그 외 유전자들은 상동성이 없어 그 기능을 추정할 수 없었다. 상기 유전자들의 발현시기를 꽃 발달 시기별로 조사한 결과 대부분의 유전자들이 (BAN5, 10, 33, 52, 57, 102, 103, 215, 229) 꽃봉오리 2.1mm 내외에서 발현이 시작하여 성숙화분까지 그 발현양이 증가하였고, BAN32, 54, 62, 84, 101는 꽃봉오리 3.9mm인 약발달 후기부터 나타났고, BAN87 유전자는 그 양은 적지만 약 발달 초기부터 후기까지 발현하였다.
누에의 가시 돌연변이 형질을 이용한 환경변이원 검색계 수립을 위하여 MMC, EMS, PCB에 대한 누에알 변이원 검색계의 감수성을 조사한 결과, 난모세포계는 MMC, 정세포계는 EMS에 대하여 특정적으로 높은 감수성을 보였고, PCB와 dioxin에 대해서도 양성반응을 얻을 수 있었다. 수나방의 사정횟수에 따른 정세포의 변이원 감수성 변화를 시험한 결과, 1교와 3교 때 사정된 정자 간에는 큰 차이가 없었다. 변이원 감수성은 높으나, 산란성, 우화율 등 검색계로서 주요형질이 극히 불량한 선3호는 C5, Nl2, 한삼면과의 교잡으로 주요형질이 개선되고 높은 변이원 감수성을 유지하였다.
The next generation sequencing has significantly contributed to clarify the genome structure of many species of zootechnical interest. However, to date, some portions of the genome, especially those linked to a heterogametic nature such as the Y chromosome, are difficult to assemble and many gaps are still present. It is well known that the fluorescence in situ hybridization (FISH) is an excellent tool for identifying genes unequivocably mapped on chromosomes. Therefore, FISH can contribute to the localization of unplaced genome sequences, as well as to correct assembly errors generated by comparative bioinformatics. To this end, it is necessary to have starting points; therefore, in this study, we reviewed the physically mapped genes on the Y chromosome of cattle, buffalo, sheep, goats, pigs, horses and alpacas. A total of 208 loci were currently mapped by FISH. 89 were located in the male-specific region of the Y chromosome (MSY) and 119 were identified in the pseudoautosomal region (PAR). The loci reported in MSY and PAR were respectively: 18 and 25 in Bos taurus, 5 and 7 in Bubalus bubalis, 5 and 24 in Ovis aries, 5 and 19 in Capra hircus, 10 and 16 in Sus scrofa, 46 and 18 in Equus caballus. While in Vicugna pacos only 10 loci are reported in the PAR region. The correct knowledge and assembly of all genome sequences, including those of genes mapped on the Y chromosome, will help to elucidate their biological processes, as well as to discover and exploit potentially epistasis effects useful for selection breeding programs.
Background: To investigate the effect of pectinase-treated Panax ginseng (GINST) in cellular and male subfertility animal models. Methods: Hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced mouse spermatocyte GC-2spd cells were used as an in vitro model. Cell viability was measured using MTT assay. For the in vivo study, GINST (200 mg/kg) mixed with a regular pellet diet was administered orally for 4 mo, and the changes in the mRNA and protein expression level of antioxidative and spermatogenic genes in young and aged control rats were compared using real-time reverse transcription polymerase chain reaction and western blotting. Results: GINST treatment ($50{\mu}g/mL$, $100{\mu}g/mL$, and $200{\mu}g/mL$) significantly (p < 0.05) inhibited the $H_2O_2$-induced ($200{\mu}M$) cytotoxicity in GC-2spd cells. Furthermore, GINST ($50{\mu}g/mL$ and $100{\mu}g/mL$) significantly (p < 0.05) ameliorated the $H_2O_2$-induced decrease in the expression level of antioxidant enzymes (peroxiredoxin 3 and 4, glutathione S-transferase m5, and glutathione peroxidase 4), spermatogenesis-related protein such as inhibin-${\alpha}$, and specific sex hormone receptors (androgen receptor, luteinizing hormone receptor, and follicle-stimulating hormone receptor) in GC-2spd cells. Similarly, the altered expression level of the above mentioned genes and of spermatogenesis-related nectin-2 and cAMP response element-binding protein in aged rat testes was ameliorated with GINST (200 mg/kg) treatment. Taken together, GINST attenuated $H_2O_2$-induced oxidative stress in GC-2 cells and modulated the expression of antioxidant-related genes and of spermatogenic-related proteins and sex hormone receptors in aged rats. Conclusion: GINST may be a potential natural agent for the protection against or treatment of oxidative stress-induced male subfertility and aging-induced male subfertility.
Several studies have been done regarding carcass traits and growth in pigs. Recently, these have progressed to examine increases in economic traits, including meat quality and meat quantity, by using candidate genes. One of them is the pituitary-specific protein PIT-1, a member of the POU (Pit-Oct-Unc) family of transcription factors playing an important regulatory role in developmental processes. In addition, muscle development is known to be regulated in part by growth factors and cytokines locally produced. Therefore, studies were performed to analyze PIT-1 genotypes and serum cytokines (IGF-I, IGF-II, TGF-${\beta}1$, EGF, cortisol, DHEA-S, IL-2, and IL-6) in castrated male pigs for their possible involvement in the development of carcass traits. The genotypes of PIT-1 gene were analyzed by PCR-RFLP with MspI restriction enzyme. But, only CD and DD genotypes, not CC genotype, have been detected. Based on PIT-1 genotyping, a significant difference in EGF expression beween CD type (78.8 ng/ml) and DD type (46.0 ng/ml) was detected (p<0.05), whereas other cytokines did not show any statistical significance depending on PIT-1 genotypes. Collectively, these results suggest the possibility that EGF could affect the formation of carcass traits.
Mammalian spermatogenesis occurs in a precise and coordinated manner in the seminiferous tubules. One of the attempts to understand the detailed biological process during mammalian spermatogenesis at the molecular level has been to identify the testis specific genes followed by study of the testicular expression pattern of the genes. From the subtracted cDNA library of rat testis prepared using representational difference analysis (RDA) method, a complimentary DNA clone encoding type III member of a DnaJ family protein, DnaJC18, was cloned (GenBank Accession No. DQ158861). The full-length DnaJC18 cDNA has the longest open reading frame of 357 amino acids. Tissue and developmental Northern blot analysis revealed that the DnaJC18 gene was expressed specifically in testis and began to express from postnatal week 4 testis, respectively. In situ hybridization studies showed that DnaJC18 mRNA was expressed only during the maturation stages of late pachytene, round and elongated spermatids of adult rat testis. Western blot analysis with DnaJC18 antibody revealed that 41.2 kDa DnaJC18 protein was detected only in adult testis. Immunohistochemistry study further confirmed that DnaJC18 protein, was expressed in developing germ cells and the result was in concert with the in situ hybridization result. Confocal microscopy with GFP tagged DnaJC18 protein revealed that it was localized in the cytoplasm of cells. Taken together, these results suggested that testis specific DnaJC18, a member of the type III DnaJ protein family, might play a role during germ cell maturation in adult rat testis.
A method for sex determination of pigs was examined using polymerase chain reaction(PCR). Sex determining region Y(SRY) gene encoded on Y chromosome plays a key role for primary male development. Zinc finger X-Y(ZFX-ZFY) gene, one of the X-V homology gene group was found on the X and Y chromosomes, respectively, We tested for molecular sexing by amplification patterns of SRY and ZF genes. Genomic DNAs from various resources including porcine hairs and semen collected from domestic pig breeds and native pigs was used for PCR assay of each gene. The amplified products for porcine SRY gene were yielded only in males but not in females. On the other hand, two differential patterns were observed in amplification of ZF gene reflecting the chromosomal dimorphism by a length polymorphism between X and Y chromosomes. Of both, a common band was detected in all individuals tested so that this band might be amplified from ZFX gene as a PCR template, but another is specific for males indicated that from ZFY. The result of PCR assay provides identical information to that from investigation of phenotypic genders of the pigs tested. We suggest that this PCR strategy to determine porcine sexes using comparison of the amplification patterns of the SRY gene specific for Y chromosome and the dimorphic ZF gene between X and Y chromosomes may be a rapid and precise method for discrimination of two sexes and applied to DNA analysis of small samples such as embryonic blastomere, semen, and hairs.
By use of RT-PCR coupled with DHPLC technique (WAVE analysis), pattern of isoforms of porcine cytochrome P450 aromatase gene was investigated. Relatively higher expression of aromatase mRNA was observed in testis than in ovary and this result accounted for the previous findings of higher blood estrogen level in male compared with female in this species. (omitted)
Seo, Hee-Jung;Seon, Chan-Wook;Choi, In-Ho;Cheon, Yong-Pil;Cheon, Tae-Hoon;Lee, Ki-Ho
Reproductive and Developmental Biology
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제34권2호
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pp.103-109
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2010
Functional regulation of a specific tissue or organ is controlled by a number of ways, including local cell-cell interaction. Of several forms of cell-cell junctional complexes, gap junctions are caught a great attention due to a formation of direct linkage between neighboring cells. Gap junctions are consisted of connexin (Cx) isoforms. In the present study, we evaluated expressional profiling of Cx isoforms in the rat initial segment (IS) of the male reproductive tract at different postnatal ages. The presence and expression of 13 Cx isoform mRNAs were determined by semi-quantitative real-time PCR analyses. A total of 8 Cx isoform mRNAs were detected in the IS of the male rats during postnatal development. The highest level of Cx30.3 mRNA was found at 5 months of age, while abundance of Cx31 mRNA was the highest at 1 year of age. Expression of Cx31.1 gene was relatively consistent during the postnatal development. Fluctuation of Cx32 and 37 gene expression was observed during the postnatal period. Significant elevation of Cx40 mRNA abundance was detected at 25 days of age and older ages. Expression patterns of Cx43 and 45 genes were similar with the highest level at 2 weeks of age, followed by gradual decreases at older ages. These results indicate differential regulation on expression of Cx isoforms in the rat IS during postnatal development. A complicated regulation of gene expression of Cx isoforms in the IS at different postnatal ages is suggested.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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