Lee, Jin-Young;Yoo, Dan-Hee;Joo, Da Hye;Kim, So-Ra;Jo, Hui-Seon;Joo, Sung-Hyun;Chae, Jung-Woo
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.43
no.1
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pp.19-26
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2017
This study investigated the anti-inflammatory activities and cell viability of Amelanchier asiatica (A. asiatica) 70% ethanol extracts against RAW 264.7 cells induced by lipopolysaccharide (LPS). Cell toxicity test on macrophage cells (RAW 264.7) was performed by 3-[4,5-dimethyl-thiazol-2-yl]-2, 5-diphenyl-tetrazoliumbromide (MTT) assay and results showed 96% cell viability at $1,000{\mu}g/mL$ concentration. Anti-inflammatory activity was examined via the inhibitory tests on the production of LPS induced NO in RAW 264.7 cells by Griess assay. The result showed that the extract inhibited NO production in concentration dependent manner. The iNOS and COX-2 protein expression inhibitory effects were confirmed by western blot and by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). From the former they were decreased by 84.3%, 56.2% at $500{\mu}g/mL$ concentration, respectively, and from the latter decreased by 89.8%, 84.9% at $500{\mu}g/mL$, respectively. In conclusion, this study showed the anti-inflammatory effects of A. asiatica extracts. Thus, this could be applied to an anti-inflammatory agent.
To evaluate the feasibility of cathepsin-B levels in preoperatively screening patients with thyroid cancer, we assigned these patients to either the thyroid cancer group (n=32) or the nodular hyperplasia group (n=7). Five healthy volunteers served as controls (n=5). We quantified cathepsin-B expressions in cancerous lesions with follicular carcinoma and hyperplastic lesions with nodular hyperplasia, and compared the degrees to those of normal thyroid tissue, which was obtained from matched contralateral lobe. The activity of serum cathepsin B was significantly higher in patients with thyroid carcinoma ($284.87{\pm}79.32$, ${\times}10^{-2}\;mU$) and those with nodular hyperplasia ($255.45{\pm}95.68$, ${\times}10^{-2}\;mU$) than compared to normal control ($168.94{\pm}15.10$, ${\times}10^{-2}\;mU$) (p<0.05). Based on the results of immunoassay, the concentrations of cathepsin B in the thyroid cancer group ($15.50{\pm}7.86\;ng/ml$) and the nodular hyperplasia group ($17.64{\pm}7.49\;ng/ml$) were higher than those of the control group ($4.85{\pm}0.61\;ng/ml$). The degree of cathepsin-B mRNA expression was significantly higher in cancerous or hyperplastic lesions than normal thyroid tissues from matched contralateral lobe with follicular carcinoma or non-neoplastic thyroid disease. Our results indicate that the activity of serum cathepsin B is a useful indicator in screening patients with nodular hyperplasia or neoplastic thyroid disease and it may be involved in the abnormal proliferation of cells.
Son, Hye Jin;Koo, Bon Chul;Kwon, Mo Sun;Lee, Young Man;Kim, Teoan
Reproductive and Developmental Biology
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v.38
no.3
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pp.99-105
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2014
In this study, to further understand the mechanism of animal growth and to develop a miniature transgenic animal model, we constructed and tested tetracycline-inducible RNAi system using shRNA targeting the mRNA of mouse insulin-like growth factor (mIGF-1) or mouse growth hormone receptor (mGHR) gene. Quantitative real-time PCR analysis of mouse liver cell (Hepa1c1c7) cells transfected with these vectors showed 85% or 90% of expression inhibition effect of IGF-1 or GHR, respectively. In ELISA analysis, the protein level of IGF-1 in the cells expressing the shRNA targeting IGF-1 mRNA was reduced to 26% of non-transformed control cells. Unexpectedly, in case of using shRNA targeting GHR, the IGF-1 protein level was decreased to 75% of control cells. Further experiments are needed to explain the lower interference effect of GHR shRNA in IGF-1 protein. Accumulated knowledge of this approach could be applicable to a variety of related biological area including gene function study, gene therapy, development of miniature animals, etc.
Interferon regulatory factor 8 (IRF8) is essential for the development of B and T cells, as well as for the activity of dendritic cells and macrophages. We performed molecular characterization of IRF8 from rock fish, Sebastes schlegelii (Ss), and investigated the spatial and temporal profile of mRNA expression after challenge with lipopolysaccharide (LPS), polyinosinic:polycytidylic acid (poly I:C), or Streptococcus iniae. The full-length cDNA sequence of SsIRF8 was 1,657 bp, containing an ORF of 1,266 bp. The gene had a predicted molecular mass of 47.7 kDa and an isoelectric point of 5.99. The amino acid sequence coded by this gene showed the highest degree of identity (90.8%) and similarity (96.2%) with IRF8 from Oplegnathus fasciatus. The SsIRF8 mRNA was expressed ubiquitously, at varying levels, with the highest level of expression observed in the spleen. To confirm the role of SsIRF8 in mediating the immune response, we measured SsIRF8 mRNA expression in the splenic tissue at different time points after injection with LPS, poly I:C, or S. iniae. The qRT-PCR results showed that SsIRF8 mRNA expression in the poly I:C-injected group was highly upregulated 6 hr after exposure (P<0.05). Expression of SsIRF8 mRNA in the S. iniae-injected group peaked at 24 hr. These results suggest that SsIRF8 might be important in regulating the strength of the rockfish immune response to immunostimulatory agents.
PURPOSE. The purpose of this study was to investigate the effects of fasting and high-fat diet feeding on uncoupling protein 3 (UCP3) mRNA levels, uncoupling the respiratory chain and producing heat, of skeletal muscle in rat. METHODS. Fasting experiment: Forty Male Sprague-Dawley rats (5 wk) were divided into non-fasting groups (CON) and fasting groups (FG) for 0 day, 0.5 day (12 hr), 1 day, 2 day and 3 day. The rats of CON were sacrificed at 0 and 3 day. High-fat diet experiment: Forty Male Sprague-Dawley rats (5 wk) were divided into low-fat diet groups (LF) and high-fat diet group feeding for 0 day, 0.5 day (12 hr), 1 day, 2 day and 3 day. The rats of LF were sacrificed at 0 and 3 day. Analysis: Analysis of UCP3 mRNA expression was used by Real-time PCR. RESULTS. UCP3 mRNA levels of FG group were increased according to time course for 2 days- fasting but decreased at 3 day-fasting. UCP3 mRNA of HF were increased during HF diet feeding for 2 day, and peaked at 1 day-HF feeding, but decreased 2 day and 3 day-HF feeding CONCLUSION. Therefore, it may be rational that UCP3 is up-regulation when a large amount of fatty acids influx occurs in skeletal muscles as well as might have a role for fine adjustments of energy expenditure.
Yu, Hak Yin;Yang, In Jun;Lincha, V.R;Park, In Sik;Lee, Dong-Ung;Shin, Heung Mook
Journal of Life Science
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v.25
no.8
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pp.880-888
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2015
Foeniculum vulgare (FV) has long been used in traditional medicine for the treatment of inflammatory diseases. In addition, it is usually known as an important medicinal and aromatic plant widely used as a carminative, digestive, lactogogue, and diuretic, and for treating respiratory and gastrointestinal disorders. The skin barrier protects against the invasion of pathogens, fends off chemical and physical assaults, and protects against extensive water loss. In this study, the effects of solvent-fractionated FV fruits on strengthening the skin barrier and maintaining moisture, as well as their antifungal activity, were investigated in human keratinocyte (HaCaT) cells. The expression of involucrin, loricrin, filaggrin, hyaluronic acid synthase, human β defensin, and cathelicidin genes and proteins was measured by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and western blotting. The production of hyaluronic acid was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The butanol fraction increased the expression of involucrin and filaggrin. Both the ethyl acetate and the butanol fractions increased hyaluronic acid production by promoting the expression of hyaluronic acid synthase-1. Although the antimicrobial peptides were increased by FV crude extract and its fractions, the samples did not show a significant effect compared to the normal group. These results suggest that the butanol fraction of FV could be very useful in cosmetics for the treatment of dermatological diseases.
The purpose of this study was to research the biological activity of ethanol extract from Smilax china L. which is a vine shrub belonging to the lily family. For antiwrinkle effects, elastase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed 41.1% and 16.3% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. The collagenase inhibition effect of ethanol and water extracts from S. china L. showed more than 96.6% and 60.0% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. As a result of having fibroblast measured cell viability on fibroblast cell of ethanol extract from S. china L., it showed 71.7% with cell viability at $100{\mu}g/ml$ concentration. At $50{\mu}g/ml$ concentration, the procollagen biosynthesis effect of ethanol extract from S. china L. was 139.86%. At the same concentration, the matrix metalloprotease (MMP)-1 inhibition effect of the ethanol extract was 74.9%. According to the results of Western blot of ethanol extract from S. china L., the expression of the MMP-1 protein was decreased by 35% at $50{\mu}g/ml$ concentration. Reverse transcription-polymerase chain reaction (PCR) of ethanol extract from S. china L. showed that the expression of MMP-1 mRNA was decreased by 45% at $50{\mu}g/ml$ concentration. The findings suggest that 70% ethanol extract from S. china L. (SC) has great potential as a cosmeceutical ingredient with antiwrinkle effects.
The purpose of this study was to investigate the role of the Vaccinum oldhami fruit extract as a cosmetic additive. As a result of having macrophage (RAW 264.7) measured a cell toxicity effects of 70% ethanol extract from Vaccinum oldhami fruit, it shown 118% with toxicity at $500{\mu}g/ml$ concentration. In nitric oxide synthesis inhibition effect, 70% ethanol extracts from Vaccinum oldhami fruit shown 47.3% at $1,000{\mu}g/ml$ concentration. The iNOS, COX-2 protein expression inhibitory effect by western blot of 70% ethanol extract from Vaccinum oldhami fruit was decreased by 36.13%, 29.61% at $500{\mu}g/ml$ concentration. And iNOS, COX-2 mRNA expression inhibitory effect by reverse-transcription-PCR of 70% ethanol extract from Vaccinum oldhami fruit was decreased by 62.25%, 90.07% at $500{\mu}g/ml$ concentration. All these finding that extract from Vaccinum oldhami fruit could prove that their have effects anti-inflammatory efficacy. And extract from Vaccinum oldhami fruit has potential as a cosmetic ingredients.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.27
no.6
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pp.483-490
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2001
There were many controversies in the cause and progress of tumorigenesis. Recently, studies on the mutation of genes related to the tumor have extensively been performed due to development of molecular biology. Structural and morphological changes of chromosomes, which are related to the abnormal activation of oncogenes or inactivation of tumor suppression genes, transform the normal cells into the tumor cells. p53 and Rb are well known tumor suppressor genes, while oncogenes include c-myc, bcl-2 and ras, etc. When exposed to cell damaging agents, p53 inhibits cell growth by inducing transcription of p21. Especially p73, which is homo-logy of p53, frequently deleted in melanoma, neuroblastoma, colon cancer, and breast cancer, when over produced, p73 activates the transcription of p21, bax-1 and inhibits cell growth by inducing apoptosis. For study on mRNA expression of p21 and p73, normal oral keratinocytes, and cell lines of primary and metastatic oral squamous cell carcinoma were cultured and then electrophoresis and RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction) were performed. 1. The mRNA of p21 and p73 in normal oral keratinocyte expressed lower than that of primary squamous cell carcinoma. 2. The mRNA of p21 in metastatic oral squamous carcinoma cell lines was expressed as various patterns compared with that of normal oral keratinocyte. 3. In the metastatic oral squamous cell lines, the mRNA of HN8 expressed higher than that of HN12 or HN19. 4. The mRNA of p73 in primary oral squamous cell lines expressed 4-5 times higher than that of normal keratinocyte. 5. In metastatic oral squamous cell lines, there was no significant expression of p73 mRNA compared with that of normal oral keratinocyte. From the results obtained in this study, mRNA expression of p73 in primary oral squamous cell lines was remarkable, while mRNA expression of p21 and p73 in metastatic oral squamous cell lines were statistically insignificant.
Kim, Dong In;Kim, Hyun Jung;Yun, Jong Moon;Lee, Ji Hye;Han, So Jung;Kim, Ha Eun;Jang, Min Jung;An, Bong Jeun
Food Science and Preservation
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v.25
no.1
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pp.107-116
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2018
The aim of this study is to investigate the antioxidant and intracellular anti-inflammatory efficacy of blueberry leaf extracted with hot water (BLW), 70% ethanol (BLE), and 70% acetone (BLA) in RAW 264.7 macrophages. In order to evaluate the anti-inflammatory effect of blueberry leaf extracts, RAW 264.7 macrophages were stimulated with lipopolysaccharide (LPS) to induce the production of inflammation-related factors, which were measure by Western blotting and real-time PCR methods. i-NOS, COX-2 protein, and mRNA expression showed concentration-dependent decrease. The decreases in the mRNA expression levels of interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$), and prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) were concentration-dependent. Further, the antioxidant effects of blueberry leaf on total polyphenol contents, electron donating ability and $ABTS^+$ radical scavenging activity were evaluated. The total polyphenol contents of BLW, BLE, and BLA were $217.04{\pm}2.98$, $156.72{\pm}3.90$, and $182.88{\pm}3.02mg\;TAE/g$, respectively, while the electron donating abilities at $1,000{\mu}g/mL$ of BLW, BLE, and BLA were 81.7, 79.6, and 79.3%, respectively. The $ABTS^+$ radical scavenging activity was fond to be concentration dependent. The nitric oxide (NO) production inhibition activities at $50{\mu}g/mL$ of BLW, BLE, and BLA were 35.1, 42.4 and 42.7%, respectively. In conclusion, the antioxidant and anti-inflammatory test results indicate that blueberry leaf extracts (BLW, BLE, and BLA) can be used as potential anti-inflammatory agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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