The purpose of this study was to find out effects of treatment of ginsenoside Re, Rc and EGCG on mRNA expressions of leptin, hormone sensitive lipase (HSL) and resistin in 3T3-L1 adipocytes. The concentrations of EGCG were treated with $0.01{\times}10^{-7},\;0.1{\times}10^{-7},\;1{\times}10^{-7}\;and\;1{\times}10^{-6}\;or\;100{\mu}g/ml$ ginsenoside Re, Rc in culture cell for 13 days. mRNA expression of leptin wasn't expressed in preadipocyte but according to differentiation of adipocyte, the that of mRNA expression was decreased at gensenosids or EGCG treated cells compared with non treated adipocyte. Expression of HSL mRNA was increased in G-Re, G-Rc and EGCG treated cells compared with non treated cells. The resistin level was significantly decreased in adipocytes treated with G-Re, G-Rc and EGCG. These pattern was similar to leptin expression. These results support that treatment of gensenosides or EGCG in 3T3-L1 adipocyte resulted to affect of leptin and resistin as well as HSL mRNA levels, accordingly, levels of leptin and HSL will be acted by signalling body fat stores to the hypothalamus which in turn regulates food intake andenergy expenditure to maintain body weight homeostasis. And also regulation of resistin mRNA will prevent to diabetics attacked with obesity. In conclusion, we suggest that consumption of ginseng saponine or EGCG might prevent human diabetics or/and obesity.
Effects of Mori Folium Ethanol Soluble Fraction (MFESF) on mRNA expression of glucose transporters, acetyl-CoA carboxylase (ACC) and leptin were examined in db/db mice. 500 and 1000mg/kg dose for MFESF (designated by SY 500 and SY 1000, respectively) and 5mg/kg dose for acarbose were administered for 6 weeks. Quantitations of glucose transporters (GLUT-2 and GLUT-4), ACC and leptin mRNA were performed by RT-PCR and in vitro transcription with co-amplification of rat ${\beta}$-actin gene as an internal standard. Muscular GLUT-4 mRNA expression in MFESF-treated groups were increased dose dependently. On the other hand, MFESF caused the GLLT-4 and leptin mRNA expressions in adipose tissue to decrease dose dependently, which means that triglyceride synthesis in adipocytes might be decreased and consequently signals adipocytes to inhibit the synthesis and release of leptin. Hepatic ACC mRNA expression in MFESF-treated groups was also decreased. and this may result in lowering of serum triiglyceride level. In contrast, liver GLUT-2 mRNA expressions in MFESF-treated and acarbose groups were increased. Higher rate of glucose uptake into hepatocytes is known to inhibit a phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK)-catalyzed reaction, which is a rate-limiting step in gluconeogenesis.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.4
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pp.992-996
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2006
The study examined clinical effect of the 'Sexiang Shuhuo Jing' on serum CK and LDH activities and skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression concentration 140days after skeletal muscle injury in rats. The clinical research consisted of observing and measuring the serum CK, LDH activities and skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression, at the time of injury and during recovery. All experimental data were analyzed by repeated measurement with ANOVA on of SPSS(11.5v), accepting level for all significances was above ${\alpha}\;=.05.$ The results were as follows: That skeletal muscle injury in rats there existed a substantial increase serum CK, LDH activities and expression of skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA And Sexiang Shuhuo Jing treatment group's serum CK, LDH activities lower and faster recovery than control group. The 1 st day after skeletal muscle injury, Sexiang Shuhuo Jing treatment group's skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression was much more higher than control group, after 2 day's faster recovery normal level than control group. There existed a substantial increase again serum CK, LDH activities and skeletal muscle ${\alpha}-actin$ mRNA expression 3rd days after injury in control group. But in Sexiang Shuhuo Jing treatment group's can't be found that.
Leptin, the product of obese (ob) gene, is an adipocyte-derived satiety factor that plays a major role in the regulation of food intake, energy homeostasis, body weight, reproductive physiology and neuropeptide secretion. The present study was designed to generate transgenic mice expressing antisense mouse ob (mob) gene. Total RNA was extracted from the adipose tissues of mouse, then reverse transcription was performed. The 303 and 635 bp fragments of anti I and II cDNAs were amplified from mob cDNAs by PCR. The two mob cDNAs were reversely ligated into between adipose tissue specific aP2 promote and SV40 poly(A) site. Transgenic mice carrying two different kinds of antisense mob transgenes were generated by DNA microinjection into pronucleus. Total 14 transgenic mice were born, and the 4 and 5 founder lines of the transgenic mice with anti I and II transgenes were respectively established. Antisense mRNA expression was detected in transgenic F$_1$ mice by RT-PCR analysis. This result suggests that the transgenic mice expressing antisense mob mRNA may be useful as an animal disease model to be obesity caused by decreased amount of leptin secretion.
The evolutionally conserved TREX complex member, Yra1/ALY, belongs to the REF (RNA and export factor binding proteins) family of hnRNP-like proteins, which has been implicated in multiple processes including transcription, nuclear RNA stability, and mRNA export. Fission yeast, Schizosaccharomyces pombe, genome encodes two members of REF proteins. In addition to Mlo3 known previously as an mRNA export factor, there is the other REF protein, Tho4, which is predicted as a component of THO complex. Here we showed that deletion of tho4 (SPBC106.12c) gene does not inhibit both growth and nuclear mRNA export. However, overexpression of tho4 displays growth retardation and slight accumulation of $poly(A)^+$ RNA in the nucleus. Neither ${\Delta}tho4$${\Delta}mlo3$ nor ${\Delta}tho4$${\Delta}mex67$ double mutants exhibit additive growth defect. Moreover, yeast two-hybrid and co-immunoprecipitation analysis did not show that the Tho4 protein interacted with any members of TREX complex and mRNA export factor Rae1. Contrary to expectation, these observations support that the S. pombe Tho4 is not a component of TREX complex, and not directly involved in bulk mRNA export from the nucleus.
목적 : 한의학에서 관절염이나 진통치료에 사용되어 왔던 봉독약침액이 인간 골육종 세포주인 MG-63 세포에서 항종양효과가 있는지 연구하고자 한다. 특히 본 실험에서는 이러한 봉독의 종양발생 억제작용이 세포사멸과 관련이 있는지, 그리고 프로스타글란딘 합성 효소인 cyclooxygenase(COX)-2의 억제와 관련이 있는지를 연구하고자 한다. 방법 : 인간 골육종 세포주에서 세포사멸의 변화를 관찰하기 위해서 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium brimide(MTT) assay, 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), DNA fragmentation assay 및 reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) 방법을 이용하였다. 결과 : 세포독성 검사에서 봉독은 MG-63 세포에서 농도-의존적으로 세포독성을 나타내었다. 이러한 봉독의 세포독성이 세포사멸로 인한 것인지를 여러 가지 형태로 검사한 결과 봉독에 의한 세포독성은 TUNEL 검사와 DAPI 염색시 세포사멸의 특징적인 소견들을 나타내었고, flow cytometric 분석에서도 세포사멸을 의미하는 세포주기의 변화들을 나타내었다. 봉독이 COX-2의 발현에 미치는 영향을 RT-PCR로 실험한 결과 봉독은 COX-2 mRNA의 발현을 선택적으로 억제하였다. 결론 : 본 실험의 결과 봉독은 COX-2 mRNA의 발현을 억제함으로써 골육종 세포에서 세포사멸을 유발하고 그 결과 항종양효과를 나타내는 것으로 보여진다.
Lee, Su Jung;Choi, Hye Ran;Lee, Jin-Cheol;Park, Hee Jeon;Lee, Hee Kwon;Jeong, Jong Tae;Lee, Tae-Bum
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.46
no.2
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pp.198-204
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2014
Ultraviolet B (UV-B) irradiation is a negative factor that induces skin damage, inflammation, and aging. UVB irradiation induces the inflammatory response through interleukin (IL)-6 and IL-8 expression in keratinocytes. In addition, it induces the production of reactive oxygen species (ROS) and the activation of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), which plays an important role in collagen 1 degradation in the extracellular matrix. We investigated the antiaging effects of five kinds of berry in human skin keratinocyte (HaCaT) cells using juice of black raspberry (Rubus occidentalis), blueberry wild (Vacciniun angustifolium) and cultivar (Vacciniun corymbosum), black chokeberry (Aronia melanocarpa (Michx.) Elliott), and mulberry (Morus abla). HaCaT cells irradiated with UV-B exhibited increased ROS generation, as well as IL-6, IL-8, and MMP-1 gene expression, when compared to the control cells that were not irradiated with UV-B. However, pre-treatment of berry juice before UV-B irradiation significantly down-regulated the UV-B-induced ROS generation and inflammatory cytokine and MMP-1 expression. The results suggest that all berries have anti-aging effects including lowering inflammatory cytokine levels, ROS generation, and MMP-1 expression in HaCaT cells during UV-B irradiation.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.46
no.5
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pp.562-571
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2017
In this study, we investigated the anti-oxidant activities [electron-donating ability (EDA), 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging ability, and reactive oxygen species (ROS) inhibitory activity], anti-wrinkle activities [collagenase inhibitory activity, suppression and/or phosphorylation of matrix metalloproteinases (MMPs), and mitogen-activated protein (MAP) kinase activity], and mRNA expression levels using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay in ultraviolet (UV) B ray ($50mJ/cm^2$)-irradiated human keratinocyte HaCaT cells. Josaengheugchal, Sinneungheugchal (SE), Shintoheug rice, Heugjinju rice, and Heugseol (HE) among colored rice varieties were reported to have excellent antioxidant properties. In the EDA and ABTS radical scavenging assays, extracts of the five colored rice varieties had scavenging activities of 72% at concentrations higher $50{\mu}g/mL$. In the collagenase inhibition assay, ethanol extracts of the five colored rice varieties showed high inhibitory effects of about 60% at concentrations higher $25{\mu}g/mL$. In the ROS inhibition assay, ethanol extracts of HE and SE showed very excellent inhibition efficacies at all concentrations. We determined molecular biological mechanisms of MMPs (MMP-1, -3, -8, and -13) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) with HE, and the results show that HE suppressed expression of MMPs and phosphorylation of MAPK and increased expression of pro-collagen type I in UVB-irradiated cells. It was also confirmed by RT-PCR that HE reduced expression of MMPs mRNA. Therefore, these results suggest that HE has anti-wrinkle and collagen production effects and may be used as a material in the development of functional food and cosmetic industries.
In this study, we investigated the proliferative and adhesional effect of human osteoblast like MG-63 cell treated with low intensity pulsed ultrasound (LIPUS). We tested the effectiveness of LIPUS in human osteoblast like MG-63 cells. Cell proliferation was measured using a water soluble tetrazolium salts-1 assay. The mRNA expression of alkaline phosphate, vascular endothelial growth factor (VEGF), integrin alpha 2, colla 1A1 were performed by reverse transcription-polymerase chain reaction. LIPUS was no cytotoxicity in human osteoblast like MG-63 cells. In addition, the data show that treatment with 1 MHz and 3 MHz LIPUS on increased proliferation 7 days after. There were significant increased in mRNA expression of alkaline phosphatase, osteocalcin, VEGF, integrin alpha 2 and colla 1A1 (p<0.05). Therefore, the LIPUS significantly increased differential expression of mRNA levels in osteoblast like MG-63 cell and new possibilities in dental clinical practice.
The Rqh1 gene is essential for vegetative growth in fission Yeast. The rqh1 mutant showed that sensitivity of DNA damaging agent, a wild range of phenotype including abnormal gene expression and cell elongation. This result showed that the rqhl-overexpression cell was sensitivity to DNA damaging agent like rqhl mutant. When Rqh1 have an over-expression by $nmt1^+$ promoter of pREP vector, rqh1 mutant DNA damaging agent sensitivity could be compensated. We isolated two strong mutant containing complementation gene, rqh156 and rqh172, respectively. This result observed that the DNA damaging agent sensitivity of rqhl mutant was complemented by the expression of rqh156 and rqh172. They induced mRNA expression in a dose-dependent manner HU, MMS and UV. The HU sensitivity of the rqhl was complemented by the expression of rqh156 and rqh172. The mRNA expression of rqh156 decreased on HU dose dependent but the mRNA expression of rqh172 did not decrease on HU dose dependent. The MMS and W sensitivity of the rqhl was complemented by the expression of rqh156 and rqh172. These results indicate that the isolated rqhl gene may play an important role in DNA metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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