A 990 bp full-length gene (xynAHJ2) encoding a 329-residue polypeptide (XynAHJ2) with a calculated mass of 38.4 kDa was cloned from Bacillus sp. HJ2 harbored in a saline soil. XynAHJ2 showed no signal peptide, distinct amino acid stretches of glycoside hydrolase (GH) family 10 intracellular endoxylanases, and the highest amino acid sequence identity of 65.3% with the identified GH 10 intracellular mesophilic endoxylanase iM-KRICT PX1-Ps from Paenibacillus sp. HPL-001 (ACJ06666). The recombinant enzyme (rXynAHJ2) was expressed in Escherichia coli and displayed the typical characteristics of low-temperature-active enzyme (exhibiting optimum activity at $35^{\circ}C$, 62% at $20^{\circ}C$, and 38% at $10^{\circ}C$; thermolability at ${\geq}45^{\circ}C$). Compared with the reported GH 10 low-temperature-active endoxylanases, which are all extracellular, rXynAHJ2 showed low amino acid sequence identities (<45%), low homology (different phylogenetic cluster), and difference of structure (decreased amount of total accessible surface area and exposed nonpolar accessible surface area). Compared with the reported GH 10 intracellular endoxylanases, which are all mesophilic and thermophilic, rXynAHJ2 has decreased numbers of arginine residues and salt bridges, and showed resistance to $Ni^{2+}$, $Ca^{2+}$, or EDTA at 10 mM final concentration. The above mechanism of structural adaptation for low-temperature activity of intracellular endoxylanase rXynAHJ2 is different from that of GH 10 extracellular low-temperature-active endoxylanases. This is the first report of the molecular and biochemical characterizations of a novel intracellular low-temperature-active xylanase.
Heading time is important element for yield and quality in crops. Among day length and temperature which influence on heading, temperature effect has not been investigated well. To investigate temperature effect on heading, heading date and plant growth characters were checked under the low and high temperature conditions in short day length. Analyzing heading date of six Korean varieties under the high and low temperature condition, heading date of varieties were delayed under low temperature. In the low temperature condition, dry weight and area of leaf were reduced. Varieties showing more delay of heading under low temperature also showed more reduction in leaf area. After selecting three varieties showing significant difference in leaf growth and heading date under different temperature conditions, nutrient contents of plant were analyzed. Nitrogen content was reduced in leaf and shoot under the low temperature condition. OsNRT2.3, nitrate transporter, was significantly down regulated in varieties showing more heading delay. Available phosphate content was decreased in leaf, but increased in shoot due to reduction of phosphate mobility. OsPT1, phosphate transporter regulating phosphate uptake, was more down regulated in varieties showing more heading delay. OsPT6, phosphate transporter regulating phosphate transport in plant, was also significantly down regulated in those varieties. With these data, we expected that active nitrogen and available phosphate uptake and transport in plant would increase leaf growth then might reduce heading delay under the low temperature condition.
Huang, Huoqing;Luo, Huiying;Wang, Yaru;Fu, Dawei;Shao, Na;Yang, Peilong;Meng, Kun;Yao, Bin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권10호
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pp.1085-1091
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2009
A phytase with high activity at low temperatures has great potential for feed applications, especially in aquaculture. Therefore, this study used a degenerate PCR and TAIL PCR to clone a phytase gene from Erwinia carotovora var. carotovota, the cause of soft rot of vegetables in the ground or during cold storage. The full-length 2.5-kb fragment included an open reading frame of 1,302 bp and encoded a putative phytase of 45.3 kDa with a 50% amino acid identity to the Klebsiella pneumoniae phytase. The phytase contained the active site RHGXRXP and HD sequence motifs that are typical of histidine acid phosphatases. The enzyme was expressed in Escherichia coli, purified, and displayed the following characteristics: a high catalytic activity at low temperatures (retaining over 24% activity at $5^{\circ}C$) and remarkably thermal lability (losing >96% activity after incubation at $60^{\circ}C$ for 2 min). The optimal phytase activity occurred at pH 5.5 and ${\sim}49^{\circ}C$, and the enzyme activity rapidly decreased above $40^{\circ}C$. When compared with mesophilic counterparts, the phytase not only exhibited a high activity at a low temperature, but also had a low $K_m$ and high $k_{cat}$. These temperature characteristics and kinetic parameters are consistent with low-temperature-active enzymes. To our knowledge, this would appear to be the first report of a low-temperature-active phytase and its heterogeneous expression.
묵은 배추김치의 휘발성 성분들을 고진공승화법을 이용하여 분리, 농축하였으며, GC-MS로 분석하였다. 총 62가지의 휘발성 성분들이 검출되었으며, 7개의 sulfur-containing compounds, 8개의 terpenes, 5개의 esters, 8개의 acids, 15개의 alcohols, 2개의 nitriles, 2개의 ketones, 11개의 aliphatic hydrocarbons, 4개의 miscellaneous compounds등으로 구성되어 있었다. 이 중 특히, acids인 acetic acid와 butanoic acid가 높은 함량을 나타내었다. 묵은 배추김치에서 향기활성성분을 규명하기 위해 고진공승화법을 이용하여 휘발성 성분들을 분리 및 농축 후 향 추출물 희석분석법으로 flavor dilution(FD) factor($Log_3FD$)를 구하였으며, GC-MS 및 GC-Olfactometry(GC-O)법으로 휘발성 성분들을 동정하였다. 이 결과 묵은 배추김치에서 총 16종의 화합물이 검출되었다. 이중 시큼한 냄새, 군덕내의 특성을 지닌 acetic acid, butanoic acid가 높은 FD factor를 보였으며, acids외에 높은 (FD > 9)를 나타내는 성분들로는 linalool, 2-vinyl-4H-1,3-dithin 등이 있었다.
Positive plate was composed of lead hydroxide via reaction between lead oxide and $H_2O$ and lead sulfate was formed of the reaction of lead hydroxide with sulfuric acid. And its density is $3.8g/cm^3$, $4.0g/cm^3$, $4.2g/cm^3$ and $4.4g/cm^3$ by controlling volume of refined water. Curing of positive plate is done for low ($45^{\circ}C$, 40hr, over 95% of relative humidity) & high ($80^{\circ}C$, 40hr, over 95% of relative humidity) temperature, which created 3BS & 4BS active materials. Experimental result of DOD with 100% life cycle test shows that it was not related to the density of active materials but to the low & high temperature aging of active materials. The test makes us to understand that the crystallization which is made by curing of active materials is a more of a main factor than density of active materials under the deep cycle using circumstances. The active materials which were from the high temperature curing are better for deep cycle performance.
In recent years, many researches on new storage media with high capacity and information are developing. For manufacture of optical storage with high capacity, the injection molding process is generally used. In order to increase the filling ratio of the injection molding structure, the injection molding process required for high injection pressure, packing pressure and temperature control of the mold. However, conventional injection molding process is difficult to increase the filling ratio using injection master with the range of several nanometers and high aspect ratio. In order to improve and increase filling ratio of nano-structure with high aspect ratio, the active temperature control of injection mold was used. Experimental conditions were used injection pressure, time and temperature. Consequently, by using the peltier device into injection mold, we carried out the efficient and active temperature control of mold at low cost.
Seedlings of Nongbaek representing strong cold tolerant variety of rice plant, Jinheung of medium variety and Tongil of weak variety were used respectively for the present study. These seedlings were water cultured in phytotron which maintained at the daytime and night temperature of 30-$25^{\circ}C$, 20-2$0^{\circ}C$, 20-15$^{\circ}C$ and 15-1$0^{\circ}C$. The growth rate of plant height, tillering rate, increase in dry weight and absorption pattern of important mineral nutrients at their early growth stage under each temperature conditions were observed. Generally, it appeared that Nongbaek was more active in the growth of plant height than Jinheung, and Jinheung was more active than Tongil under low temperature condition. The tillering rate of these three varieties was equally rapid while it was decreased in the order of weak cold tolerant variety, such as Tongil, Jinheung and Nongbaek as the temperature declined gradually. The dry weigh tincreasing curve showed almost the same pattern in the varieties at the treatment of each temperature. Under low temperature conditions, Nongbaek showed higher absorption rate of N per dry weight and higher absorption amount of per plant body, Jinheung followed and Tongil was the lowest. The absorption amount of P2O5 increased in the top part compared with the roots as temperature rose and decreased as temperature declined. There seemed to be no difference of absorption among the varieties which have different cold tolerance each other. Under low temperature the absorption rate of K per dry weight was high, as a whole, especially Nongbaek was markedly higher than the other two. The absorption rate of Ca, Mg and Fe was also equally high in all varieties under low temperature and Nongbaek showed a more absorptive tendency in the absorption amount under low temperature.
The injection molding process has high accuracy and good reproducibility that are essential for mass production at low cost. Conventional molding processes typically use the water-based mold heating and air cooling methods. However, in the nano injection molding processes, this semi-active mold temperature control results in the several defects such as air-flow mark, non-fill, sticking and tearing, etc. Therefore, in order to control temperature of the molds actively and improve the quality of the molded products, the novel nano injection molding system, which uses active heating and cooling method, has been introduced. By using the Peltier devices, the temperature of locally adiabatic molds can be controlled dramatically and the quality of the molded patterns can be improved.
The cellulose smart material called electro-active paper (EAPap) is made by regenerating cellulose. However, the actuator performance is degraded at low humidity levels. To solve this drawback, EAPap bending actuators were made by activating wet cellulose films in three different room-temperature ionic liquids: l-butyl-3-methylimidazolium hexaflurophosphate ($BMIPF_6$), 1-butyl-3-methylimidazolium chloride (BMICL) and 1-butyl-3-methylimidazolium tetrafluroborate ($BMIBF_4$). In the results, the actuator performance was dependent on the type of anions in the ionic liquids, in the order of $BF_4$>Cl>$PF_6$. The BMIBF 4-activated actuator showed the maximum displacement of 3.8 mm with low electrical power consumption at relatively low humidity. However, the BMICL-activated actuator showed a slight degradation of actuator performance. Further performance and durability improvement will be possible once various ionic liquids are blended with cellulose.
We investigated the interface defect engineering and reaction mechanism of reduced transition layer and nitride layer in the active plasma process on 4H-SiC by the plasma reaction with the rapid processing time at the room temperature. Through the combination of experiment and theoretical studies, we clearly observed that advanced active plasma process on 4H-SiC of oxidation and nitridation have improved electrical properties by the stable bond structure and decrease of the interfacial defects. In the plasma oxidation system, we showed that plasma oxide on SiC has enhanced electrical characteristics than the thermally oxidation and suppressed generation of the interface trap density. The decrease of the defect states in transition layer and stress induced leakage current (SILC) clearly showed that plasma process enhances quality of $SiO_2$ by the reduction of transition layer due to the controlled interstitial C atoms. And in another processes, the Plasma Nitridation (PN) system, we investigated the modification in bond structure in the nitride SiC surface by the rapid PN process. We observed that converted N reacted through spontaneous incorporation the SiC sub-surface, resulting in N atoms converted to C-site by the low bond energy. In particular, electrical properties exhibited that the generated trap states was suppressed with the nitrided layer. The results of active plasma oxidation and nitridation system suggest plasma processes on SiC of rapid and low temperature process, compare with the traditional gas annealing process with high temperature and long process time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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