Although the earthworm is an important animal species capable of regenerating missing body part, earthworm regeneration is not well understood at the tissue, cell and molecular levels. In order to understand the developmental changes of blastema during earthworm tail regeneration, the formation and development blastema during regeneration was investigated by histological analysis. Within 1 day after amputation, dediffentiating blastemal cells appeared in coelomic side of longitudinal muscle layer. At 3 days postamputation, proliferating blastemal cells migrated into coelum and blastema was formed beneath wound epithelium around 7 days after amputation. Segmentation of blastema was observed around 2 weeks after amputation followed by redifferentiation of nephridium, intestine, setae and septa.
The influence of electrolyte concentrations on the action of morphine and naloxone was studied in the myenteric plexus-longitudinal muscle preparation of guinea-pig ileum to examine whether opiate receptor binding obseved in vitro with homogenates represents binding to the pharmacological receptor. The preparations were suspended in a modified Krebs-Henseleit bicarbonate buffer solution and electrically stimulated at 0.2 Hz. Morphine inhibited electrically evoked contractions; the concentration of morphine required for a 50-percent inhibition was 190 nM. This inhibitory action of morphine was potentiated in a medium containing lower concentrations of : $Na^+\;or\;K^+$, or by the addition of $Mn^{2+}$ to the medium, and weakened by increasing the concentration of $Ca^{2+}$ or decreasing the concentration of $Mg^{2+}$. Naloxone antagonized these actions of morphine: however, $pA_2values$ for naloxone (indices of affinity for antagonists, approximately 8.8) were unaffected by these electrolyte concentrations. Thus, changes in the inhibitory action of morphine caused by alterations in electrolyte concentrations are probably not the result of changes in the affinity of the receptor for opiates, but due to alterations in the events which precede or follow the receptor binding. Effects of electrolytes on the affinity of the functional opiate receptor for naloxone in guinea-pig ileum are apparently different from those reported with the specific binding sites for opiates in brain homogenate.
A cDNA encoding the protein lethal (2) essential for life [l(2)efl] was cloned from Gryllus bimaculatus and named GBl(2)efl. This protein is composed of 189 amino acids, including an N-glycosylation site and 15 phosphorylation sites. Its predicted molecular mass is 21.19 kDa, with a theoretical isoelectric point of 6.2. The secondary structure of GBl(2)efl was predicted from the identification of random coils (56.08%), alpha helices (22.22%), extended strands (17.99%), and beta turns (3.7%) through sequence analyses. A homology analysis revealed that GBl(2)efl exhibited a high similarity with other species at the amino acid level, ranging from 52% to 69%. While GBl(2)efl mRNA expression was higher in the dorsal longitudinal flight muscle following a three-day starvation and in the Malpighian tubules following a one-day starvation, no changes in expression were detected in other tissues. Furthermore, tunicamycin-induced endoplasmic reticulum (ER) stress resulted in an approximately 1.8-fold higher expression in the fat body compared with the wild type.
Purpose: The purpose of this study was to determine the changes in foot contact area and pressure when walking with a functional insole that emphasizes the Hallux point as compared to a general insole. Methods: In this study, an experiment was conducted to investigate changes in plantar pressure and contact area for a functional insole that emphasized the Hallux point as compared to a general insole. A lower extremity robot was used for walking reproduction. First, the gait sequence according to the two insoles was determined through a randomized controlled trial comparison. According to the sequence procedure, the insole was attached to the shoe and then worn on the right side of the lower extremity robot for gait reproduction at a normal gait speed of 20 steps per minute. After programming the robot to walk, the experiment was carried out. The result value was determined by averaging the pressure and area data of the fore and rear foot measures after walking at 20 steps per minute. Results: The functional insole that emphasized the hallux point significantly increased the forefoot and rearfoot contact area (p < 0.05) and significantly decreased the forefoot and rearfoot contact pressure (p < 0.05) compared to the general insole. Conclusion: A functional insole that emphasizes the hallux point does not collapse the medial longitudinal arch during gait, increasing foot stability and reducing fatigue. Thus, this functional insole needs to be widely used clinically.
The effects of $Ca^{++}$ and its antagonists (verapamil and $La^{+++}$) upon the spontaneous contraction and the contracture induced by 60 mM K-Tyrode solution were studied in the isolated uterine muscle. Longitudinal muscle strips were prepared from the rat uteri at estrous stage. All experiments were performed in tris-buffered Tyrode solution which was aerated with 100% $O_2$ and kept at 35^{\circ}$. The results obtained were as follows: 1) In the uterine strips contracting spontaneously, both the amplitude of peak tension and the area of contraction curve increased dose-dependently in the range of $0.5${\sim}8$ mM $Ca^{++}$. The frequency of contraction increased as the concentration of $Ca^{++}$ increased up to 2 mM, but above this concentration the frequency decreased. In $Ca^{++}-free$ media, however, contraction did not develop. In the contracture induced by 60 mM K-Tyrode solution, the developed tension increased dose-dependently as the concentration of external $Ca^{++}$ increased to 8 mM. In the absence of external $Ca^{++}$ K-contracture appeared, but it was not sustained. 2) The spontaneous contraction of rat uterus was suppressed by verapamil in proportion to an increase of its concentration and totally abolished at the concentration of $3{\times}10^{-4}\;g/l$, but the spontaneous contraction re-appeared by addition of $Ca^{++}$. The amplitude of peak tension recovered completely but the recovery of frequency was incomplete. K-contracture decreased in a dose-dependent manner after the treatment with verapamil and totally disappeared at its concentration of $3{\times}10^{-4}\;g/l$. Even in this case contracture developed again by extra $Ca^{++}$. 3) The spontaneous contractile activity was inhibited by $La^{+++}$. At the concentration of $10^{-4}$M $La^{+++}$, fibrillation appeared. In the strip inhibited by $10^{-5}M\;La^{+++}$, contractility recovered completely by extra $Ca^{++}$ while in the $10^{-4}M\;La^{+++}$ treated preparation, the rhythmic spontaneous contraction did not develop even at the concentration of 16 mM $Ca^{++}$. After the initial transient depression of contracture tension by $10^{-3}M$ of $La^{+++}$, the strip stowed considerably large size of contracture, hardly influenced by external $Ca^{++}$ or verapamil. The results obtained in this experiment suggest that in the rat uterine muscle there would be some competitive actions between $Ca^{++}$ and its antagonists. It is speculated that $Ca^{++}$ plays an important role in the conduction of excitation, and $La^{+++}$ influences upon cellular $Ca^{++}$ mobilization and re-uptake process as well as transmembrane $Ca^{++}$ transport in a K-depolarized state.
This study was designed to investigate the effect of GABA and related substances on the spontaneous contraction of rat small intestine. The rats(Sprague-Dawley), weighing 200-250g, were sacrificed by cervical dislocation, and the small intestine was isolated. Longitudinal muscle strips from duodenum, jejunum and ileum were suspended in Biancani's isolated muscle chambers and myographied isometrically. GABA and muscimol, a GABA A receptor agonist relaxed the duodenum and jejunum significantly, but baclofen-induced relaxation in those muscle strips was negligible. The effectiveness of GABA and muscimol in various regions were the greatest on duodenum, and greater on jejunum than on ileum The effect of GABA and muscimol was antagonized by bicuculline, a compeptitive GABA A receptor antagonist and picrotoxin, a noncomptitive GABA A receptor antagonist. Duodenal relaxation induced by GABA and muscimol was unaffected by hexamethonium, but was prevented by tetrodotoxin. These results suggest that GABA inhibit the contractility of smooth muscle with distinct regional difference of efficacy, and the site of inhibitory action is the GABA A receptor existing at the presynaptic membrane of postganglionic excitatory nerves.
Horsehair worms (Chordodes koreensis) develop as parasites in the bodies of grasshoppers, crickets, cockroaches, and some beetles. Chordodes koreensis is an accidental parasite of humans, livestock, or pets and poses no public health threat. The male of Chordodes koreensis in the later larval stage from canine vomitus was investigated by the scanning and transmission electron microscopy. In cross sections, the body wall is composed of four components namely epicuticle, cuticle, epidermis, and muscle layers. The parenchymal tissue fills the rest of the body and surrounds the visceral organs such as intestine, and ventral nerve cord but testes were not found. The epicuticle is a thin superficial layer whose surface shows rows of polygonal elevations called areoles. The cuticle has 17 layers of collagenous fibers spirally wound about the long axis of the worm. The section through the cuticle reveals the layers of large fibers cut obliquely lengthwise, alternating with layers of fibers sectioned obliquely crosswise. The layers of large fiber formed a double helix about longitudinal axis of the worm. The epidermis is a single layer. The muscles were interrupted by the nervous lamella in the only midventral portion. The medulla of muscle plate is composed of lightly stained cytoplasm, mitochondria, weakly developed endoplasmic reticulum, and glycogen granules. Between the medulla of a cell and the plasmalemma lies a broad cortical zone of myofilaments. The circular muscles are absent. The characteristic feature of the cytoplasm is that there was no content in peripheral mesenchyme, but was an abundance of large clear vacuoles which give the cytosome a foamy appearance. The nucleus of mesenchyme is not easily identified in our specimens.
The present study was performed to observe the ultrastructure of the integument of adult Paragonimus westermani. Dogs experimentally infected with 60 metacercariae of F. westermani were autopsied 4 months after the infection. Adult p. westermani were extracted from the dogs and the fine structure was studied by means of scanning and transmission electron microscope. The findings are as follows: 1. Scanning electron microscopic findings showed that the spines and the papillae are distributed at whole body surface but the well developed spines or papaillae are shown around the oral sucker and ventral sucker. 2. At the end of the body, excretory pore was found, the shape was irregular. 3. Transmission electron microscopic findings showed that plasma membrane, tegument, basal lamina, connective tissue, circular muscle layer, longitudinal muscle layer. nerve axon and tegumental cell were observed. 4. In higher magnification, plasma membrance and bar-shaped granules were found at the outer surface of the tegument.
Many gastrointestinal muscles show electrical oscillation, so-called 'slow wave', originated from interstitial cells of Cajal (ICCs). Thus, a technique to freshly isolate the cells is indispensable to explore the electrophysiological properties of the ICCs. To apply an enzyme solution on the serosal surface for cell isolation, the intestine was inverted and 0.02% trypsin solution and 0.04% collagenase solution were applied to serosal cavity. After the enzyme treatment, mucosal layer was removed and longitudinal muscle layer was gently separated from the rest of tissue. The thin layer was stretched in the recording chamber and mounted on an inverted microscope. Using ${\beta}-escine$, perforated whole cell patch clamp technique was used. Under a microscope, the tissue showed smooth muscle cells and interstitial cells around the myenteric plexus. Under voltage clamp condition, three types of membrane potential were recorded. One group of interstitial cells, which were positive to methylene blue and CD34, showed spontaneous outward current. These cells had bipolar shape and were considered as fibroblast-like cells because of their peculiar shape and arrangement. Another group, positive to c-kit and methylene blue, showed spontaneous inward current. These cells had more rounded shape and processes and were considered as ICCs. The third, positive to c-kit and had granules containing methylene blue, showed quiet membrane potentials under the voltage-clamp mode. These cells appeared to be resident macrophages. Therefore, in the freshly isolated thin tissue preparation, methylene blue could easily identify three types of cells rather than morphological properties. Using this method, we were able to study electrical properties of fibroblast and residential macrophage as well as myenteric ICCs.
The activation mechanism of K-induced contracture was studied in renal vascular muscle which does not generate an action potential readily and in taenia coli which generates a spike potential spontaneously. Helical strips of arterial muscle from rabbit renal arteries and longitudinal strips of taenia coli from guinea-pig's colons, respectively, were prepared. All experiments were performed in Tris-buffered Tyrode solution which was aerated with 100% $O_2$ and kept $35^{\circ}C$. Renal arterial muscles developed the contracture rapidly, which was composed of a small phasic and a large tonic components, when exposed to a 40 mM K-Tyrode solution. In the absence of external $Ca^{++}$, however, no K-contracture appeared. The contracture induced by K-depolarization was abolished by the treatment with verapamil, which is known to be a selective $Ca^{++}-blocker$ through potential-sensitive $Ca^{++}-channel$. K-contracture of taenia coli showed the contracture composed of a large phasic and a small tonic components. In the $Ca^{++}-free$ Tyrode solution, only the tonic component was abolished and almost no change in the phasic component was observed. The amplitude of tonic component was dependent on the external $Ca^{++}$; The tonic component increased dose-dependently by a stepwise increase of the external $Ca^{++}$, and this component decreased in parallel with the increase of verapamil in the external medium. The results of this experiment suggest that K-contracture of rabbit renal artery is the direct result of the influx of the external $Ca^{++}$, while that of taenia coli is the result of both $Ca^{++}$ influx and the release of sequestered $Ca^{++}$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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