Essentail oils and carrier oils are generally used for Aromatherapy. Therefore the toxicity, possibilities of irritations and sensitive reactions and injury of essential oils must be considered for clients and therapists. So that, in this studies a toxicity of jojoba and 4 species essential oils (fennel, mandarine, tea tree and cedarwood) were investigated by the measurement of MTT-assay and sirius red staining. Liver, kidney and brain tell were chosen for the cell viability assay and observation of morphological change. In the result, no cytotoxicity was observed on live., kidney and brain cell at concentration of 0.01 $\mu\el/m\el$ jojoba oil. And lysis and nucleus breaking were not observed at same concentration of jojoba oil on live., kidney and brain cell. fennel oil was showed 50% of cell viability and inhibited cell growth on liver, kidney and brain cell at relatively high concentration compared with the other oils. 50% of liver, kidney and brain cell viability and delayed cell growth of tea tree and mandarine oil were revealed at lower concentration than fennel oil. In cedarwood oil, 50% of liver cell viability at concentration of 0.00067 $\mu\el/m\el$ was showed, but cell viability and cell growth of kidney and beam cell were effected at the lowest concentration compared with other oils. So that, jojoba oil as using of carrier oil may be not harmful. And 3 essential oils from the fennel, tea tree and mamdarine may have very low toxicity, but cedarwood may be used carefully for inhalation. And over dosage of concentrated cedarwood oil should be not directly touched and exposured, and absolute essential oils must be diluted with carrier oils for topical and systematic massage.
The monitoring of phytoplankton biomass and community structure is essential as a first step to control the harmful cyanobacterial blooms in freshwater systems, such as seen in rivers and lakes, due to the process of eutrophication and climate change. In order to quantify the biomass of phytoplankton with a wide range in size and shape, the measurement of cell biovolume along with cell density is required for a comprehensive review on this issue. However, most routine monitoring programs preserve the gathered phytoplankton samples before analysis using chemical additives, because of the constraint of time and the number of samples. The purpose of this study was to investigate the cell biovolume change characteristics of six cyanobacterial species, which are common bloom-causing cyanobacteria in the Nakdong River, after the preservation with Lugol's iodine solution. All species showed a statistically significant difference after the addition of Lugol's iodine solution compared to the live cell biovolume, and the cell biovolume decreased to the level of 34.0 ~ 56.3 % at maximum in each species after the preservation. The nonlinear regression models for determining the shrinkage ratio by a preservation period were derived by using the cell biovolume measured until 180 days preservation of each target species, and the equation to convert the cell biovolume measured after preservation for a certain period to the cell biovolume of viable cell was derived using that formula. The conversion equation derived from this study can be used to estimate the actual cell biovolume in the natural environment at the time of sampling, by using the measured biovolume after the preservation in the phytoplankton monitoring. Moreover this is expected to contribute to the final interpretation of the water quality and aquatic ecosystem impacts due to the cyanobacterial blooms.
In Paralichthys olivaceus and Nibea japonica, response to live air (5hr) or ship (25hr) transportation was assessed, by determining the levels of plasma cortisol, glucose, lactic acid and osmolality, as well as hematological parameters namely hematocrit (Ht), red blood cell (RBC) count, hemoglobin (Hb), corpuscular volume (MCV), corpuscular hemoglobin (MCH) and corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). In the experimental series I, the olive flounder was subjected to stress or no stress for 1hr, prior to its air transportation for 5hr. The stress suffered by the flounder prior to air transportation resulted in significant reduction in Ht, but increases in MCH and MCHC. Air transportation led to increases in MCV and MCH in both the stressed and non stressed groups. In the non stressed group it led to significant increase in Ht but decrease in MCHC. In the stressed group, the air transportation led to significant increases in osmolality and plasma cortisol from 5 to 38.5ng/$m\ell$. Non stressed groups did not show significant differences in this before and after transportation. In the experiment II, the red blood cell (RBC) count ranged from 2.5$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ to 2.7$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ in the flounder and 1.9$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ to 2.1$\times$10$^{6}$ /${mu}ell$ in the croaker during the pre- and post-transportation, respectively. In the croaker the shipping led to significant increase in plasma cortisol from 26 to 35ng/$m\ell$ but decrease in glucose from 91.0 to 26.4mg/㎗. For glucose the reverse (39.0 to 51.0mg/㎗) was true for the flounder.
Mycobacterium tuberculosis is capable of growing and survival within macrophage. The purpose of this study was to identify the genes regulated by infection of mycobacteria in human monocytic THP-1 cells. We used the differential display reverse transcriptase polymerase chain reaction (DD RT-PCR) and nothern blot analysis to confirm the differentially expressed genes from THP-1 cells infected with live Mycobacterium tuberculosis H37Rv, heat-killed Mycobacterium tuberculosis H37Rv and live Mycobacterium bovis BCG. Among many up or down-regulated clones, 27 clones were sequenced and compared with known genes on GenBank. Thirteen of over-expressed clones from THP-1 cells infected with live Mycobacterium tuberculosis H37Rv were identical to human prothymosin alpha, eight were novel clones and six clones showed homology with Human ferritin H chain, Esherichia coli bgl, Mouse RNA-dependent EIF-2 alpha kinase, E. coli htrL, Hyaluronan receptor and T cell receptor. Our result suggests that Mycobacterium tuberculosis might regulate prothymosin alpha gene transcription in monocytic THP-1 cell.
IL-23 and IL-12 are structurally similar and critical for the generation of efficient cellular immune responses. Toxoplasma gondii induces a strong cell-mediated immune response. However, little is known about IL-23 secretion profiles in T. gondii-infected immune cells in connection with IL-12. We compared the patterns of IL-23 and IL-12 production by THP-1 human monocytic cells in response to stimulation with live or heat-killed T. gondii tachyzoites, or with equivalent quantities of either T. gondii excretory/secretory proteins (ESP) or soluble tachyzoite antigen (STAg). IL-23 and IL-12 were significantly increased from 6 hr after stimulation with T. gondii antigens, and their secretions were increased with parasite dose-dependent manner. IL-23 concentrations were significantly higher than those of IL-12 at the same multiplicity of infection. IL-23 secretion induced by live parasites was significantly higher than that by heat-killed parasites, ESP, or STAg, whereas IL-12 secretion by live parasite was similar to those of ESP or STAg. However, the lowest levels of both cytokines were at stimulation with heat-killed parasites. These data indicate that IL-23 secretion patterns by stimulation with various kinds of T. gondii antigens at THP-1 monocytic cells are similar to those of IL-12, even though the levels of IL-23 induction were significantly higher than those of IL-12. The detailed kinetics induced by each T. gondii antigen were different from each other.
It has been found that the colony size of bacteria grown on an agar plate decreases with increasing agar gel concentration. Evidenc from recent studies suggests that the bacterial colony dynamics is closely related with the mechanical properties of the substrate. We investigate whether bacterial growth on the agar substrate is controlled mostly by the nutrients' diffusion which is hindered more in porous medium than in solution. The number of bacterial cells in single colonies is found to be inversely correlated with agar concentration. High-resolution live cell imaging at the single bacterium level confirms that the bacterial growth rate is reduced with increasing agar concentration. There is a strong correlation between the slowed diffusion and the reduced number of cells in a high concentration of agar medium.
Vaccine is a protective clinical measure capable of persuading immune system against infectious agents. Vaccine can be categorized as live attenuated and inactivated. Live attenuated vaccines activate immunity similar to natural infection by replicating living organisms whereas inactivated vaccines are either whole cell vaccines, eliciting immune response by killed organisms,or subunit vaccines, stimulating immunity by non-replicating sub cellular parts. The components of vaccine play a critical role in deciding the immune response mediated by the vaccine. The innate immune responds against the antigen component. Adjuvants represent an importantcomponent of vaccine for enhancing the immunogenicity of the antigens. Subunit vaccines with isolated fractions of killed and recombinant antigens are mostly co-administered with adjuvants. The delivery system of the vaccine is another essential component to ensurethat vaccine is delivered to the right target with right dosage form. Furthermore, vaccine delivery system ensures that the desired immune response is achieved by manipulating the optimal interaction of vaccine and adjuvantwith the immune cell. The aforementioned components along with routes of administration of vaccine are the key elements of a successful vaccination procedure. Vaccines can be administered either orally or by parenteral routes. Many groups had made remarkable efforts for the development of new vaccine and delivery system. The emergence of new vaccine delivery system may lead to pursue the immunization goals with better clinical practices.
본 연구는 trophic factor supplementation (TFS)이 cold ischemic storage와 rewarming 동안에 신장 세포의 생존에 미치는 효과를 알아보기 위해 실시했다. p44/42와 p38 mitogen activated protein kinases (MAPK) 활성이 TFS에 의해 영향을 받는지를 Western blot을 통해 알아보았다. Apoptotic changes를 알아보기 위해 4',6'-diamino-2-phenylindole (DAPI) 염색을 실시했다. 세포생존도를 알아보기 위해 live assay를 실시하였다. 그 결과, TFS는 cold ischemic storage와 rewarming 동안 증가된 44/42와 p38 MAPK activity를 유의성 있게 감소시켰다 (p<0.05). 또한, cold ischemic storage와 rewarming에 의한 apoptotic cell 수가 TFS에 의해 감소함을 관찰했다. 마지막으로 TFS는 유의성 있게 세포 생존도를 증가시켰다 (p<0.05). 따라서, TFS는 p44/42와 p38 MAPK 활성을 감소시키고 apoptotic change를 억제함으로써 cold ischemia와 rewarming injury로부터 신장 세포를 보호하는 것으로 생각된다.
The present study was designed, fIrst to develop the new methodology to measure the bioluminescence activity easily in live developing bovine embryos by photoncounting, and secondly to compare the expression efficiency of four luciferase reporter genes in bovine embryos at four- to 16-cell stages. In experiment 1, equimolar pSVlacZ and pSVEluc were microinjected into the pronucleus of fertilized bovine oocytes. At 2 days after micro injection, bioluminescence activity of these embryos was measured by photoncounting with a luminometer for 1 min, and lacZ gene expression in the same embryos was assayed by X-gal staining. All the luciferase-positive oocytes showed some bacterial ${\beta}$-galactosidase activity irrespective of the intensity. In experiment 2, four firefly luciferase genes (pTKEluc, pTK6WEluc, pSVEluc and pMiwluc) were introduced by micro injection, and the injected embryos were cultured for the following 2 days. Detection of the luciferase gene expression was done by photoncounting at 5 to 55 min. Over the measurement period, the luciferase activity was almost constant irrespective of the transgenes microinjected. The luciferase activity and expression efficiency at 2 days after microinjection were not significantly affected by the difference in the microinjected transgenes. The present results demonstrated that the bioluminescence activity in live developing bovine embryos could be measured quickly by photoncounting.
The poliovirus Sabin 1 strain has features that make it a particularly attractive live recombinant mucosal vaccine vehicle. Sabin 1 cDNA was manipulated to have multiple cloning sites and a viral specific 3C-protease cutting site at the N-terminal end of the polyprotein. The gene for the N-terminal 169 amino acids of the HIV-1 p24 was cloned into the multiple cloning site of the manipulated Sabin cDNA. A recombinant progeny virus was produced from HeLa cells when it was transfected with the RNA synthesized from the p24-Sabin chimeric cDNA. The recombinant progeny virus expresses substantial amounts of the HIV-1 p24 protein, which was clearly detected in the infected cell lysates and culture supernatants in Western blot experiments with rabbit anti-p24 serum and AIDS patients' sera. Differing from the Mahoney strain, the recombinant Sabin 1 poliovirus maintained the foreign gene stably during the subsequent passages. Replication capacity was about 1 to 1.5 log lower than that of the wild-type Sabin 1. Other physicochemical stability characteristics of the recombinant virus were similar to that of the wild-type Sabin 1. These results suggest that the manipulated Sabin 1 poliovirus can be used as a live viral vaccine vector for the development of mucosal vaccines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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