• 제목/요약/키워드: liquid shaking culture

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Optimization of the Production of Fibrinolytic Enzyme from Bacillus firmus NA-1 in Fermented Soybeans

  • Seo, Ji-Hyun;Lee, Sam-Pin
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제9권1호
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    • pp.14-20
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    • 2004
  • Bacillus strains capable of producing fibrinolytic enzyme were isolated from traditional fermented Korean soybean paste and Japanese fermented soybean (Natto). Among the 16 strains, a selected Bacillus sp. was identified as bacillus firmus, with 80.7% homology, by API kit analysis. Seed starter or B. firmus NA-1 was prepared with 5% soymilk prepared from micronized soybean powder. To produce fibrinolytic enzyme by B. firmus NA-1 the liquid culture was performed with NB broth (pH 7.0) fortified with 1% galactose, 0.1% tryptone, and 0.5% $K_2$HPO$_4$, by shaking with 180 rpm at 37$^{\circ}C$. Fibrinolytic enzyme activity reached the highest value at 7.8 unit/mL (plasmin unit) after fermentation for 72 hr. The crude fibrinolytic enzyme showed higher relative activity in the range of pH 7.0∼9.0. The activity of crude fibrinolytic enzyme was well maintained even after concentration by the vacuum evaporation at 5$0^{\circ}C$ for 1 hr.

Cellulase에 관(關)한 연구(硏究) -제 2 보(第 2 報) Cellulase 생성균(生成菌) Ku-3371, Ko-4383 균주(菌株)의 균학적(菌學的) 성질(性質)- (Studies on Cellulase -Part. 2. The Physiological and Morphological Properties of the Cellulase producing Strains Ku-3371 and Ku-4383-)

  • 정동효
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제11권
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    • pp.119-122
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    • 1969
  • 1. 전보(前報)에서 분리한 두 균주(Ku-3371, Ku-4383)는 다 같이 형태학적으로 Trichoderma viride에 일치한다. 2. 이들 균주(菌株)들의 생육 최적 pH는 4.0이고 생육 최적온도는 $30^{\circ}C$이다. 3. 그리고 이들 균주(菌株)들의 탄소원은 단당류(單糖類)가 좋았고 질소원은 초산태(硝酸態) 질소가 좋았으며 특히 구루타민산(酸)소다는 더욱 좋은 질소원이다.

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Phellinus igniarius로부터 분리한 단백다당류의 분리 및 특성 (Characteristics and purification of proteoglycan from Phellinus igniarius)

  • 김선희;정인창;권용일;김소연;이종숙;이항우;이재성
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제43권1호
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    • pp.57-62
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    • 2000
  • Phellinus igniarius의 배양방법별 균사체 및 단백다당류 생산수율비교 실험에서는 균사체내 다당류의 경우 모두 진탕배양이 효과적이었으나 균사체외 다당류의 경우 다당류 생산에서는 정치배양이 효과적이었다. 다당류의 정제는 조단백다당류를 이용하여 DEAE-cellulose column에 의한 1차 정제를 행하였고, 최종으로 Sepharose 2B를 이용한 2차 정제를 실시하여 최종적으로 균사체내 단백다당류의 탈이온수 분획물(PIIPDG)과 알칼리분획물(PIIPAG), 균사체외 단백다당류의 탈이온수 분획물(PIEPDG) 알칼리 분획물(PIEPAG)을 얻었다. 이때의 정제 수율은 1차 정제에서 40%의 회수율을 나타내었으며 2차 정제에서는 $38{\sim}61%$의 높은 회수율을 보였다. PIEPDG는 총당 79.0%, 총단백질 7.2%, PIEPAG는 총당 56.7%, 총단백질 40.8%, PIIPDG는 총당 64.8%, 총단백질 17.4%, PIIPAG는 총당 56.9%, 총단백질 41.5%으로 측정되었다. 각 단백다당류의 분자량은 PIEPDG 166KDa에서 PIEPAG 565KDa까지 모두 10만이 넘는 거대분자로 나타났다. 각 분획물의 단당류 조성을 볼때, PIEPDG는 glucose, PIIPDG와 PIIPAG는 glucose, inositol, PIEPAG는 glucose, rfructose, inositol이 검출되었다.

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Proliferation of Tricholoma matsutake Mycelial Mats in Pine Forest Using Mass Liquid Inoculum

  • Lee, Won-Ho;Han, Sang-Kuk;Kim, Beom-Seok;Shrestha, Bhushan;Lee, Soo-Yong;Ko, Cheol-Soon;Sung, Gi-Ho;Sung, Jae-Mo
    • Mycobiology
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    • 제35권2호
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    • pp.54-61
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    • 2007
  • Two isolates of Tricholoma matsutake T-008 and T-034, preserved in Entomopathogenic Fungal Culture Collection (EFCC) of Korea, were used in the present study. The isolates had 100% Bootstrap homology with Tricholoma matsutake U62964 and T. matsutake AB188557 and AF309538 preserved in Gene Bank of NCBI. Mycelial growth of T. matsutake was highest in TMM and MYA at $25^{\circ}C$. The highest dry wt. of mycelium was obtained after 65 days of culture, when 6 mycelial discs were inoculated in 100 ml of broth in 250 ml shaking flask. Mycelial mats were observed in clumped condition at the inoculation sites of pine forest after two weeks of inoculation. After 5 months of inoculation, mycelia mats were observed growing inside soil and walls of a few inoculation sites, while mycelial mats growth up to $5{\sim}8$ cm were observed in the roots of pine tree after 6 months. The survival rate of the inoculum was about 40% of the total inoculation sites. The survival rate was found below 20% when the mycelium was inoculated in the summer. The reasons for low survival rates of the mycelium were mainly due to dry season and the soil-borne small animals such as earthworm and mole. After one year of inoculation, no external difference was observed between the artificially inoculated mycelia and the naturally existing mycelia of T. matsutake. The present study showed that fruiting bodies of T. matsutake could be produced by artificial inoculation under the appropriate environmental conditions.

Biofilm 생성이 토양흡착 나프탈렌 분해에 미치는 영향 (Effect of Biofilm Formation on Soil Sorbed Naphthalene Degradation)

  • 이광춘;정선용;박정훈
    • 한국지하수토양환경학회지:지하수토양환경
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    • 제14권6호
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    • pp.45-52
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    • 2009
  • 나프탈렌 분해균주인 Pseudomonas aeruginosa CZ6을 오염된 토양에서 분리하였으며 분리된 균주는 결정상태의 나프탈렌에 부착하고 그 주변에 extracellular polymeric substance를 분비하는 특성을 가졌다. LB, YM과 MSM 배지를 사용하여 배지의 종류에 따른 biofilm 생성량을 측정한 결과, LB 배지에서 biofilm이 가장 많이 생성되는 것으로 나타났다. 나프탈렌을 기질로 한 배양조건에서 균주는 기질의 농도 영향을 크게 받지 않고 0.10% 기질, 150 rpm 조건에서 최적 배양조건은 $30^{\circ}C$, pH 7로 나타났다. 두 가지 토양에서 배지의 종류에 따른 나프탈렌의 분해특성을 관찰한 결과 초기에는 MSM 배지에서 나프탈렌이 가장 많이 분해가 되었다. 그러나 생물이용성이 제한을 받는 조건에서 LB 배지의 나프탈렌이 가장 빨리 제거가 되었다. 이런 결과는 biofilm의 형성과 extracellular polymeric substance 생성이 토양에 흡착된 잔류 나프탈렌의 생물학적 이용성을 향상시키기 때문인 것으로 사료된다.

액체배지를 이용한 조직배양 감자줄기의 대량증식 (Mass production of potato shoots by liquid culture)

  • 김재훈;최은경;김정국
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제36권1호
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    • pp.1-6
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    • 2009
  • MS배지와 PM (Potato medium)배지 (MS배지에서 $NH_4NO_3$$KNO_3$의 양은 1/2, $CaCl_2$는 2배 첨가하고 나머지는 동일)에서 대서, 자심, 추백, 하령 4 품종 감자줄기의 기내 대량증식을 위해 실험하였다. 고체배지에서 배양초기 ($1{\sim}2$주)에 대서와 자심은 MS배지에서 줄기의 신장이 가장 우수하였고, 하령과 추백은 PM배지가 효과적이었지만 배양후기인 4주 째에는 두 배지 사이에 차이가 없었다. 액체 정치배양한 배지에서는 고체배지와 달리 배양초기에는 생장이 늦었고 배양 1주 후부터 감자 (4 cm 이상)줄기 발생률이 급격히 증가하기 시작하였고, 4주까지 꾸준히 생장을 지속하였다. 바이오리액터에서 줄기의 생장은 품종에 따라 차이를 보였다. 특히 추백과 자심은 액아 발생뿐만 아니라 줄기신장이 1/4 PM배지가 우수하였고, 대서는 1/2 PM배지에서 액아발생이 왕성하였다. 한편, 하령은 다른 품종에 비해 생장이 늦었다.

Agrocybe cylindracea로 부터 분리한 다당류의 정제와 특성 (Characteristics and Purification of Polysaccharide Produced from Agrocybe cylindracea)

  • 김선희;정인창;김소연;이종숙;조현제;이항우;이재성
    • 한국균학회지
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    • 제27권2호통권89호
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    • pp.100-106
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    • 1999
  • Agrocybe cylindracea의 배양방법별 균사체 및 다당류 생산수율비교 실험에서는 모두 진탕배양이 효과적이었다. 다당류의 정제는 조단백다당류를 이용하여 DEAE-cellulose column에 의한 1차 정제를 행하였고, 최종으로 Sepharose 2B를 이용한 2차 정제를 실시하여 최종적으로 균사체내다당류(ACIPDG, ACIPAG)와 균사체외다당류(ACEPDG, ACEPAG)를 얻었다. ACEPDG는 총당 75.8%, ACEPAG는 총당 65.4%를 함유하였으며, ACIPDG는 총당 89.2%, ACIPAG는 총당 54.2%의 조성을 보였다. 다당류 분획물들의 분자량을 측정한 결과, 모두 10만이 넘는 거대분자로 ACEPDG 300KDa에서 ACIPAG 600KDa까지 나타났다. 다당류의 조성을 HPLC로 분석한 결과, ACEPDG분획물은 glucose, inositol이 검출되었으며 ACIPDG, ACEPAG, ACIPAG 분획물은 glucose, fructose, inositol이 검출되었다.

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Bacillus thuringiensis BT17 균주를 이용한 인시목 유충 방제용 미생물 살충제 생산 (Production of Microbial Insecticide Using Bacillus thuringiensis BT17 for the Control of Lepidopteran Larvae)

  • 안경준;이태근
    • 미생물학회지
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    • 제46권4호
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    • pp.389-396
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    • 2010
  • 살충성 독소 결정을 생산하는 Bacillus thuringiensis BT17 균주를 분리하였으며, 16S rRNA 유전자 분석 결과 B. thuringiensis serovar colmeri로 동정하였다. BT17 균주는 인시목 유충에 대해 살충성을 보이는 결정성 독소를 soybean meal과 skim milk를 포함하는 배지에서 $30^{\circ}C$, 280 rpm으로 36시간 진탕배양하였을 때 효율적으로 생산하였다. 200 L fermentor에서 배양하였을 때 균수는 24시간에 최대가 되었으나 독소 결정의 수는 36시간까지 증가하였다. 액상의 미생물 살충제 제품을 제조하였으며, 배양액을 $20^{\circ}C$에서 3개월간 보관시 독소 결정의 수는 보관 초기보다 2배까지 증가하였다. BT17 균주가 포함된 살충제 제품의 효능은 파밤나방보다 배추좀나방에서 좋았으며 동물에 대한 독성은 거의 없었다.

Aspergillus oryzae에 있어서 L-Tyrosine의 분해효소에 관한 연구 (Studies on the Degradation of L-Tyrosine by Aspergillus oryzae)

  • 정동효;박성오;김영진
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제14권2호
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    • pp.131-135
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    • 1971
  • 1. Aspergillus oryzae의 균체에는 L-tyrosine-${\alpha}$-ketoglutaric acid transaminase와 p-hydroxyphenlypyruvic acid oxidase가 존재해 있다. 2. L-Tyrosine 산화효소는 액침배양한 Aspergillus oryzae의 acetone powder, cell free extract 및 배양액에도 존재하며 L-tyrosine은 ${\alpha}$-ketoglutaric acid의 첨가로 더욱 빨리 전환되었다. 3. ${\alpha}$-Ketoglutaric acid와 pyridoxal phosphate는 transamination의 amino기의 수용체로 생각되었다. 4. 이들 효소계는 L-tyrosine와 p-hydroxyphenlypyruvic acid를 homogentisic acid로 산화시켰다. 5. Ascorbic acid는 p-hydroxyphenlypyruvic가 homogentisic acid로 산화되는데 특별한 역할을 하는 것 같다. 6. L-Tyrosine-${\alpha}$-ketoglutaric acid transaminase와 p-hydroxyphenlypyruvic acid oxidase의 최적 pH는 각 각 pH $6.0{\sim}6.5$와 pH 7.5이었다.

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Trichosporon cutaneum의 균체생육(菌體生育) 및 Lipase 생산(生産)에 미치는 당류(糖類)의 영향 (Effect of Sugars on Cell Growth and Lipase Production by Trichosporon cutaneum)

  • 김성열
    • 농업과학연구
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    • 제4권1호
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    • pp.105-111
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    • 1977
  • 전보(前報)에 이어 Trichosporon cutaneum의 lipase 생산(生産)에 미치는 당류(糖類)의 영향을 더욱 검토(檢討)하기 위(爲)하여 몇가지 당류(糖類)를 첨가(添加)한 대두분추출액(大豆粉抽出液) 기본배지(基本培地)를 151bs에서 20분간(分間) 살균(殺菌)하였을때 일어나는 pH 및 착색도변화(着色度變化), 착색물질(着色物質)이 균체(菌體)의 생육(生育) 및 lipase 생산(生産)에 미치는 영향, 그리고 $30^{\circ}C$에서 진탕 배양(培養)하면서 배양중(培養中)의 pH 변화(變化)와 균체(菌體)의 생육(生育) 및 lipase 생산(生産)과의 관계(關係)를 검토(檢討)하여 아래와 같은 결과(結果)를 얻었다. 1. 대두분추출액(大豆粉抽出液) 기본배지(基本培地)에 각중당류(各種糖類)를 첨가(添加)하여 살균(殺菌)하였을 때 일어나는 갈변(褐變)은 xylose 첨가구(添加區)가 가장 심(甚)하고 다음이 galactose와 mannose, glucose 첨가구(添加區)의 순(順)이 었고 maltose와 sucrose 첨가구(添加區)는 당무첨가구(糖無添加區)와 별차이(別差異)가 없었다. 2. 살균후(殺菌後)에 갈변(褐變)이 심(甚)한 것일수록 pH가 낮았다. 3. 살균중(殺菌中)에 형성(形成)된 착색물질(着色物質)은 당(糖)의 종류(種類)에 비(比)하여 균체(菌體)의 생육(生育)및 lipase 생산(生産)에 미치는 영향이 작았다. 4. lipase 생산량(生産量)이 많을수록 균체(菌體)의 생산량(生産量)이이 작았다. 5. 살균중(殺菌中)의 갈변(褐變)이 가장 심(甚)한 xylose 첨가구(添加區)에서는 균체(菌體)의 증식(增殖) 및 lipase 생산저해작용(生産沮害作用)이 약천(若千) 약화(弱化)되었다. 6. 균체(菌體)의 증식(增殖)이 왕성(旺盛)할수록 배지(培地)의 pH가 낮아졌다.

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