• 제목/요약/키워드: liquid culture

검색결과 1,028건 처리시간 0.032초

In-Vitro Fertilization and Culture of Pig Oocytes Matured In-Vitro by Liquid Boar Sperm Stored at 4$^{\circ}C$

  • Kim, M. Y.;Y. J. Yi;Y. J. Chang;Park, C. S.
    • 한국동물번식학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국동물번식학회 2003년도 학술발표대회 발표논문초록집
    • /
    • pp.63-63
    • /
    • 2003
  • This study was carried out to investigate the effects of liquid boar sperm stored at 4$^{\circ}C$ on sperm motility, normal acrosome, and in-vitro fertilization and culture of pig oocytes matured in-vitro. The sperm-rich fraction (30~60 ml) of ejaculate was collected into an insulated vacuum bottle. Semen was slowly cooled to room temperature (20~23$^{\circ}C$) by 2 h after collection. Semen was transferred into 15 ml tubes, centrifuged at room temperature for 10 min at 800$\times$g, and the supernatant solution was poured off. The concentrated sperm was resuspended with 5 ml of lactose, egg yolk and N-acetyl-D-glucosamine (LEN) diluent to provide 1.0$\times$10$^{9}$ sperm/ml at room temperature. The resuspended semen was cooled in a refrigerator to 4$^{\circ}C$ and preserved for 5 days to examine sperm motility and normal acrosome. The medium used for oocyte maturation was modified tissue culture medium (TCM) 199. After about 22 h of culture, oocytes were cultured without cysteamine and hormones for 22 h at 38.5$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air. Oocytes were inseminated with liquid boar sperm stored at 4$^{\circ}C$ for 2 days after collection. Oocytes were coincubated for 6 h in 500 ${mu}ell$ mTBM fertilization media with 0.2, 1, 5 and 10$\times$10$^{6}$ /ml sperm concentration, respectively. At 6 h after IVF, oocytes were transferred into 500 ${mu}ell$ Hepes-buffered NCSU-23 culture medium for further culture of 6, 48 and 144 h. There were significant differences in sperm motility and normal acrosome among preservation days and incubation times, respectively. The rates of sperm penetration and polyspermy were higher in 5 and 10$\times$10$^{6}$ sperm/ml than in 0.2 and 1$\times$10$^{6}$ sperm/ml. Male pronuclear formation was lower in 0.2$\times$10$^{6}$ sperm/ml than in 1, 5 and 10$\times$10$^{6}$ sperm/ml. Mean numbers of sperm in penetrated oocyte were highest in 10$\times$10$^{6}$ sperm/ml compared with other sperm concentrations. The rate of blastocysts from the cleaved oocytes (2~4 cell stage) was highest in 1$\times$10$^{6}$ sperm/ml compared with other sperm concentrations. In conclusion, we found out that liquid boar sperm stored at 4$^{\circ}C$ could be used for in-vitro fertilization of pig oocytes matured in-vitro. Also, we recommend 1$\times$10$^{6}$ ml sperm concentration for in-vitro fertilization of pig oocytes.

  • PDF

목질진흙버섯(Phellinus linteus)의 적합한 균사생장 (Favorable Conditions for Mycelial Growth of Phellinus linteus)

  • 이원호;김수영;박영진;김태웅;김호경;성재모
    • 한국균학회지
    • /
    • 제32권2호
    • /
    • pp.95-100
    • /
    • 2004
  • 목질진흙버섯의 균사생육에 적합한 배지로는 MYA(malt yeast agar)와 SMS(soybean flour malt extract sugar)이며, MYA를 기본배지로 사용하였다. 균사생육은 $30^{\circ}C$의 온도와 pH는 5.0에서 생장이 양호하였다. 영양원으로는 malt extract 2%, yeast extract 0.2%와 $KH_{2}PO_{4}$ 0.1% 상태에서 균사생장 및 밀도가 양호하였다. C/N비는 10 : 1의 비율이 가장 적합하였다. 삼각플라스크배양을 위해서는 용기부피 300 ml Shake flask에 100 ml의 배양액을 넣고 $5{\sim}6$개 균사체 절편을 접종하여 20일간 배양하면 높은 고립상의 균체를 양호하게 증식시킬 수 있었다. 대량 액체종균 배양을 위해 접종원을 균질기로 분쇄하여 통기량 2.0 vvm의 조건에서 12일 배양하면 높은 균사의 생장을 보였고 접종에도 수월하였다.

마디 절편의 현탁배양에 의한 카사바의 미세증식 (Micropropagation of Cassava by Suspension Culture Derived from its Nodal Explants)

  • 윤실;조덕이;소웅영
    • 식물조직배양학회지
    • /
    • 제27권3호
    • /
    • pp.185-189
    • /
    • 2000
  • 카사바 (Manihot esculenta Crantz, cv. MCol 22)의 마디 절편을 MS 기본배지에 3종류의 사이토키닌을 여러 농도로 첨가한 조건에서 2주동안 현탁배양한 결과, 고체배지에서 3주 배양된 것보다 훨씬 생장이 효과적이었다. 현탁배양된 유식물에서는 과수화현상이 나타났으나, 이들을 세사 (마사토 + 1/2농도의 크놉씨액)를 담은 유리배양병에 이식하여 생육시킨 결과, 유경에서 새 잎이 신장되면서 과수화를 벗어나 4주후에는 4~6개의 마디를 가진 유경길이 3~5 cm의 정상 유묘로 생장됨으로서, 목본식물인 카사바의 경우 마디절편의 현탁배양에 의한 대량증식의 가능성을 확인했다. 현탁배양시 저농도의 제아틴 (0.01-0.05 mg 1$^{-1}$) 처리는 BAP 최적조건에서 보다 2배나 길게 부정아 길이를 신장시켰다. 사이토키닌 처리로 부정아가 잘 발생된 유식물은 토양이식 작업을 간편하게 했으며, 토양 이식 후 부정근을 활발히 발생시켜 one step culture시스템 배양이 가능하게 했다. 과수화된 유식물은 기외에서 순화가 어려웠으나 유기물이 혼입되지 않은 세사를 담은 유리배양병에서는 비무균조건일지라도 95% 이상 순화될 수 있었다.

  • PDF

액체배지 첨가에 의한 장미 기내 신초 증식 촉진 (Promotion of in vitro shoot proliferation in rose by addition of liquid medium to culture)

  • 이예지;이정림;형남인;김성태;이은경;권오현;김원희;이수영
    • Journal of Plant Biotechnology
    • /
    • 제39권4호
    • /
    • pp.305-308
    • /
    • 2012
  • 장미 기내 신초 생육을 촉진시키고자 액체배지 첨가 실험을 실시하였다. 국립원예특작과학원 육성 신품종 '엔텍컬', '샤이니오렌지', '화이트젠', '레드젠' 등 4품종의 internode를 기내 도입한 후, 2회의 계대배양에 의해 신초를 증식하였다. 10~15 mL의 액체배지 첨가에 의해 4품종 모두 신초의 신장이 촉진되었고, 증식력에 있어서는 품종간 차이를 보였다.

Bacillus subtilis 균주로 발효한 죽순발효액의 품질특성 (Quality Characteristics of Bamboo Shoot Liquid Fermented by Bacillus subtilis Strain)

  • 백병기;조정일;문은우;박정숙
    • 한국식생활문화학회지
    • /
    • 제30권2호
    • /
    • pp.233-240
    • /
    • 2015
  • To make fermented bamboo shoot liquid, we isolated and classified a microorganism growing in bamboo shoot and investigated its quality characteristics. Crude fiber, crude ash, nitrogen-free extracts, and total sugar contents were higher after fermentation. For free amino acids, only alanine was detected in the control group. Detected 13 kinds of free amino acids were detected in fermented bamboo shoot liquid. In organoleptic test, fermented bamboo shoot beverage containing 20 percent strawberry showed the highest consumer preference.

Cultural Characteristics of Shimizuomyces paradoxus Collected from Korea

  • Sung, Gi-Ho;Shrestha, Bhushan;Park, Ki-Byung;Sung, Jae-Mo
    • Mycobiology
    • /
    • 제38권3호
    • /
    • pp.189-194
    • /
    • 2010
  • This study investigated the cultural characteristics of Shimizuomyces paradoxus in different nutritional and environmental conditions. The highest mycelial growth was observed in Schizophyllum (mushroom) genetics complete medium plus yeast extract agar medium, and the optimal temperature and pH were $25^{\circ}C$ and pH 8.0, respectively. The optimal carbon and nitrogen sources were 1% dextrose and 1% peptone in agar. However, in liquid culture the highest dry mycelium weight was found for the potato dextrose agar and potato sucrose agar broths. The optimum inoculum size was five mycelial discs (5 mm) per 100 mL of broth, and the optimum liquid culture period was 25 days. This is the first ever report of S. paradoxus cultural characteristics.

남은 음식물의 습식효모배양에서 영양물질첨가가 효모증식에 미치는 영향 (Influence of Nutrient Addition in the Liquid Yeast Fermentation of Pulverized Food Wastes)

  • 이기영;유성진;채희정
    • 유기물자원화
    • /
    • 제9권1호
    • /
    • pp.49-55
    • /
    • 2001
  • 남은 음식물을 갈아 액상으로 만든 기질을 이용하여 생효모를 함유한 생균제제사료(probiotics)를 생산하기 위해 효모의 호기적 액상발효를 시도하였다. 기질의 영양조성의 최적화를 위해 미리 진탕배양한 결과를 토대로 액상의 남은 음식물 기질에 우레아($0.5g/{\ell}$), 당밀($4g/{\ell}$), O-phosphate($0.4g/{\ell}$), yeast extract($1g/{\ell}$)를 첨가하여 2리터 용량의 발효기를 이용하여 Kluyveromyces marxianus와 Aspersillus. oryzae를 접종하여 통기발효 시킨 결과 12시간 내에 $1.4{\times}10^{10}/liter$의 생균효모농도를 얻을 수 있었다.

  • PDF

액체배양에서 잣버섯 균사체 배양에 관한 연구 (A study on the Mycelial Growth of Lentinus lepideus in Liquid Culture)

  • 신성의;차월석;강시형
    • 생명과학회지
    • /
    • 제13권4호
    • /
    • pp.492-497
    • /
    • 2003
  • 액체배양을 이용한 잣버섯(Lentinus lepideus KACC 50120)의 균사체 생육에 관한 결과로는 최적온도는 $25^{\circ}C$이고, 최적 pH는 5.5이었다. 공시배지중에서 최대 균사 생육을 보인 최적배지는 YMG 배지로 조사되었다. YMG 배지를 기본배지로 하여 영양 요구성 실험을 한 결과 탄소원 선발 및 최적 농도에서는 최적 탄소원은 glucose이고 최적 농도는 4.0%(w/v)이며 질소원 선발 및 최적 농도에서는 malt extract와 yeast extract를 혼합하여 사용하였을 때 최대 균사 생육을 보였고, 상기의 두가지 복합질소원을 1:1의 무게비로 혼합하여 1.5%(w/v)농도로 첨가하였을 때 균사생육이 가장 양호하였다.

액체배양에서 Monascus purpureus P-57 변이주의 색소생성 최적조건 (Optimization of Pigment Production of Monascus Purpureus P-57 in Liquid Culture)

  • 박치덕;정혁주;유대식
    • KSBB Journal
    • /
    • 제20권1호
    • /
    • pp.66-70
    • /
    • 2005
  • 본 연구는 Monascus purpureus P-57 변이주를 이용하여 액체배양을 통한 세포내 색소 생성의 최적 배양조건을 규명 하고자 하였다. M. purpureus P-57의 색소생성을 위한 최적 배지조성은 $4\%$ rice powder, $0.1\%$ beef extract, $0.03\%$ glutamic acid, $0.1\%\;MgSO_4{\cdot}7H_2O,\;0.25\%\;KH_2PO_4$이며, 배지의 pH는 5.0이였다. 그리고 최적 배양조건은 $30^{\circ}C$ , 150 rpm에서 8일간 배양했을 때 가장 높은 색소 생성력을 나타내었다. M. purpureus P-57을 이상의 최적 조건에서 배양했을 때 적색 색소가 356.04 mit, 황색 색소가 268.20 unit으로 가장 많은 색소를 생성하였고, 균체량은 15.00 g/L를 생산할 수 있었다.

팽나무버섯(Flammulina velelutipes)균의 액체배양 생장조건 규명(Growth condition of Flammulina velutipes in Liquid culture)

  • 홍성준;이원호;박기범;박기병;성재모
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
    • /
    • pp.355-358
    • /
    • 2001
  • 팽나무버섯균의 배양환경조사에서 최적배양온도는 $20^{\circ}C$, pH는 $6.0{\sim}7.5$ 탄소원은 yellow sugar. potato starch. 질소원은 soybean flour. Yeast extract. 무기염류는 $KH_2PO_4,\;MgSO_4,\;7H_2O$를 0.05%(w/v)에서 우수한 생장을 나타냈다. 액체종균 배양 실험에서는 전 배양시 erlenmeyer flask에서 6 일간 $21^{\circ}C$, 125rpm으로 배양 후 본 배양시 5% 접종량, 1.0vvm 통기로 4-5 일 배양하였을 때 균체량이 높게 나타났다.

  • PDF