The contents of starch, moisture, crude protein, crude fat, crude fiber, and ash of different varieties of various crops such as brown rice, barley, corn, sweet potato were analyzed. The average starch contents of brown rice, barley, corn, and sweet potato were $70.1{\pm}0.4\;{\sim}\;72.2{\pm}2.1$, $68.7{\pm}0.2\;{\sim}\;71.4{\pm}1.2$, $67.6{\pm}0.8\;{\sim}\;69.4{\pm}1.8$, and $21.7{\pm}0.9\;{\sim}\;28.3{\pm}0.5%$, respectively. The ground powder of each starchy substrate was suspended in distilled water, and then liquefied, saccharified, and fermented by dried active yeast at 32 for 4 days. By statistical analysis, the effectiveness of the contents of the different components such as starch, moisture, crude protein, crude fat, crude fiber, and ash of the crops on the ethanol production were examined. The results showed that the starch content positively affected the ethanol production in all the tested cereals and sweet potato. In brown rice, ash content affected negatively the ethanol production. In barley, protein content affected negatively the ethanol production, while fiber content affected positively the ethanol production. The sweet potato containing higher content of moisture produced less amount of ethanol.
A liquefied seasoning material was manufactured by using the enzymatic hydrolysis for the benefit of highly effective utilization of cockle shell by-product, and their quality was investigated. The weight ratio of by-product to whole cockle shell was 32.7%, and the contents of moisture and crude protein in the raw cockle shell by-product were 83.1% and 10.7%, respectively. The optimal concentrations of protease such as Protease N. P.(Pacific Chemical Co.) and Alcalase(Noo co), used in order to reduced the hydrolysis period, were effective at 4%(w/w), and optimal hydrolyzing time was 8 hours and after 8 hours were little changed. To improve flavor of the liquefied seasoning material, by Maillard reaction used thermal treatment, addition of glucose was very effective. And addition in hydrolysate with 10% glucose, 9% table salt, 2% starch and 0.5% caramel were suitable for promotion of taste. Total nitrogen and amino type nitrogen in the product were 1,607mg% and 1,264mg%, respectively. And the ratio of amino type nitrogen to the total nitrogen was 78.6%. The major free amino acid were glutamic acid, lysine, leucine, valine and aspartic acid, and content of glutamic acid was 1,027.5mg%.
A maltogenic amylase gene from Lactobacillus gasseri ATCC33323 (LGMA) was expressed in Lactococcus lactis MG1363 using the P170 expression system. The successful production of recombinant LGMA (rLGMA) was confirmed by the catalytic activity of the enzyme in liquid and solid media. The N-terminal amino acid sequencing analysis of the rLGMA showed that it was Met-Gln-Leu-Ala-Ala-Leu-, which was the same as that of genuine protein, meaning the signal peptide was efficiently cleaved during secretion to the extracellular milieu. The optimal reaction temperature and pH of rLGMA ($55^{\circ}C$ and pH 5, respectively) and enzymatic hydrolysis patterns on various substrates (${\beta}$-cyclodextrin, starch, and pullulan) supported that rLGMA was not only efficiently secreted from the Lactococcus lactis MG1363 but was also functionally active. Finally, the branched maltooligosaccharides were effectively produced from liquefied com starch, by using rLGMA secreted from Lactococcus lactis, with a yield of 53.1%.
Kim, Chul-Ho;Lee, Gyun-Min;Han, Moon-Hi;Rhee, Sang-Ki
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.15
no.6
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pp.430-435
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1987
A chitin-immobilized enzyme amyloglucosidase(AMG) and a bacterium Zymomonas mobilis were coentrapped in alginate gel beads. Ethanol production was performed in a packed bed column reactor in a simultaneous saccharification and fermentation(SSF) mode using liquefied sago starch as a substrate. It was found that this process eliminated product inhibition and reverse reaction of glucose enhancing the rate of saccharification and ethanol production. At a low dilution rate of D = 0.11 hr$^{-1}$, the steady-state ethanol concentration was 46.0g/$m\ell$ (96.8 % of theoretical yield). The maximum ethanol productivity was 17.7g/$m\ell$, h at D = 0.83 hr$^{-1}$ when the calculation was based on the total working volume. The continuous production of ethanol was maintained stably over 40 days without problems in this reactor system.
Cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) was purified from the culture broth of the Bacillus firmus var. alkalophilus, using ultrafiltration, starch adsorption/desorption, ion-exchange chromatography on DEAE-cellulose and gel filtration on Sephacryl HR-100. The molecular weight of the purified enzyme was determined as 77,000 by SDS-PAGE. The optimum pH and temperature for the CD synthesis were 6.0 and 5$0^{\circ}C$, respectively. The activity of this enzyme was stably kept at the range of pH 6.0~9.5 and up to 5$0^{\circ}C$. However, in the presence of $Ca^{2+}$, the optimum temperature for CD synthesis was shifted 55~6$0^{\circ}C$ and this enzyme was stable up to 6$0^{\circ}C$ because of the stabilizing effect of $Ca^{2+}$. The purified CGTase produced CDs with high conversion yields of 45~51% from sweet potato starch, com starch and amylopectin as substrate, especially, and the product ratio of $\beta$-CD to ${\gamma}$-CD was obtained at range of from 5.8:1 to 8.4:1 according to the kind of substrate. The purified enzyme produced mainly $\beta$-CD without accumulation of $\alpha$-CD during enzyme reaction using various starches as the substrate, indicating that the purified enzyme is the typical $\beta$-CGTase. The purified CGTase produced 25 g/l of CDs from 5.0% (w/v) liquefied com starch and the conversion yield of CDs was 50%, and the content of $\beta$-CD was 84% of total CDs after 8 hours under the optimum reaction condition.ion.
STA gene coding glucoamylase was introduced into haploid Saccharomyces cerevisiae SHY3 and polyploid Saccharomyces cerevisiae 54. We constructed the recombinant plasmid by substituting the promoter region of alcohol dehydrogenase isoenzyme I gene for that of STA gene to increase the expression of STA gene and found that the activity of glucoamylase was increased in transformants. The plasmid stability was improved remarkably when we got the STA gene into the plasmid which had centromere. The activity of glucoamylase and transformation frequency of it, however, was decreased because of low copy number. Industrial polyploid strain was transformed with the recombinant plasmid having the $2\mu$ origin of replication and STA gene. It produced more alcohol than host when fermented in liquefied starch media. The industrial strain, however, was not transformed with the autonomously replicating plasmid containing centromere.
The contents of starch, moisture, crude protein, crude fat, crude fiber, and ash of different varieties of potatoes were analyzed. The average starch contents of Go-woon, Ha-ryoung, Dae-seo, Jo-won, Ga-won potatoes were $17.9{\pm}0.2$, $18.0{\pm}1.7$, $17.7{\pm}0.5$, $14.8{\pm}0.4$, and $16.2{\pm}1.0%$, respectively. The ground powder of each starchy substrate was suspended in distilled water, and then liquefied, saccharified, and fermented by Saccharomyces cerevisiae ATCC26603 at $30^{\circ}C$ for 4 days. By statistical analysis, the effectiveness of the contents of the different components of the potato tubers on the ethanol production were examined. The results showed that the starch content positively affected the ethanol production. while moisture content affected negatively the ethanol production. Ethanol production from the 5 different varieties of potato tubers harvested on different time were examined and the results indicated that both of potato variety and the harvesting-time significantly affected the ethanol production. Among the several varieties of potato, Ha-ryoung produced the highest yield of ethanol as much as $94.3{\pm}1.9$ L/ton or $3111{\pm}62.7$ L/ha.
For fuel alcohol production, enzymatic liquefaction and saccharification of tapioca starch by ${\alpha}$-amylase and glucoamylase were studied. The thermophilic ${\alpha}$-amylase Termamyl produced from Bacillus licheniformis gave a better liquefaction than the relalively low temperature enzyme BAN from B. subtilis. Oplimal temperature and pH with Termamyl were $90∼95^{\circ}C$ and 5.8, respectively. Minimal amount of Termamyl 240uc for a satisfactory liquefaction for a two-hour reaction was about 0.0125% (v/w) with respect to the mass of tapioca used. For saccharification experiments two enzymes, Novo AMG and Do-I1 enzymes were compared. The enzymatic activity of each enzyme was a little different depending on the substrate used and the latter was found to have a significant amount of ${\alpha}$-amylase activity. With Novo AMG optimal temperature was about $58^{\circ}C$ The pH optimum was 4.3 with maltose, however, with tapioca, no difference was observed between pH 4.3 and 5.7 which is a natural, unadjusted pH of liquefied tapioca. For 85% of completion of saccharification, it was necessary to use 0.0625% (v/w) of Novo AMG 400L for tapioca and to run the reaction for more than 10 hr, Packed volume of solid particles in tapioca slurry remained at around 30% during liquefaction and saccharification. This indicates that the removal of the solid particle before fermentation is not economically feasible at all, even though the solid particles make it very difficult to operate the bioreactor in a continuous mode with cell-recycle.
The stabilities of O/W emulsions (lipophilic core material:lipophobic wall material=3:2, w/w) containing various kinds of emulsifiers were compared to determine the optimal conditions of the HLB (hydrophilic lipophilic balance) value, the concentration and composition of emulsifier, the ratio of core material to the wall material, and the concentration and composition of polymers in the wall material. The effect of different chemical types of emulsifiers and the influence of single vs. binary emulsifier systems were compared with 13 kinds of emulsifier HLB values of $0.6{\sim}16.7$ at the concentration of 0.50%(w/w). The emulsion system was stable (more than 99.0 of ESI value) when the HLB value of the emulsifier was more than 11.0 or less than 2.8 of emulsifier HLB value. But it was unstable (less than 40.0 of ESI value) at the HLB value of the emulsifier between 3.4 and 8.6. Especially, we could find out the emulsion containing the emulsifier of polyglycerol polyricinoleate (PGPR, HLB 0.6) became stable creamy state. And, the ESI value of binary emulsifier system containing 0.25%(w/w) of PGPR and 0.25%(w/w) of polyoxyethylene sorbitan monolaurate (PSML, HLB 16.7) was higher than that of any single emulsifier system at the concentration of 0.50%(w/w). The highest emulsion stability was obtained in the liquefied wall material composed of 0.25%(w/v) of waxy corn starch and 0.50%(w/v) of agar.
Njoroge, Rose Nyawira;Li, Dan;Park, Jong-Tae;Cha, Hyun-Ju;Kim, Mi-Sun;Kim, Jung-Wan;Park, Kwan-Hwa
Food Science and Biotechnology
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v.14
no.6
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pp.860-865
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2005
A gene for a putative glucoamylase, stg, of a hyperthermophilic archae on Sulfolobus tokodaii was cloned and expressed in Escherichia coli. The recombinant glucoamylase (STGA) had an optimal temperature of $80^{\circ}C$ and was extremely thermostable with a D-value of 17 hr. The pH optimum of the enzyme was 4.5. Being different from fungal glucoamylases, STGA hydrolyzed maltotriose (G3) most efficiently. Gel permeation chromatography and sedimentation equilibrium analytical ultracentrifugation analysis showed that the enzyme existed as a dimer. STGA was stable enough to hydrolyze liquefied com starch to glucose in 4 hr at $90^{\circ}C$ with a yield of95%. Comparison of the $k_{cat}$ values for the hydrolysis and the reverse reaction at $75^{\circ}C$ and $90^{\circ}C$ indicated that glucose production by STGA was more efficient at $90^{\circ}C$ than $75^{\circ}C$. Therefore, STGA showed great potential for application to the industrial glucose production process due to its high thermostability.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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