protein phosphatase 2A는 bovine brain homogenate의 세포질 fraction에서 얻어졌다. 기질로서 인산화된 histione H1을 이용하여 측정한 phosphatase 의 활성은 dipalmitoyIphophatidylcholine(DPPC) 혹은 phosphatidylserine/DPPC의 혼합물로 구성된 liposome의 존재하에서 저해되었다. Protein phosphatase 2A의 lipid membrane에의 결합은 다중층 지질막의 혼합물 계에서 liposome 의 양이 증가함에 따라서 상등액 중의 phosphatase의 활성이 감소하는 것으로 확인할 수 있었다. 또한 [$^{125}I$]protein phosphatase 2A가 liposome과 동시에 용출되는 것으로도 확인되었다. 그러나 liposome에 대한 protein phosphatase의 친화력은 높지 않았다. 한편, okadaic acid와 liposome은 협동으로 phosphatase의 활성을 감소시켰다. 이것은 okadaic acid가 lipid membrane이나 membrane에 결함한 phosphatase에는 결합하지 않는다는 것을 의미한다. 그러므로 lipid membrane에 의한 protein phosphatase 2A의 활성 저해 효과는 phosphatase 2A와 lipid membrane과의 결합에 의한 것이라고 설명될 수있다.
S. epidermidis cell was fractionated into cell wall, cell membrane and cytoplasm. The cell membrane adsorbed the most abundant $\textrm{Pb}_{2+}$ per unit dry weight of the three fractions tested. Adsorption behavior of $\textrm{Pb}_{2+}$ in lipid and protein, which are the main components of the cell membrane, indicated that phosphatidylethanolamine and phosphatidylinositol having phosphoryl group and gangliosides containing carboxyl groups adsorbed much more $\textrm{Pb}_{2+}$ than triglycerides lacking any chargeable functional groups. Protein purified from cell membrane adsorbed larger amount of $\textrm{Pb}_{2+}$ than total native cell membrane or cell membrane lipid.
The effects of lipid peroxidation on the fluidity of the lipid bilayers of the human erythrocyte ghosts and egg-lecithin phospholipid liposomes have been studied. For the measurements of the peroxidation extent and the fluidity of the membranes, the thiobarbituric acid-reactive substances and the fluorescence depolarization of 1, 6-diphynyl-1, 3, 5-hexatriene labelled into the membrane were employed, respectively. The lipid peroxidation was performed in hypoxanthine/xanthine oxidase/ferrous ion, and hydrogen peroxide/ferrous ion systems. The results of these experiments show that both of the xanthine oxidase and hydrogen peroxide systems effectively. The lipid peroxidation decreased the fluidity of the membranes, especially at the very early stage of the peroxidation reaction. The decrease in the fluidity of membrane by the lipid peroxidation has been ascribed to the alteration of the polyunsaturated acyl chains of lipids and cross linkages among the membrane components. However, under drastic condition of lipid peroxidation, tdhe fluidity of the membrane rather increased possibly due to the deterioration of the membrane integrity by the peroxidation. Morphological change of the erythrocyte on peroxidation has also been observed.
The cell membrane, also known as the biological membrane, surrounds every living cell. The main components of cell membranes are lipids and therefore called as lipid membranes. These membranes are mainly made up of a two-dimensional lipid bilayer along with integral and peripheral proteins. The complex nature of lipid membranes makes it difficult to study and hence artificial lipid membranes are prepared which mimic the original lipid membranes. These artificial lipid membranes are prepared from phospholipid vesicles (liposomes). The liposomes are formed when self-forming phospholipid bilayer comes in contact with water. Liposomes can be unilamellar or multilamellar vesicles which comprises of phospholipids that can be produced naturally or synthetically. The phospholipids are non-toxic, biodegradable and are readily produced on a large scale. These liposomes are mostly used in the drug delivery systems. This paper offers comprehensive literature with insights on developing basic understanding of lipid membranes from its structure, organization, and phase behavior to its potential use in biomedical applications. The progress in the field of artificial membrane models considering methods of preparation of liposomes for mimicking lipid membranes, interactions between the lipid membranes, and characterizing techniques such as UV-visible, FTIR, Calorimetry and X-ray diffraction are explained in a concise manner.
Aging is the progressive accumulation of changes with time associated with responsible for the ever-increasing susceptibility to disease and death which accompanies advancing age. Lipid peroxides easily produced in the membrane system by the chain reaction of free radicals which occurred from various environmental factors. The amount of lipid peroxides produced in biological system increased with aging process, and lipid peroxidation damages involved in aging process and pathological disorders. Although lipid peroxides have such deleterious effects on the organisms, there are numerous substances and mechanisms which prevent the reaction of peroxide formation and protect the subject from its toxicity. This review provides an overview of how does lipid peroxidation of unsaturated lipids take place by free radical, and what is the intervention of lipid peroxides in pathogenesis of some human diseases, and also how does food restriction influences the aging process and various pathological disorders. The major focus of this paper is to review the evidence indicating that food restriction retards the aging process, and possible mechanisms of its actions. Therefore, it discussed the effects of age and food restriction on life-span, membrane yield, lipid peroxidation, fatty acid composition and peroxidizability, cholesterol and triglyceride levels, prostaglasndin and thromboxane synthesis, which may be concerned with blood flow, membrane fluidity, homeostasis and glomerular filtration rate in living body.
In order to elucidate the mechanism of the leaf-burning disease of ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer), the relationships between thylakoid membrane peroxidation and chlorophyll bleaching were investigated in comparison with the ones of soybean (Glycine max L). When I measured the rate of lipid peroxidation in the thylakoids of ginseng and soybean by irradiation of light(60 w.m-2), it was identified that, the remarkably lower rate of lipid peroxidation was found in the ginseng thylakoid than the case of soybean. When lipid peroxidation of ginseng thylakoid was induced in the dark, chlorophyll contents of thylakoid was not changed. The results suggest that lipid peroxidation does not affect the chlorophyll bleaching in ginseng thylakoid. Thylakoid membrane peroxidation as well as chlorophyll bleaching was closely related with photosynthetic electron transport. But, according to the quenching experiment active oxygen species induced lipid peroxidation may be different species in the case of chlorophyll bleaching.
Park, Jun-Seop;Jung, Tae-Sang;Noh, Yang-Ho;Kim, Woo-Sung;Park, Won-Ick;Kim, Young-Soo;Chung, In-Kyo;Sohn, Uy Dong;Bae, Soo-Kyung;Bae, Moon-Kyoung;Jang, Hye-Ock;Yun, Il
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제16권6호
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pp.413-422
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2012
The purpose of this study is to investigated the mechanism of pharmacological action of local anesthetic and provide the basic information about the development of new effective local anesthetics. Fluorescent probe techniques were used to evaluate the effect of lidocaine HCl on the physical properties (transbilayer asymmetric lateral and rotational mobility, annular lipid fluidity and protein distribution) of synaptosomal plasma membrane vesicles (SPMV) isolated from bovine cerebral cortex, and liposomes of total lipids (SPMVTL) and phospholipids (SPMVPL) extracted from the SPMV. An experimental procedure was used based on selective quenching of 1,3-di(1-pyrenyl)propane (Py-3-Py) and 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatriene (DPH) by trinitrophenyl groups, and radiationless energy transfer from the tryptophans of membrane proteins to Py-3-Py. Lidocaine HCl increased the bulk lateral and rotational mobility of neuronal and model membrane lipid bilayes, and had a greater fluidizing effect on the inner monolayer than the outer monolayer. Lidocaine HCl increased annular lipid fluidity in SPMV lipid bilayers. It also caused membrane proteins to cluster. The most important finding of this study is that there is far greater increase in annular lipid fluidity than that in lateral and rotational mobilities by lidocaine HCl. Lidocaine HCl alters the stereo or dynamics of the proteins in the lipid bilayers by combining with lipids, especially with the annular lipids. In conclusion, the present data suggest that lidocaine, in addition to its direct interaction with proteins, concurrently interacts with membrane lipids, fluidizing the membrane, and thus inducing conformational changes of proteins known to be intimately associated with membrane lipid.
The purpose of this study was to determine the effects of taurine supplementation on the hepatic lipid peroxidation, activiteis of defense enzymes and membrane stability during rat hepatocarcinogenesis. Hepatocarcinogenesis was induced by Solt & Farber modification. Lipid peroxide contents of carcinogen treated group which was not supplemented with taurine were lower than those of control group. This might be that peroxide is decreased because of the activation of detoxifing enzyme. Glutathione S-transferase(GST) activites of carcinogen treated groups were significantly (p<0.05) increased compared to those of control groups. The GST activities of group supplemented with taurine before treatment of carcinogen and during the all period of experiment were only less increased. In carcinogen treated groups, glutathione peroxidase(GPx) activites of groups supplemented with taurine were higher than those of non supplemented group. By carcinogen treatemtn, glucose 6-phosphatase(G6Pase) activites, index of membrane stability were decreased, but in carcinogen treated groups supplemented with taurine, they were less decreased. These results suggest that taurine supplementation seems to inhibit lipid peroxidation, to change the activities of defense enzymes and to prevent to membrane disintegration during chemically induced hepatocarcinogenesis.
Membrane proteins in highly oriented lipid bilayer samples are useful for membrane protein structure determination. We used in the past planar lipid bilayers which were aligned and supported on the glass slide. These samples were mechanically aligned in a magnetic field. However, these stacks of glass slides with planar lipid bilayers are not well suited for use with a commercial solid-state NMR probe with a round coil. Therefore, a homebuilt solid-state NMR probe was built and used with a stack of thin glass plates wherein the RF coil was wrapped directly around the flat square sample. Recently, we began to use magnetically aligned bicelles that are suitable for the structure determination of membrane proteins by solid-state NMR spectroscopy without any effort to build a flat square coil probe. These bicelle samples are well suited for use with a commercial solidstate NMR probe with a round coil, are very easy to prepare and are very stable, so that they can be kept for more than a year. In this paper, we present the solid-state NMR spectra of optimized and magnetically oriented bicelle samples of membrane proteins.
Caveolae are small plasma membrane invaginations that play many roles in signal transduction, endocytosis, mechanoprotection, lipid metabolism. The most important protein in caveolae is the integral membrane protein, caveolin, which is divided into three families such as caveolin 1, caveolin 2, and caveolin 3. Caveolin 1 and 3 are known to incorporate palmitate through linkage to three cysteine residues. Regulation of the protein palmitoylation cycle is important for the cellular processes such as intracellular localization of the target protein, membrane association, conformation, protein-protein interaction, and activity. However, the detailed aspect of individual palmitoylation has not been studied. In the present work, the role of each lipid modification at three cysteines was studied by NMR. Our results suggest that each lipid modification at the natively palmitoylation site has its own roles. For example, lipidations to C106 and C129 are play a role in structural stabilization, however, interestingly, lipid modification to C116 interrupts the structural stabilization.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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