수산물 추출물로부터 간세포내 지질축적억제효과 추출물의 탐색을 통해 지방간 형성 억제 활성물질을 밝힐 목적으로, 각 48종의 수산물 추출물의 사람 간암세포유래인 HepG2 세포주에서의 중성지질축적억제 효과를 조사하였다. 그 결과, 18개의 추출물에서 유의적인 지질축적억제효과를 보였고, 그 중 Pagrus major, Octopus minor, Enteroctopus dofleini, Undaria pinnatifida Sporophyll, Styela clava, Enteromorpha intenstinalis 등 6개의 추출물이 유효한 효과가 있음을 관찰하였다. 이상의 결과를 바탕으로 지질대사에 관여하는 단백질들의 발현 정도를 조사하고, 활성물질의 분리 및 정제 등에 관한 연구와 지방간 형성 억제 효과에 대한 기전 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.
This study was carried out to investigate the effects of Salvia plebeia R. Br. ethanolic extract with different aspects (stem/leaf and whole plant) on differentiation and lipid accumulation in 3T3-L1 preadipocytes. The morphological changes and the degrees of lipid accumulation in 3T3-L1 cells were measured by Oil Red O staining and intra-cellular triglyceride (TG) assay. The mRNA expressions of special peroxisome proliferation activated receptor- genes (PPAR), CCAAT/ enhancer-binding protein (C/$EBP{\alpha}$), fatty acid synthase (FAS) and lipoprotein lipase (LPL) were detected by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). The 50% ethanolic extracts ($100{\mu}g/mL$) of stem and leaf (SALE) and 30% ethanolic extracts (100 g/mL) of whole plant (SAE) from Salvia plebeia R. Br. were significantly attenuated lipid accumulation during adipogenesis in 3T3-L1 cells. Ethyl acetate-soluble fractions ($50{\mu}g/mL$) significantly inhibited lipid droplet accumulation in 3T3-L1 cells. In addition, SALE induced down-regulation of specific adipogenic transcriptional factors (C/$EBP{\alpha}$ and $PPAR{\gamma}$) and target genes (FAS and LPL) during adipogenesis. Salvia plebeia R. Br. may be used as a safe and efficient natural substance to manage obesity.
본 연구에서는 솔잎 추출물(PDL)의 항비만활성을 검증하기 위해, PDL이 3T3-L1에서 DMI/insulin에 의해 유도되는 과도한 지질 형성을 억제하는지 평가하였다. 본 결과를 미루어 볼 때, PDL은 지방세포의 adipogenesis과 관련된 PPARγ, CEBPα 그리고 perilipin-1의 발현을 억제하여 과도한 지질형성을 억제하는 것으로 판단되며, PDL은 향후 비만 예방 및 치료를 위한 잠재적 소재로 활용이 가능할 것으로 판단된다. 그러나 본 연구는 PDL이 항비만 활성이 있는지 검증한 초기 단계 연구로 추가적인 기전연구와 동물기반 전임상 항비만활성 검증이 필요하다.
본 연구에서는 누룩에서 ornithine 생성능을 보유하고 있는 Pediococcus 속 균주를 동정하고, ornithine 생성 유산균인 Pediococcus pentosaceus TNO-4를 이용하여 막걸리를 제조하였다. Ornithine의 전구물질인 arginine과 Pediococcus pentosaceus TNO-4를 첨가하여 제조한 ornithine 함유 막걸리의 ornithine 함량을 측정하고 세포 수준에서의 지방구 형성 억제 효과를 통한 항비만 효과를 평가하였다. Ornithine 막걸리의 ornithine 함량은 일반 막걸리에 비하여 3배 증가되었으며, 세포 실험 결과 0.05 mg/mL 농도의 ornithine 막걸리를 3T3-L1 세포에 처리하였을 때 독성이 없는 수준에서 유의적으로 지방구 형성을 억제하는 것을 관찰하였다. 본 연구를 바탕으로 후속 연구가 이루어진다면 기능성 물질이 강화된 우리나라 전통술인 막걸리를 통하여 지질축적 억제를 통한 항비만 효과를 기대해 볼 수 있을 것이라 사료된다. 더 나아가서 기능성이 부각된 막걸리의 개발을 통하여 막걸리 시장에 새로운 판로를 개척할 수 있고, 누룩에서 분리된 ornithine 생성능을 가진 유산균은 막걸리 이외에 여러 가지 발효식품에도 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
미세조류는 육상 식물과 비교하여 높은 성장률을 나타내며 다량의 지질과 탄수화물을 축적할 뿐 아니라 카로테노이드, 폴리페놀과 같은 생리활성 물질들을 체내에 축적하므로 바이오 에너지 및 기타 산업의 유망한 재료로 인식 되어왔다. 미세조류의 온도, 염분, 빛 등 비생물적 스트레스와 다양한 배양 조건에 따른 생화학 물질의 축적 변화 양상에 대한 연구는 많이 진행되어 왔지만 그러한 조건들의 동시적인 효과에 따른 성장과 생화학물질 조성 변화에 대한 연구는 거의 진행되지 않았다. 따라서 이번 연구에서는 산업적으로 많이 활용되고 있는 두 해양 미세조류인 Chlorella vulgaris와 Nannochloropsis granulata의 염분(10, 30, 50 psu) 및 온도(20, 25, $30^{\circ}C$)의 동시 배양 조건에 따른 바이오 매스의 변화와 바이오 에너지에 사용되는 중성지질 및 녹말의 축적 변화를 회분배양의 실험적 조건에서 측정하였다. 그 결과 $30^{\circ}C$, 30 psu 조건에서 C. vulgaris 및 N. granulata 모두 가장 높은 성장을 나타냈고, 광합성 색소인 chlorophyll a 및 carotenoid의 축적 양상이 온도 의존적으로 증가하였으며 중성지질과 녹말의 축적은 염분과 온도의 조합에 따라 두 종의 양상이 서로 다르게 나타나는 사실을 확인할 수 있었다. 이를 통해 미세조류의 염분에 의한 성장과 중성지질 및 녹말의 축적 양상은 서로 다른 온도 조건에 따라 그 변화 정도가 다르게 나타날 수 있다는 사실을 확인할 수 있었다.
본 연구에서 동과 물추출물의 계통분획을 통해 획득된 세가지 분획물인 핵산 분획(BHHH), 클로로포름 분획(BHHC), 에틸아세테이트 분획(BHHE)들을 3T3-L1 분화과정 중에 처리한 후, Oil Red O 염색법에 의한 lipid accumulation, 지방구내 triglyceride 함량을 평가하고, free glycerol release 함량과 adipogenesis와 관련된 transcription factor들의 발현 함량을 비교하여 동과 물추출물 중 anti-adipogenesis 활성 분획물을 밝히고, 이 분획물의 작용 메커니즘을 규명하고자 하였다. 50 ${\mu}g/mL$ 농도의 BHHC와 BHHE의 처리는 분화된 지방세포 내 지질 축척을 11%와 13%로 낮추었다. 지방세포 내 중성지방(TG)의 함량은 동일 농도의 각 분획물에서 21%와 16%로 낮게 나타났다. TG 함량의 감소와 지방구내 지질 축적의 감소, 즉 anti-adipogenesis 메커니즘을 밝히기 위해 free glycerol 분비량을 평가하였다. 동일 농도의 BHHC와 BHHE에서 각각 13%와 17% 감소되어 나타났다. BHHC와 BHHE는 세포가 분화하는 동안 $PPAR{\gamma}$, C/$EBP{\alpha}$, leptin의 mRNA 발현을 억제하는 것으로 나타났다. 특히 BHHE의 경우 각 transcriptional factor들의 발현을 45%, 67%, 35%로 현저히 억제시키는 우수한 anti-adipogenetic 소재로 나타났다. 이에 BHHE는 항비만 기능성 소재로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
Objectives : We investigated the effects of fermented soybean(FSOB) on body weight and examined whether hepatic lipid accumulation are inhibited by it in high fat diet-fed obese male mice. Methods : 8 weeks old, high fat diet-fed obese male mice were divided into 5 groups: C57BL/6N normal, control, FSOB(1), (2) and (3). After mice were treated with FSOB for 9 weeks, we measured body weight gain, food intake, feeding efficiency ratio, fat weight, plasma leptin and lipid levels. We also did histological analysis for liver and fat on the mice. Results : 1. Compared with controls, FSOB-treated mice had lower body weight gain and adipose tissue weight, the magnitudes of which were prominent in FSOB(3) and FSOB(1). 2. Compared with controls, FSOB-treated mice had lower feeding efficiency ratio and blood plasma leptin levels, the magnitude of which was prominent in FSOB(3). 3. Compared with controls, FSOB-treated mice had lower blood plasma total cholesterol and LDL-cholesterol levels. 4. Blood plasma AST and ALT concentrations were not changed by FSOB, indicating FSOB do not show any toxic effects. 5. Consistent with their effects on body weight gain, the size of adipocytes were significantly decreased by FSOB, whereas the adipocyte number per unit area was significantly increased, suggesting that FSOB decreased the number of large adipocytes. Hepatic lipid accumulation was decreased by FSOB. Conclusions : These results demonstrate that FSOB effectively reduces body weight gain, feeding efficiency ratio, blood plasma leptin level and improves hepatic lipid accumulation.
Hwang, Hee-Jin;Han, Sunhui;Jeon, Sangok;Seo, Joeun;Oh, Dongho;Cho, Seong-Wan;Choi, Young Wook;Lee, Sangkil
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제35권8호
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pp.2290-2294
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2014
For the present study, rhEGF was encapsulated into solid lipid nanoparticles (SLNs). The SLNs were prepared by the $W_1/O/W_2$ double emulsification method combined with the high pressure homogenization method and the physical properties such as particle size, zeta-potential and encapsulation efficiency were measured. The overall particle morphology of SLNs was investigated using a transmission electron microscopy (TEM). The percutaneous skin permeation and accumulation property of rhEGF was evaluated using Franz diffusion cell system along with confocal laser scanning microscopy (CLSM). The mean particle size of rhEGF-loaded SLNs was $104.00{\pm}3.99nm$ and the zeta-potential value was in the range of -$36.99{\pm}0.54mV$, providing a good colloidal stability. The TEM image revealed a spherical shape of SLNs about 100 nm and the encapsulation efficiency was $18.47{\pm}0.22%$. The skin accumulation of rhEGF was enhanced by SLNs. CLSM image analysis provided that the rhEGF rat skin accumulation is facilitated by an entry of SLNs through the pores of skin.
Objectives The purpose of this study was to investigate the effects of Silbi-san on the antioxidant and fat accumulation inhibition and to analyze the anti-obesity effect by analyzing the changes in serum lipid composition in obese mice. Methods We compared contents of phytochemicals like total polyphenols and total flavonoid and antioxidant activities such as 2,2-dipheny-1-picrylhydrazyl and 2.2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical scavenging activity. After Silbi-san in 3T3-L1 cells in vitro and mouse adipose tissue ex vivo, we quantified intracellular triglyceride accumulation and lipolysis. Moreover, the anti-obesity activity though inhibiting pancreatic lipase were analyzed. In 3T3-L1 cells, morphological changes showed that control cells had many lipid while cells treated with Silbi-san had less lipid accumulation. 30% EtOH Silbi-san treatment also suppressed the fat absorption by inhibiting the activity of pancreatic lipase and led to high lipolysis through promoting glycerol release. The experimental group was divided into four groups: Normal group fed normal feed, Control group fed 60% high fat diet (HFD) and distilled water, drug group fed 60% high fat diet and 200 mg/kg of Silbi-san water extract, drug group fed 60% HFD and 200 mg/kg of Silbi-san 30% ethanol extract. Results Serum total cholesterol content and serum low density lipoprotein-cholesterol content were significantly decreased in the Silbi-san extract group compared to the control group, serum high density lipoprotein-cholesterol content was significantly increased in Silbi-san extract group. Conclusions In this study, the antioxidant and fat accumulation inhibitory effects of Silbi-san were confirmed.
Background: Free fatty acid-induced lipotoxicity is considered to play an important role in pancreatic β-cell dysfunction. The effect of ginsenosides on palmitic acid-induced pancreatic beta-cells cell death and failure of glucose-stimulated secretion of insulin (GSIS) was evaluated in this study. Methods: Enzyme-linked immunosorbent assay kit for a rat insulin was used to quantify glucose-stimulated insulin secretion. Protein expression was examined by western blotting analysis. Nuclear condensation was measured by staining with Hoechst 33342 stain. Apoptotic cell death was assessed by staining with Annexin V. Oil Red O staining was used to measure lipid accumulation. Results: We screened ginsenosides to prevent palmitic acid-induced cell death and impairment of GSIS in INS-1 pancreatic β-cells and identified protopanaxadiol (PPD) as a potential therapeutic agent. The protection effect of PPD was likely due to a reduction in apoptosis and lipid accumulation. PPD attenuated the palmitic acid-induced increase in the levels of B-cell lymphoma-2-associated X/B-cell lymphoma 2, poly (ADP-ribose) polymerase and cleaved caspase-3. Moreover, PPD prevented palmitic acid-induced impairment of insulin secretion, which was accompanied by an increase in the activation of phosphatidylinositol 3-kinase, peroxisome proliferator-activated receptor γ, insulin receptor substrate-2, serine-threonine kinase, and pancreatic and duodenal homeobox-1. Conclusion: Our results suggest that the protective effect of PPD on lipotoxicity and lipid accumulation induced by palmitic acid in pancreatic β-cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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