In order to understand stress response of Leuconostoc mesenteroides against lactic acid, a new Leuconostoc sp. which has acid tolerance was isolated from various Kimchi samples. And it identified as Leuconostoc mesenteroides LM3 by comparing its fatty acid composition with reference strain. Its growth pattern was investigated by adding a given concentration of lactic acid at the lag phase to the stationary phase. In the DeMan, Rogosa, Sharpe (MRS) media containing over 0.4% (final v/v) lactic acid, this strain slowed slowly After exposure of the stationary phase cells to 4% of lactic acid for 60 min, this strain could survive, whereas a reference strain, Leuconostoc mesenteroides KCTC3505, showed no survival. And changes of trehalose concentration, the activity of trehalase and ATPase in the growth of Leuconostoc mesenteroides LM3 after addition of 0.6% (final v/v) lactic acid were investigated : After exposure to lartic acid, trehalose concentration in this strain was increased in comparison with no treatment, but its trehalase activity was not changed. And its ATPase activity was constant, and intracellular pH was almost constant. This result meant Leuconostoc mesenteroides LM3 should have a tolerance against lactic acid. It remains to further study the mechanism of this acid tolerance.
Chae, Han Seung;Lee, Jeong Min;Lee, Ju-Hoon;Lee, Pyung Cheon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.6
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pp.837-842
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2013
A cryptic plasmid, pMBLR00, from Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides KCTC 3733 was isolated, characterized, and used for the construction of a cloning vector to engineer Leuconostoc species. pMBLR00 is a rolling circle replication plasmid, containing 3,370 base pairs. Sequence analysis revealed that pMBLR00 has 3 open reading frames: Cop (copy number control protein), Rep (replication protein), and Mob (mobilization protein). pMBLR00 replicates by rolling circle replication, which was confirmed by the presence of a conserved double-stranded origin and single-stranded DNA intermediates. An Escherichia coli-Leuconostoc shuttle vector, pMBLR02, was constructed and was able to replicate in Leuconostoc citreum 95. pMBLR02 could be a useful genetic tool for metabolic engineering and the genetic study of Leuconostoc species.
It was to test the stimulability of cosmetic which contains scalp extracted Leuconostoc mesenteroides when it's patched to skin and to investigate safety when it's used as skincare products. Scalp toner that contains L. mesenteroides extracts 1%, and PEG-60 Hydrogenated Castor Oil 0.6% was made and also scalp lotion containing L. mesenteroides extract 3%, Glyceryl Stearate 0.7%. Through the stimulant test of each toner and lotion by patch-testing 32 and 33 participants' backs, safety was verified by the result. Considering the result of antioxidant, anti-allergic, and anti-inflammatory properties of L. mesenteroids reported in previous studies, cosmetics containing these are safe for skin at low concentrations and worth for furthur research as non-stimmulative when used at other cosmetics.
A high-throughput screening strategy was developed to simplify the selection process for improved mannitol producing strain after chemical mutagenesis. Ethylmethyl sulfonate (EMS) was used as a chemical mutagen to alter the fructokinase-I gene which is an essential enzyme to metabolize fructose for growth. Leuconostoc mesenteroides treated with EMS were plated on the modified MRS solid medium containing fructose as a sole carbon source. Strains showing inhibited growth were primarily selected to evaluate the mannitol producing ability. By applying this strategy, L. mesenteroides ATCC 8293 M1, L. mesenteroides ATCC 9135 M3 and L. mesenteroides D1 M3 showed improvement in mannitol production.
Alternan known as a kind of dextran is a linear and cyclic polysaccharide which is synthesized with sucrose by alternaansucrase (EC2.4.1.140) of Leuconostoc mesenteroides. But this polysaccharide is different from dextran in its structure and other properties. For the purpose of applying alternan for the food, cosmetic, and pharmaceutical industries, we isolated an excellent alternan-porducing strain, Leu. mesenteroides CBI-110. The optimum culture conditions were studied to improve the yield, and the activity of alternansucrase was increased up to 33U/ml in the optimum culture media. The concentrations of $Mn^{2+}$ and $Cu^{2+}$ ions were 0.01% and 0.03%, respectively, for the effective production of alternan. Finally, we obtained 25.6g/L of alternan.
Insoluble glucans synthesized by Streptococcus mutans enhance the pathogenicity of oral biofilm by promoting the adherence and accumulation of cariogenic bacteria on the surface of the tooth. The objective of this study was to investigate the effect of Leuconostoc spp. on the in vitro formation of S. mutans biofilm. Three strains, Leuconostoc gelidum A TCC 49366, Leuconostoc mesenteroides ssp. cremoris A TCC 19254 and Leuconostoc mesenteroides ssp. mesenteroides ATCC 8293, were used in this study. They exhibited profound inhibitory effects on the formation of S. mutans biofilm and on the proliferation of S. mutans. The water-soluble polymers produced from sucrose were most strongly produced by L. gelidum, followed by L. mesenteroides ssp. cremoris and L. mesenteroides ssp. mesenteroides. The mean wet weights of the artificial biofilm of S. mutans were also significantly reduced as a result of the addition of the water-soluble polymers obtained from Leuconostoc cultures. According to the results of thin-layer chromatographic analysis, the hydrolysates of the water-soluble polymers produced by Leuconostoc were identical to those of dextran T-2000, forming predominately ${\alpha}-(1-6)$ glucose linkages. These results indicate that dextran-producing Leuconostoc strains are able to inhibit the formation of S. mutans biofilm in vitro.
The purpose of this study was to identify the psychrotrophic lactic acid bacteria isolated from kimchi, a Korean traditional fermented vegetable food. Thirty isolates of psychrotrophic lactic acid bacteria were isolated randomly from kimchi-A and kimchi-B which were fermented at $5{\sim}7^{\circ}C$ for 20 days and 50 days, respectively. Among 30 isolates of lactic acid bacteria isolated from kimchi-A, 14 isolates were identified as Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides, 12 as Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum and 4 as Lactobacillus bavaricus. Among 30 isolates isolated from kimchi-B, 20 isolates were identified as Lactobacillus bavaricus, 3 as Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides, 3 as Leuconostoc lactis, 2 as Leuconostoc paramesenteroides and 2 as Lactobacillus homohiochii. Though these strains were identified as above, there were many strains whose sugar fermenting patterns and $NH_3$ producing ability from arginine were inconsistent with those described in Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, and some strains identified as Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides and Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum even disclosed such contradictions as the comparisons of sugar fermenting patterns between the strains of different subspecies were much more coincident than those between the same subspecies. As there were difficulties in classifying these psychrotrophic lactic acid bacteria according to the current taxonomic system, further studies were needed to solve these problems.
Three slime-forming lactic acid bacteria were isolated from Kimchi and shown to produce viscous exopolysaccharides (EPS) in sucrose media. The isolated strains, GJ2, C3 and C11, were identified as Leuconostoc kimchii, Leuconostoc citreum and Leuconostoc mesenteroides, respectively, by examining their metabolic characteristics and determining their 16S rDNA sequences. Leu. kimchii GJ2, Leu. citreum C3 and Leu. mesenteroides C11 exhibited high viability (maintained initial viable cell count of $10^8$ CFU/ml) in 0.05 M sodium phosphate buffer (pH 3.0) for 2 h, in artificial gastric juice for 2 h and in 0.3% oxgall for 24 h. When tested, Leu. kimchii GJ2, in particular, displayed antimicrobial activity against pathogenic microorganisms. Leu. kimchii GJ2, Leu. citreum C3 and Leu. mesenteroides C11 produced 21.49 g/l, 16.46 g/l and 22.98 g/l EPS, respectively, in sucrose (5%) medium. The amount of purified EPS extracted from Leu. kimchii GJ2, Leu. citreum C3 and Leu. mesenteroides C11 was 14.61 g/l, 7.73 g/l and 4.77 g/l, respectively. Although the EPS produced by Leu. kimchii GJ2, Leu. citreum C3 and Leu. mesenteroides C11 differed in viscosity, TLC and HPLC analysis revealed that each contained only one type of monosaccharide, glucose. The average molecular mass of EPS produced by Leu. kimchii GJ2 was 306,606 Da.
Attempts were made to isolate and identify Gram-positive or lactic acid bacteria in Kimchi fermentation. Species diversity depended on isolation media and temperatures, and diversity tended to be reduced with decrease of temperature. MRS and KM (natural medium prepared from Kimchi materials) were suitable respectively for isolation and present number of species. Identification of isolates was performed by dichotomous identification schemes arranged on the basis of Bergey's manual of Systematic Bacteriology (1986). Gram-positive bacteria isolated at different temperatures (5, 15, $25^{\circ}C$) were 5 species of Leuconostoc, 4 species of Streptococcus, 3 species of Pediococcus, 2 species of Bacillus and 18 species of Lactobacillus. Species with high frequency of appearance were Lactobacillus plantarum, Streptococcus raffinolactis, Leuconostoc mesenteroides subsp. mesenteroides at $25^{\circ}C$, L. plantarum, Lactobacillus fructosus, L. mesenteroides subsp. mesenteroides at $15^{\circ}C$ and L. mesenteroides subsp. mesenteroides, Leuconosotoc paramesenteroides, Lactobacillus maltaromicus at $15^{\circ}C$. In general, Kimchi fermentation was achieved by Lactobacillus spp. (59.7% frequency) at $25^{\circ}C$ and Leuconostoc spp. (65.2% frequency) at $5^{\circ}C$. Pediococcus cerevisiae and Streptococcus faecalis which have been so far known as bacteria of Kimchi fermentation were not isolated.
This study was conducted in order to determine the optimum conditions for the production of fermented grapefruit extract showing high cell growth, antioxidant activity and total flavonoid content. Five lactic acid bacterial strains - Lactobacillus plantarum KCTC3104, Lactobacillus brevis KCTC3102, Weisella cibaria KCTC3746, Leuconostoc citreum KCTC3526 and Leuconostoc mesenteroides KCTC3505 - were evaluated first in order to determine the optimum strain able to grow with high efficiency on grapefruit as a substrate and possesses higher antioxidant activity and flavonoids content. Among these strains, L. mesenteroides KCTC3505 was selected as a starter culture. To estimate the available or effective content of grapefruit in basal medium, the effects of 30%, 50%, and 70% grapefruit contents on the performance of fermentation were tested, and it was found that grapefruit can be added at 70% levels to medium. In this study, three factors of fermentation conditions - incubation time, sucrose, and glucose contents - were evaluated for their effects on fermentation performance. Taguchi experiment design was employed and the responses of experiments were calculated using signal and noise ratio calculation with larger-the-best characteristics. Finally, the optimum conditions for the manufacture of fermented grapefruit extract were as follows: grapefruit 70%, sucrose 10 g/L, glucose 10 g/L, sodium acetate 1 g/L, NaCl 1 g/L, dipotassium phosphate 0.1 g/L, magnesium sulfate 0.01 g/L and 16 hr of incubation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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