This study describes a novel strategy to regulate the metabolic flux for lactic acid production in Lactobacillus casei. The ldhL gene encoding L-lactate dehydrogenase (L-LDH) was overexpressed in L. casei, and a two-stage oxygen supply strategy (TOS) that maintained a medium oxygen supply level during the early fermentation phase, and a low oxygen supply level in the later phase was carried out. As a consequence, a maximum L-LDH activity of 95.6 U/ml was obtained in the recombinant strain, which was over 4-fold higher than that of the initial strain. Under the TOS for L. casei (pMG-ldhL), the maximum lactic acid concentration of 159.6 g/l was obtained in 36 h, corresponding to a 62.8% increase. The results presented here provide a novel way to regulate the metabolic flux of L. casei for lactic acid production in different fermentation stages, which is available to enhance organic acid production in other strains.
The antibacterial effects of nine lactic acid bacteria (LAB) against Campylobacter jejuni were investigated by using agar gel diffusion and co-culture assays. Some differences were recorded between the inhibition effects measured with these two methods. Only two LAB, Lb. pentosus CWBI B78 and E. faecium THT, exhibited a clear anti- Campylobacter activity in co-culture assay with dehydrated poultry excreta mixed with ground straw (DPE/GS) as the only growth substrate source. It was observed that the supplementation of such medium with a cellulase A complex (Beldem S.A.) enhanced the antimicrobial effect of both LAB strains. The co-culture medium acidification and the C. jejuni were positively correlated with the cellulase A concentration. The antibacterial effect was characterized by the lactic acid production from the homofermentative E. faecium THT and the lactic and acetic acids production from the heterofermentative Lb. pentosus CWBI B78. The antagonistic properties of LAB strains and enzyme combination could be used in strategies aiming at the reduction of Campylobacter prevalence in the poultry production chain and consequently the risk of human infection.
S.cerevisiae에 의한 에딴올 발효에셔 생성되는 부산물 인 acetic acid, acetaldehyde, glycerol, lactic acid, formic acid가 세포성장과 에탄올 생성에 미치는 영향을 고찰하였다. Acetic acid와 acetaldehyde 를 발효액 내에 투입하였을 때, 세포생장은 저해되 었으나, 에탄올 생성은 증가되었다. 한편, glycerol 과 lactic acid는 세포성장과 에탄올 생산에 거의 영 향이 없었다. Acetic acid와 acetaldehyde는 비성장 속도를 줄임과 동시에 정체기를 늘염으로써 세포성장을 저해하였다. 에단올 수율은 첨가된 acetic acid 와 acetaldehyde 농도에 비례하여 증가하였고, acetic acid $3g/\ell$, acetaldehyde $2g/\ell$ 일 때, 최대가 되었다.
This study was aimed to determine the accumulation of free fatty acid by mesophilic lactic acid bac-teria (Lactococcus lactis subsp. lactis 1471, Lactococcus lactis subsp. cremoris 1000 and Lactobacillus casei 111) in cold-stored milk. According to the results, all cold-stored milks had higher acid degree val-ues than those of fresh milk. This phenomenon showed that a slight increase occurred in the accumulation of free fatty acids as a result of spontaneous lipolysis during cold storage. All lactic acid bacteria showed good performance in production of titratable acidity, which increased during fermentation of the milk (fresh and stored milks). Moreover, as the storage time was prolonged, more free fatty acid accumulation was obtained from the fermentation of the cold-stored milk by the investigated lactic acid bacteria. The control milk, which was without lactic acid bacteria, showed no change in the accumulation of free fatty acid during fermentation. From this result, it can be suggested that longer cold-storage time can induce higher free fatty acid accumulation in milk by lactic acid bacteria.
The strain producing L-lactic acid from starch was isolated from kimchi. The isolated strain was identified as a homofermentative Streptococcus sp. through its morphological, cultural, biochemical characteristics, and named Streptococcus sp. JEJ-6. Lactic acids are of two types, one L-specific and the other D-specific form in a stereospecific form. Streptococcus sp. JEJ-6 produced selectively L-lactic acid from all of the tested carbon sources. The optimum conditions for the L-lactic acid production from the isolated microorganism were determined. For the maximum yield of L-lactic acid from Streptococcus sp. JEJ-6, the cell should be harvested at the early stationary phase, and the growth temperature, pH, and NaCl concentration should be 37$^{\circ}C$, pH 7.0 and 0.1%, respectively. 4% Soluble starch as substrate and organic nitrogen sources such as peptone and yeast extract should be used for the best yield. The optimum pH of the nicotinamide adenine dinucleotide(NAD)-dependent and NAD-independent lactate dehydrogenase(LDH) activities was pH 8.5 and pH 7.0, respectively.
Lactic acid is a green chemical that can be used as a raw material for biodegradable polymer. To produce lactic acid through microbial fermentation, we previously screened a novel lactic acid bacterium. In this work, we optimized lactic acid fermentation using a newly isolated and homofermentative lactic acid bacterium. The optimum medium components were found to be glucose, yeast extract, $(NH_4)_{2}HPO_4,\;and\;MnSO_4$. The optimum pH and temperature for a batch culture of Lactobacillus sp. RKY2 was found to be 6.0 and $36^{\circ}C$, respectively. Under the optimized culture conditions, the maximum lactic acid concentration (153.9 g/L) was obtained from 200 g/L of glucose and 15 g/L of yeast extract, and maximum lactic acid productivity ($6.21\;gL^{-1}h^{-1}$) was obtained from 100 g/L of glucose and 20 g/L of yeast extract. In all cases, the lactic acid yields were found to be above 0.91 g/g. This article provides the optimized conditions for a batch culture of Lactobacillus sp. RKY2, which resulted in highest productivity of lactic acid.
Total mixed ration (TMR) including concentrate diet and roughage together have been used for the ruminant animal. Relatively high concentrations of moisture and water soluble carbohydrate are representative feature of TMR. Those moisture and water can also provide a niche for bacterial growth. Therefore, a possible fermentation of TMR induced by micro-organism is generally accepted. The present study hypothesized that different lactic acid bacteria could alter fermentation of TMR and subsequently rumen fermentation. Three lactic acid bacteria, Lactobacillus paracasei (A), L. plantarum (B) and L. parabuchneri (C), were employed and 7 treatments under full factorial design were compared with control without inoculation. TMR for dairy cow was used. Significant alterations by treatments were detected at lactic acid and butyric acid contents in TMR (p<0.05). Treatment AC (mixture of A and C) and BC (mixture of B and C) showed great lactate production. Great butyrate production was found at treatment C. At in vitro rumen fermentation, treatments B, C and AB (mixture of A and B) showed significantly great total gas production (p<0.05). All treatments except treatments B and AB, showed less dry matter digestibility, significantly (p<0.05). Total volatile fatty acid production at treatment AC was significantly greater than others (p<0.05). In individual volatile fatty acid production, treatment AB and AC showed great acetate and propionate productions, significantly (p<0.05). This study investigated correlation between organic acid production in TMR and rumen volatile fatty acid production. And it was found that butyric acid in TMR had significant negative correlation with acetate, propionate, total volatile fatty acid, AP ratio and dry matter digestibility.
Medium components for lactic acid production were optimized with a strain of Lactobacillus sp., isolated by our Lab. Nitrogen source was the key component and manganese ion was also important for lactic acid production in this strain. Optimal concentration of manganese ion was 0.03 g/l as MnSO$_{4}$ 4 - 5 H$_{2}$O base. Other mineral elements, however, had little effect on it. Among the nitrogen sources we examined, yeast extract showed the highest productivity. Yeast extract, the exellent but very expensive medium component, could be partially replaced by soytone until 60% dry base with higher productivity, or by tryptone enforced with vitamines and nucleic acids. In order to replace yeast extract completely, we examined several inexpensive nitrogen sources and their enzymatic hydrolyzates. The hydrolyzate of vital wheat gluten was the best of them.
In this study, the possibility of green tea waste (GTW) as a new ingredient of byproducts-mixed silage was investigated. Characteristics of GTW were low in dry matter (DM) content (20%), and high in crude protein (30 to 36%) and tannins (8.5%). The GTW was added to mixed silages composed of tofu cake, rice straw and rice bran that are locally available in Japan. In experiment 1, the effect of GTW addition to silage made from various patterns of byproducts mixture based on tofu cake was studied. In experiment 2, the effect of GTW addition and storage temperature on fermentation characteristics, nutrient contents and in vitro ruminal gas production of byproducts-mixed silages were examined. In experiment 1, GTW addition on tofu cake accelerated acetic, propionic and butyric acid accumulation in the silage. When rice straw was mixed with tofu cake, DM content was increased from 47 to 56%, lactic acid was the main acid and the pH was decreased below 4.2. In this case, GTW addition to those mixtures did not affect acid concentrations of the silage. In experiment 2, GTW addition to the byproducts mixture increased lactic acid concentration, decreased the pH and DM loss of the silages. In GTW treatments, tannin concentration was lower in the silage stored at $30^{\circ}C$ than $15^{\circ}C$. Addition of GTW into the silage also increased in vitro ruminal gas production. It was concluded that addition of GTW into byproducts-mixed silage enhanced lactic acid fermentation when there were insufficient materials for lactic acid production. Utilization of GTW as an ingredient in mixed silages would be effective in enhancing fermentation characteristics, lowering tannin content and in vitro ruminal gas production.
The growth of Lactobacillus casei in milk was enhanced by adding yams. Addition of 1% yam(raw or dry) promoted the cell growth and acid production in fermented milk. The milk containing 1% yams formed the complete curd by lactic acid fermentation at 37oC for 19hr while the milk without yams showed the incomplete curd formation. The crude mucilage extracted from a raw yam also enhanced the cell growth as well as the acid production. Addition of mucilage(0.08%) showed the similar effects with adding heat treated yam(1%). The milk fermented by adding various yams showed the high scores for sensory evaluation comparing with the milk fermented without yams. The fermenting ability of Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus kefir and Leuconostoc mesenteroides was evaluated by adding 1% of a dry yam in milk. A dry yam also enhanced the cell growth of L. acidophilus resulting in the high acid production. The viable cell counts of L. casei, L. acidophilus and Leuc. mesenteroides except L. kefir were increased by adding 1% of a dry yam.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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