Three microorganisms were isolated from staled market soybean curd and confirmed their reproducibility of putrefaction. The isolates were identified as Acinetobacter calcoaceticus var. anitrat(97.9%) and Klebsiella pneumoniae subgroup pneumoniae(99.0%). The third microorganism has same characteristics as A. calcoaceticus var. anitrat except mucoid production.
This paper describes the development of neurological signs of two prematurely born calves four days after birth. The pathological examination results indicated fibrinopurulent polyserositis, including meningoencephalitis with suppurative bronchopneumonia. Bovine viral diarrhea virus subtype 2a was detected in most of the internal organs, and the bacterial colonies cultured from the samples were identified as Klebsiella (K.) pneumoniae. Molecular analysis via multilocus sequence typing identified a different K. pneumoniae isolate in each calf-type 14 in calf A and type 65 in calf B. This is the first report identifying K. pneumoniae sequence types 14 and 65 in cattle.
Klebsiella pneumoniae is a gram-negative bacterium that is known for causing infection in nosocomial settings. As reported by the World Health Organization, carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, a category that includes K. pneumoniae, are classified as an urgent threat, and the greatest concern is that these bacterial pathogens may acquire genetic traits that make them resistant towards antibiotics. The last class of antibiotics, carbapenems, are not able to combat these bacterial pathogens, allowing them to clonally expand antibiotic-resistant strains. Most antibiotics target essential pathways of bacterial cells; however, these targets are no longer susceptible to antibiotics. Hence, in our study, we focused on a hypothetical protein in K. pneumoniae that contains a DNA methylation protein domain, suggesting a new potential site as a drug target. DNA methylation regulates the attenuation of bacterial virulence. We integrated computational-aided drug design by using a bioinformatics approach to perform subtractive genomics, virtual screening, and fingerprint similarity search. We identified a new potential drug, koenimbine, which could be a novel antibiotic.
To investigate the antibiotic resistant patterns of the bacteria producing ESBL, we isolated one organism of Klebsiella pneumoniae from a clinical laboratory in Busan. The organism that produces ESBL gene was detected by double disk synergy test and the presence of three ESBL genes (TEM-1, SHV-12, CTX-M-15) was confirmed by polymerase chain reaction and DNA sequencing analysis. To analyse the characteristics of three ESBL genes, we performed transconjugation, transformation and cloning experiment with the organism. The MIC of Klebsiella pneumoniae was revealed that ceftazidime, cefotaxime and ceftriaxone were $256\;{\mu}g/ml,\;128\;{\mu}g/ml\;and\;128\;{\mu}g/ml$ respectively. The MIC of conjugant (E. coli $RG176^{Na(r)}$) af was revealed that ceftazidime, cefotaxime and ceftriaxone were $256\;{\mu}g/ml,\;64\;{\mu}g/ml\;and\;128\;{\mu}g/ml$ respectively. The MIC of transformant (E. cofi $DH5{\alpha}$) was revealed that ceftazidime, cefotaxime and ceftriaxone were $128\;{\mu}g/ml,\;32\;{\mu}g/ml,\;and\;32\;{\mu}g/ml$ respectively, The MIC of cloned organism of SHV-12 gene (E. coli $DH5{\alpha}$) was revealed that ceftazidime, cefotaxime and ceftriaxone were $128\;{\mu}g/ml,\;8\;{\mu}g/ml,\;and\;32\;{\mu}g/ml$ respectively. The results indicated that MIC of conjugant was higher than MIC of transformant and also SHV-12 gene were not resistant against cefotaxime antibiotic.
Glutamine synthetase (GS) of Kkbsiellu pmumonzae was purified and identified it's properties. It was determined to be composed of 12 identical subunits and it's molecular weight was about 600,000. It's optimum pH and temperature were identified as pH 7.0 and $37^{\circ}C$ respectively, and also there was no considerable variation of activity between pH 5 and 8. When GS was incubated at $57^{\circ}C$ for 10 min, it's activity was decreased to half of maximum activity. It was observed that K. pneumoniae has adenylylation-deadenylylation system which regulates activity of GS according to the quality and quantity of nitrogen source like GS of E. coli Also it's GS was very similar to that of E. coli. in structure deduced from the immunodiffuslon experiment using anti-E. coli GS antibody.
Acute osteomyelitis caused by Klebsiella pneumoniae is rare in the oral and maxillofacial region. Klebsiella pneumoniae is a Gram-negative bacillus and the normal flora of the human body, but it can cause pneumonia, urinary tract infection, meningitis, and osteomyelitis in patient with compromised immune systems. These infections are mainly caused by nosocomial infection. Microbacterial osteomyelitis was developed by clinical cause such as tooth extraction, fracture, and surgical history, which requires long-term antibiotic administration and surgical treatment. This report describes that a 56-year-old male patient with acute osteomyelitis caused by Klebsiella pneumoniae infection after implant placement was treated with intravenous administration of ertapenem without open surgery treatment. Through this case, we report that antibiotic susceptibility test is essential for the treatment of acute osteomyelitis caused by a bacterial infection resistant to empirical antibiotics, and early administration of appropriate antibiotics can reduce the possibility of extensive bone destruction or additional open surgery.
To investigate the antibiotic-resistant patterns and the gene types of extended-spectrum $\beta$-lactamase (ESBL)-producing Klebsiella pneumoniae, we collected 226 Klebsiella pneumoniae strains from three general hospitals with more than 500 beds in Busan, Korea from September 2004 to October 2005, The minimum inhibitory concentration (MIC) of antibiotics was measured using the Gram-negative susceptibility (GNS) cards of Vitek (Vitek system, Hazelwood Inc., MO, U.S.A.). Of the 226 K, pneumoniae isolates, 65 ESBL-producing K. pneumoniae strains were detected by the Vitek system and confirmed by the double-disk synergy test. TEM (Temoniera) type, SHV (sulfhydryl variable) type, and CTX-M (cefotaxime) type genes were detected by polymerase chain reaction. All 65 K. pneumoniae strains were resistant to ampicillin, cefazolin, cefepime, ceftriaxone, and aztreonam, and 83.0% of the organisms were resistant to ampicillin/sulbactam, 66.1% to tobramycin, 67.6% to piperacillin/tazobactam, 61.5% to ciprofloxacin, and 47.6% to trimethoprim/sulfamethoxazole, and 43.0% to gentamicin. TEM-type ESBLs (TEM-1 type, -52 type) were found in 64.6% (42 of 65) of the isolates, SHV-type ESBLs (SHV-2a type, -12 type, -28 type) in 70.7% (46 of 65) of isolates, and CTX-M-type ESBLS (CTX-M-15 type) in 45% (29 of 65) of isolates. Of the 65 ESBL-producing K. pneumoniae strains, two strains were found to harbor blaSHV-28, which were detected in Korea for the first time. Therefore, more investigation and research on SHV-28 are needed in order to prevent the ESBL type-producing K. pneumoniae from spreading resistance to oxyimino cephalosporin antibiotics.
In the present study, the therapeutic potential of purified and well-characterized bacteriophages was evaluated in thermally injured mice infected with Klebsiella pneumoniae B5055. The efficacy of five Klebsiella phages (Kpn5, Kpn12, Kpn13, Kpn17, and Kpn22) was evaluated on the basis of survival rate, decrease in bacterial counts in different organs of phage-treated animals, and regeneration of skin cells as observed by histopathological examination of phage-treated skin. Toxicity studies performed with all the phages showed them to be non-toxic, as no signs of morbidity and mortality were observed in phage-treated mice. The results of the study indicate that a single dose of phages, intraperitoneally (i.p.) at an MOI of 1.0, resulted in significant decrease in mortality, and this dose was found to be sufficient to completely cure K. pneumoniae infection in the burn wound model. Maximum decrease in bacterial counts in different organs was observed at 72 h post infection. Histopathological examination of skin of phage-treated mice showed complete recovery of burn infection. Kpn5 phage was found to be highly effective among all the phages and equally effective when compared with a cocktail of all the phages. From these results, it can be concluded that phage therapy may have the potential to be used as stand-alone therapy for K. pneumoniae induced burn wound infection, especially in situations where multiple antibiotic-resistant organisms are encountered.
In order to increase the production of tryptophan by maximizing expression of recombinant trp plasmid, Klebsiella pneumoniae KC 105(pheA tyrA trpE trpR tyrR) was genetically modified. KC 107, inosine monophospate(IMP) auxotroph from KC 105 and KC 108, histidine(His) auxotroph from KC 107 were also derived respectively to increase phosphoribosylpyrophosphate(PRPP) production which is required for tryptophan biosynthesis. From KC 107 phosphoribosylpyrophosphate consumption which is required for tryptophan biosynthesis. From KC 107 and KC 108, KC 109 and KC 110, both arginine auxotrophs were derived respectively. To investigate the expression of recombinant trp plasmid in the selected K. pneumoniae mutants, the auxotrophic mutants were transformed with recombinant trp plasmids pSC 101-$trpE^{FBR}$, pSC 101-trpL(.DELTA.att) $trpE^{FBR}$ (pSC 101-trp-AF). Amount of tryptophan produced and activities of tryptophan synthase of $trpR^{-}$ mutant (KC 100) and $tyrR^{-}$ mutnat(KC 105) containing recombinant plasmid pSC 101-trp operon were increased by 30-40% as compared with KC 99(pheA tyrA trpE) containing recombinant plasmid pSC 101-trp operon. Activities of tryptophan synthase and production of tryptophan of KC 108 ($His^{-}$) and KC 109($Arg^{-}$) containing recombinant plasmid pSC 101-trp operon were increase by two-fold as compared with KC 107 containing pSC 101-trp operon.
The synthesis of captopril as an important chiral drug in commerce needs expensive resolution process of racemic mixture. Microorganisms, producing a thermostable esterase that catalyzes the stereo-selective hydrolysis of methyl DL-${\beta}$-acetylthioisobutyrate (DL-ester) to D-${\beta}$-acetylthioisobutyric acid (DAT) were screened from soils. Among the strains tested, strain No CJ-317 and strain No CJ-187 with highest activity were selected as the best DAT producer. The newly isolated microorganisms were identified respectively, as Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas putida. The cell activity of esterase from K. pneumoniae CJ-317 and P. putida CJ-187 were showed an optimal reaction activity at $75^{\circ}C$ and $60^{\circ}C$, respectively. Also the cell activity of K. pneumoniae CJ-317 was stable up to $80^{\circ}C$ for 1 h, while that of P. putida CJ-187 was not over $60^{\circ}C$. By varying the concentration of DAT in the reaction mixture, the cell activity of P. putida CJ-187 showed about 55% and 80% of product inhibition in the presence of 2.5% (w/v) and 5.0% of DAT respectively. K. pneumoniae CJ-317 had less product inhibition than P. putida CJ-187 by about 35% and 44% at the same concentrations respectively. The esterase of newly isolated K. pneumoniae CJ-317 could be useful for the stereo-selective hydrolysis of DL-ester to DAT.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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