Acetolactate Synthase (ALS) was partially purified from the yeast and its basic biochemical studies were carried out. Yeast was grown in the minimum media containing 0.5% glucose, 51 mM $K_2HPO_4$, 22 mM $KH_2PO_4$, 8 mM $(NH_4)2SO_4,\;0.4\;m M\;MgSO_4$ for 18 hours at 37 $^{\circ}C$. The cell was ruptured in the buffer (20 mM phosphate buffer pH 7.0, 0.1 mM TPP, 0.5 mM DTT, 1 ${\mu}M$ FAD, and 1 mM MgCl_2$) following an overnight suspension. The supernatant fraction was collected from $10,000{\times}g$ and the enzyme was further purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sephacel chromatography and leucine-agarose chromatography. The enzyme activity was measured under the various conditions by the function of protein concentration, time, temperature, pH, and substrate. The optimum temperature was found to be 50$^{\circ}C$, optimum pH 8.0∼8.5. The kinetic parameters, $K_m\;and\;V_{max}$ were 8.4 mM and 17.9 nmol/mg/min respectively. Stability of the enzyme was studied with ethylene glycol and glycerol added to the enzyme solution. Both ethylene glycol and glycerol improved the enzyme stability up to 50%. The study of feedback inhibition showed that valine was a strong inhibitor while leucine was a weak inhibitor.
A relation between antimicrobial activities and the formation constants of solid complexes of Cu(II), Ni(II), Co(II), Mn(II) and Fe(III) with tridentate Schiff base ligand, 4-hydroxy-3(1-{2-(benzylideneamino)-phenylimino}-ethyl)-6-methyl-2Hpyran-2-one (HL) derived from o-phenylene diamines, dehydroacetic acid (DHA) and p-chloro benzaldehyde have been studied. The ligand and metal complexes were characterized by elemental analysis, conductivity, magnetic susceptibility, thermal analysis, X-ray diffraction, IR, $^1H$-NMR, UV-vis and mass spectra. From the analytical data, the stiochiometry of the complexes was found to be 1:2 (metal:ligand) with octahedral geometry. The molar conductance values suggest the nonelectrolytic nature of metal complexes. The X-ray diffraction data suggests monoclinic crystal system for Ni(II) and orthorhombic crystal system for Cu(II) and Co(II) complexes. The IR spectral data suggest that the ligand behaves as tridentate ligand with ONN donor atoms sequence towards central metal ion. Thermal behavior (TG/DTA) and kinetic parameters calculated by Coats-Redfern method suggests more ordered activated state in complex formation. The protonation constants of the complexes were determined potentiometrically in THF:water (60:40) medium at $25^{\circ}C$ and ionic strength ${\mu}=0.1\;M$ ($NaClO_4$). Antibacterial activities in vitro were performed against Staphylococcus aureu and Escherichia coli. Antifungal activities were studied against Aspergillus Niger and Trichoderma. The effect of the metal ions and stabilities of complexes on antimicrobial activities are discussed.
Recently, a lot of studies have been made about the methods used to generate turbulent velocity fields stochastically in order to effectively predict broadband flow noise. Among them, the FRPM (Fast Random Particle Mesh) method which generates turbulence with specific statistical properties using turbulence kinetic energy and dissipation obtained from the steady solution of the RANS (Reynolds Averaged Navier-Stokes) equations has been successfully applied. However, the FRPM method cannot be applied to the flow noise problems involving intrinsic unsteady characteristics such as centrifugal fan. In this paper, to effectively predict the broadband noise generated by centrifugal fan, U-FRPM (unsteady FRPM) method is developed by extending the FRPM method to be combined with the unsteady numerical solutions of the unsteady RANS equations to generate the turbulence considered as broadband noise sources. Firstly, an unsteady flow field is obtained from the unsteady RANS equations through CFD (Computational Fluid Dynamics). Then, noise sources are generated using the U-FRPM method combined with acoustic analogy. Finally, the linear propagation model which is realized through BEM (Boundary Element Method) is combined with the generated sources to predict broadband noise at the listeners' position. The proposed technique is validated to compare its prediction result with the measured data.
The mechanism of cooking rice was investigated using a japonica type rice variety, Akibare, of 50%, 70% and 90% polishing degrees. The hardness of rice cooked at various cooking temperatures ($90^{\circ}-120^{\circ}C$) was measured with a Texturometer. The cooking rate followed the equation of a first-order reaction. The reaction rate constants were in the increasing order of 50%, 70% and 90% polished rice. The temperature coefficient of the reaction rate constant at cooking temperatures of ($90^{\circ}-100^{\circ}C$) was about 2 in all rice samples. The activation energies of cooking at temperatures below $100^{\circ}C$ and above $100^{\circ}C$ were about 17,000 and 9,000 cal/mole, respectively. The polishing degrees and water soaking time of rice did not affect the activation energy of cooking; however, the lower polishing degrees and shorter soaking increased the cooking time The experimental results suggested that the cooking process of rice comprises two mechanisms: At temperatures below $100^{\circ}C$ the cooking rate is controlled by the reaction rate of rice constituents with water, and at temperatures above $100^{\circ}C$, it is controlled by the rate of diffusion of water through the cooked portion (or layer) toward the interface of uncooked core in which the reaction is occurring.
Adsorption of metanil yellow onto granular activated carbon were studied in a batch system. Various operation parameters such as adsorbent dosage, pH, initial concentration, contact time and temperature were optimized. Experimental equilibrium adsorption data were analyzed by Langmuir and Freundlich adsorption isotherm. The equilibrium process was described well by Freundlich isotherm model. From determined separation factor (1/n), adsorption of metanil yellow by granular activated carbon could be employed as effective treatment method. By analysis of kinetic experimental data, the adsorption process were found to confirm to the pseudo second order model with good correlation and the adsorption rate constant ($k^2$) decreased with increasing initial concentration. Thermodynamic parameters like activation energy, change of free energy, enthalpy, and entropy were also calculated to predict the nature adsorption in the temperature range of 298~318 K. The activation energy was determined as 23.90 kJ/mol. It was found that the adsortpion of metanil yellow on the granular activated carbon was physical process. The negative Gibbs free energy change (${\Delta}G=-2.16{\sim}-6.55kJ/mol$) and the positive enthalpy change (${\Delta}H=+23.29kJ/mol$) indicated the spontaneous and endothermic nature of the adsorption process, respectively.
Ryu, Bo Rim;Kang, Ho Keun;Duong, Phan Anh;Lee, Jin Uk
Journal of Navigation and Port Research
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v.45
no.4
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pp.212-223
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2021
The objective of this study was to evaluate structural safety according to environmental conditions acting on the piping of offshore structure and the motion of the structure. As for conditions acting on the piping, the maximum and minimum temperature conditions were used to analyze the design conditions of N2 generator. The motion of the structure was calculated and applied according to the DNV(Det Norske Veritas) rule. Each condition was combined and a total of 26 load combinations were constructed according to thermal load, motion load, and presence or absence of pipe support. Analysis was performed using a commercial program MSC Patran/Nastran. Thermal analysis was performed by applying the steady-state method, Sol 153. Thermal-structural coupled analysis was performed using Sol 101, a linear-static method. As a result of the analysis, the stress tended to increase when temperature inside the pipe was lower in Set 1 and Set 2, when temperature was higher in Set 3, and when the temperature difference between the inside and outside of the pipe in Set 4 was increased. However, the sum of stresses in the condition with only temperature load and the condition with only the kinetic load did not show the same value as the stress in the composite load condition of two loads. That is, the influence of the motion load varied depending on the direction of motion, the arrangement of pipes, and the position of the support. Therefore, it is necessary to comprehensively consider the size and direction of the motion load acting on the piping, the arrangement of the piping, and the location of the pipe supports during the design of piping.
In 1999, the French semiotician Jacques Fontanille published his work on discourse semiotics as an attempt to overcome the limitations of structuralism. Discourse semiotics has expanded the realm of semiotics by taking a phenomenological approach that examines the structure of consciousness. Phenomenology pays special attention to the operation of human consciousness, which, instead of staying put, moves from one place to another-unbeknownst to its agent. This paper examines "Bulls" through a phenomenological approach as the short story depicts the stream of consciousness that unfolds within the inner world of Pau, the young male protagonist. The rhetorical approach to literary analysis works at the level of the speech act and directly relates to speech act theory. In rhetorics, figures and tropes are dominated by speech acts. Whereas conventional rhetorical analysis lacks a kinetic perspective as it revolves around flat semantic inspections, the discourse semiotics approach applied in this paper allows for an indepth multidimensional analysis where the analyses of ${\acute{e}}nonc{\acute{e}}$ and ${\acute{e}}nonciation$ complement each other. Presenting a peasant movement to the reader through the eyes of the young male protagonist Pau, "Bulls" is considered a significant literary feat in the history of Korea's New Literature as the work is highly regarded for its impressive depiction of a communal movement. This paper reinterprets and reevaluates the story under a new light, mainly through a rhetorical approach and a phenomenological approach that hinges on discourse semiotics.
The applicability of a commercial enzymatic time-temperature integrator (TTI) for monitoring spoilage of ground beef was investigated under isothermal storage condition at different temperatures. The volatile basic nitrogen (VBN) value was used as a spoilage index for ground beef. The time taken to reach the spoilage of ground beef stored at 4, 10, 15, 20, and ${25^{\circ}C}$ were 168, 114, 60, 48, and 24 hrs, respectively. However, these quality losses of beef were not coincided with the endpoints of the three different C-type TTIs (C-1, C-4, and C-7). In order to match the TTI response to the quality loss of beef, some ingredients such as enzyme and substrate solutions were extracted from C-1TTI and remixed with different amount of them in the tubes to constitute the modified TTIs. The responses of the modified CM-1 TTI were very close to the quality loss of beef stored at 20 and ${25^{\circ}C}$, but not at other temperatures tested. The response of the other modified CM-2 TTI was only matched to the quality loss of beef stored at ${15^{\circ}C}$. Therefore, systematic kinetic studies of food spoilage and the TTI response are required to apply the TTI as a quality indicator for a specific food.
Cha, Hye Jin;Song, Yun Jeong;Lee, Da Eun;Kim, Young-Hoon;Shin, Jisoon;Jang, Choon-Gon;Suh, Soo Kyung;Kim, Sung Jin;Yun, Jaesuk
Toxicological Research
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v.35
no.1
/
pp.37-44
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2019
A major predictor of the efficacy of natural or synthetic cannabinoids is their binding affinity to the cannabinoid type I receptor ($CB_1$) in the central nervous system, as the main psychological effects of cannabinoids are achieved via binding to this receptor. Conventionally, receptor binding assays have been performed using isotopes, which are inconvenient owing to the effects of radioactivity. In the present study, the binding affinities of five cannabinoids for purified $CB_1$ were measured using a surface plasmon resonance (SPR) technique as a putative non-isotopic receptor binding assay. Results were compared with those of a radio-isotope-labeled receptor binding assay. The representative natural cannabinoid ${\Delta}^9$-tetrahydrocannabinol and four synthetic cannabinoids, JWH-015, JWH-210, RCS-4, and JWH-250, were assessed using both the SPR biosensor assay and the conventional isotopic receptor binding assay. The binding affinities of the test substances to $CB_1$ were determined to be (from highest to lowest) $9.52{\times}10^{-3}M$ (JWH-210), $6.54{\times}10^{-12}M$ (JWH-250), $1.56{\times}10^{-11}M$ (${\Delta}^9$-tetrahydrocannabinol), $2.75{\times}10^{-11}M$ (RCS-4), and $6.80{\times}10^{-11}M$ (JWH-015) using the non-isotopic method. Using the conventional isotopic receptor binding assay, the same order of affinities was observed. In conclusion, our results support the use of kinetic analysis via SPR in place of the isotopic receptor binding assay. To replace the receptor binding affinity assay with SPR techniques in routine assays, further studies for method validation will be needed in the future.
It is known that ${\delta}^{13}C_{DIC}$ (carbon-13 isotope of dissolved inorganic carbonate (DIC) ions) of water increases when dissolved $CO_2$ degases. However, ${\delta}^{13}C_{DIC}$ could decrease when the pH of water is lower than 5.5 at the early stage of degassing. Laboratory experiments were performed to observe the changes of ${\delta}^{13}C_{DIC}$ as $CO_2$ degassed from three different artificial $CO_2$-rich waters (ACWs) in which the initial pH was 4.9, 5.4, and 6.4, respectively. The pH, alkalinity and ${\delta}^{13}C_{DIC}$ were measured until 240 hours after degassing began and those data were compared with kinetic isotope fractionation calculations. Furthermore, same experiment was conducted with the natural $CO_2$-rich water (pH 4.9) from Daepyeong, Sejong City. As a result of experiments, we could observe the decrease of DIC and increase of pH as the degassing progressed. ACW with an initial pH of 6.4, ${\delta}^{13}C_{DIC}$ kept increasing but, in cases where the initial pH was lower than 5.5, ${\delta}^{13}C_{DIC}$ decreased until 6 hours. After 6 hours ${\delta}^{13}C_{DIC}$ increased within all cases because the $CO_2$ degassing caused pH increase and subsequently the ratio of $HCO_3{^-}$ in solution. In the early stage of $CO_2$ degassing, the laboratory measurements were well matched with the calculations, but after about 48 hours, the experiment results were deviated from the calculations, probably due to the equilibrium interaction with the atmosphere and precipitation of carbonates. The result of this study may be not applicable to all natural environments because the pressure and $CO_2$ concentration in headspace of reaction vessels was not maintained constant as well as the temperature. Nevertheless, this study provides fundamental knowledge on the ${\delta}^{13}C_{DIC}$ evolution during $CO_2$ degassing, and therefore it can be utilized in the studies about carbonated water with low pH and the monitoring of geologic carbon sequestration.
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