• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권1호
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• pp.110-117
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• 1995

This study was carried out to immunologically characterize Bacillus thuringiensis (B.t) antigens. Protein patterns of ultrasonicated- antigens of B. thuringiensis subspecies using SDS- PAGE revealed marked similarities among all the strains analyzed except for the difference between quantative variations of bands and some protein antigens. The comparison of the protein patterns showed that the protein antigen of 45 kilodalton (kd) was common in 11 strains and that the difference between B. thuringiensis subsp. canadensis and galleriae was noticed in quantative variations of bands despite of ambiguous serogrouping, suggesting a useful method for identification. All strains examined showed similar antigenic patterns in SDS-PAGE, while immunodominant bands differed in antigenic reactivity in western blot using polyclonal antibodies. Polyclonal antibody to B. thuringiensis subsp. thuringiensis and israelensis in indirect immunofluorescence assay reacted with flagella and cell surface antigens. The present study indicates that SDS-PAGE and western blot analysis may be used as tools for differentiation and identification of B. thuringiensis subspecies.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제27권5호
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• pp.359-363
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• 1999

To prevent appearance of resistant mosquitoes against $\delta$-endotoxin of bacillus thuringiensis subsp. israelensis (Bti) in field, a mosquitocidal Bacillus thuringiensis strain 21-2(Bt21-2) producing a new type of $\delta$-endotoxin was isolated. The strain Bt 21-2 belongs to H serotype 43, B. thuringiensis subsp. guiyangiensis (Btg). The $\delta$-endotoxins from the strain Bt 21-2 and the strain Bti were a cuboid shape morphologically, but the $\delta$-endotoxin of the strain Bt 21-2 was composed of 150, 90 and 70kDa proteins on SDS-PAGE, and the antigenicity of $\delta$-endotoxin of the strain Bt 21-2 was different from that of the strain Bti on immunoblot. The $\delta$-endotoxin gene of the strain Bt 21-2 was not amplified with specific primers of $\delta$-endotoxin gene (cry4A and cry4B) of the strain Bti on PCR.

• 미생물과산업
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• 제16권1호
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• pp.18-20
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• 1990

현재 전세계적으로 10,000여개 이상의 실험실에서 생물공학적인 연구가 진행중에 있고, 200여개 이상의 회사에서 생물공학을 이용한 제품이 만들어지고 있다.(Saftlas, 1984). 이와같은 제품으로 생물농약(예, 모기억제에 사용되는 Bacillus thuringiensis var. israelensis 등)이라든가 insulin, 성장호르몬, lymphotoxin및 항암제등의 의약품(Saftlas, 1984)과 식물품종개량제(예, 질소 공정의 vector로 사용되는 Agrobacterium tumerfaciens의 Ti Plasmid)(McDanial, 1981 ; Shaw, 1986) 등이 있다. 그러나 최근 미생물 생태분야에서는 이와같이 만들어진 미생물들 (genetically engineered microorganisms : GEMs)이 자연 생태계에 유출되었을때 야기될 가능성이 있는 biohazaed에 대하여 관심이 집중되고 있다. (Curtiss, 1976 ; Sharples, 1983 ; Rissler, 1984). 토양환경에서 GEM이 유전물질을 전달항 수 있는 기작은 크게 conjugation, transduction, transformation 등이 알려지고 있다. 여기서는 주로 토양환경에서 transformation에 의한 유전물질의 전달과정에 대한 최근 연구동향을 간단히 기술하고자 한다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권5호
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• pp.393-398
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• 1993

One strain of mosquitocidal Bacillus thuringiensis, H9B, was isolated from soil. The biochemical characteristics and flagella antigenicity of the strain H9B is similar to that of B. thuringiensis subsp. darmstadiensis. The delta-endotoxin of the strain H9B coincided with that of B. thuringiensis subsp. darmstadiensis strain 73E10-2 on agarose double immunodiffusion test. The delta-endotoxin of B. thuringiensis subsp. israelensis contains hemolysin fragment (28 kb) on SDS-PAGE when the delta-endotoxin was solubilized in alkali, while that of the strain H9B does not contain 28 kb protein.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권3호
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• pp.301-304
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• 1990

Bti와 Btd의 내독소에 대한 면역학적인 검토를 행한 결과 양균주의 내독소에는 동일한 기원의 단백질이 혼존하고 있음을 면역확산반응 및 면역전기영동법으로 확인되었다. 또한 동일한 기원의 단백질 함량은 Bti 내독소 보다 Btd 내독소에 많이 존재함을 효소항체법으로 확인하였다.

• 한국균학회지
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• 제30권1호
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• pp.44-49
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• 2002

느타리버섯 재배에 있어서 주요해충인 버섯파리 Lycoriella mali의 생물학적 방제를 위하여 전국 느타리버섯 재배지와 버섯파리의 병사충에서 버섯파리 유충에 병원성을 갖는 세균 8균주를 분리하였다. 이 중 Bti-D 및 Bti-U 2균주에 의한 사충율이 각각 82.3%와 87.3%로 가장 높았다. 버섯파리 유충의 발육단계에 따른 살충 효과 검정에서는 두 균주 모두 3령 층에서 높은 살충효과를 보였다. 이들 세균으로 감염된 유충에 나타나는 병징으로서 감염초기에는 중장의 앞부분이 연한 갈색을 띄고, 차츰 중장의 뒷부분까지 진행되어 전 부분이 흑갈색으로 변색되면서 치사되었다. 이들 두 균주를 동정하기 위하여 배양적, 생화학적 및 생리적 특성을 조사하고 Bergey's manual과 Biolog system을 동정에 이용하였으며, 주사전자현미경으로 세포형태를, 위상차현미경으로 내생포자와 내독소를 관찰하여 판정한 결과, 두 균주 모두 Bacillus thuringiensis로 동정되었으며, 편모항원성을 조사한 결과, B. l. subsp. israelensis로 동정되었다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제59권1호
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• pp.41-54
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• 2020

안동지역 농가 주변의 정수에서 두 종의 모기가 채집되었다. 형태적 특징을 바탕으로 이들이 한국숲모기(Aedes koreicus)와 줄다리집모기(Culex vagans)로 각각 동정되었다. 또한, DNA 바코드 서열을 분석한 결과 이러한 동정 결과를 뒷받침하였다. 이들 모기류 유충에 대해 곤충병원세균인 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis (BtI)가 살충효과를 보였으며 유사한 B. thuringiensis subsp. kurstaki에 비해 우수하였다. 한편 곤충의 면역억제를 유발하여 B. thuringiensis의 병원력을 높인다고 알려진 Xenorhabdus 세균류의 배양액을 BtI에 첨가하여 이들 모기류에 대한 살충력 증가 효과 유무를 확인하였다. 분석에 이용된 3 종류의 Xenorhabdus 세균배양액 가운데 X. ehlersii (Xe)의 배양액이 비교적 다른 세균배양액에 비해 두 종의 모기류에 대해서 BtI의 살충력을 높이는 것으로 나타났다. 이를 바탕으로 Xe 세균배양액으로부터 유기용매 추출물의 생물활성을 분석한 결과 모기의 혈구 활착행동을 뚜렷이 억제시키는 면역억제자가 존재한다는 것을 확인하였다. 본 연구는 BtI와 Xe의 두 세균을 혼합한 비티플러스 미생물제제가 한국숲모기와 줄다리집모기의 방제에 효과적이라는 것을 제시한다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제16권5호
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• pp.348-351
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• 1988

Bacillus thuringiensis, 19 serovars가 $\alpha$-amylase를 생산하는지를 검색했다. 각 균주를 soluble starch가 포함된 배지에서 배양하여 iodine 용액으로 확인한 결과 B. thuringiensis serovar thuringiensis alesti, kurstaki, sotto, kenya, entomocidus, morrisoni, tolworthi, toumanoffi, thompsoni, pakistani, israelensis와 indiana는 아밀라제를 생산하였으며, 이중에서 serovar. thuringiensis가 생산을 제일 많이 했고, serovar. alesti와 tollworthi는 제일 낮았다. B. thuringiensis var, israelensis가 생산하는 $\alpha$-아밀라제의 활성은 pH6.7~7.2와 55~$65^{\circ}C$에서 제일 높았고, 효소생산은 LB배지보다 기본배지 (1.0% bacto-peptone, 0. 3% beef-extract, 0.3% yeast-extract, 0.5% NaCl, 0.3% $K_2$HPO$_4$와 0.1% KH$_2$PO$_4$, 0.2% Soluble Starch에 금속이온인 0.012% CaCl$_2$.2$H_2O$$_2$, 0.005% MnCl$_2$, 0.03% MgCl$_2$.7$H_2O$을 첨가한 배지에서 제일 높았다. 배양후 4시간 됐을 때에 $\alpha$-amylase 생산이 제일 높았다. Starch 배지에서는 0.6units/$m\ell$, glucose 배지에서는 0.43units/$m\ell$씩 생산되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권3호
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• pp.303-307
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• 1991

B.thuringiensis subsp. darmstadiensis 73E10-2의 내독소에 존재하는 hemolysin이 Sephadex G-100 gel filtration과 DEAE-cellulose ion exchange column chromatography에 의해 정제되었으며, 그 순도는 SDS-PAGE와 Ouchterlony test로 확인하였다. 그 결과 정제된 hemolysin의 분자량은 64KDa 의 단백질 이었으며, in vivo 상태에서는 전혀 모기유충에 독작용을 나타내지 않았다는 점이 28KDa 단백질의 차이가 있었다. 또한 정제된 hemolysin과 B.thuringiensis subsp. israelensis의 내독소를 효소항체법으로 검토해 본 결과 양단백질 사이에는 면역학적으로 전혀 상관이 없었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제4권4호
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• pp.290-295
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• 1994

30 monoclonal antibodies (mAbs) were produced against Bacillus thuringiensis subsp. canadensis. Out of the these, 6 mAbs were selected for further studies. SDS-PAGE analyses of sonicated antigens of 10 8. thuringiensis strains showed that they generally had both predominant protein antigens of molecular weights of 45 kilodalton (kd) except for shandogiensis and konkukian, and 37kd except for israelensis, tochigiensis, and shandogiensis, respectively. These results indicate that 4kd and 37kd may be important for demonstrating common antigens except for a few strains of B. thuringiensis. In comparing the result of the westem blot using mAbs with that of using polyclonal antibodies to canadensis, we found that immunoreactive proteins of 99 and 39 kd were identified as common antigens, which might act as antigenic determinants, and might be surface or flagella antigens. Reactivities of mAbs with 41 strains of 8. thuringiensis demonstrated that mAbs of C-1, C-3, C-4, C-S and C-6 except C-2 did not recognize epitopes of thuringiensis, but that all of the mAbs recognized epitopes of galleriae, kurstaki, dakota, tolrJokuensis, silo, toguchini, and leesis. The potential applications of the mAbs we produced would be useful tools for the clarification of taxonomy, investigation of antigenic relationship between B. thuringiensis strains, and localization of specific surface and flagella antigens.