A trypsin inhibitor was isolated and purified from Azismatis Rhizoma which has been used as a galenic for diuretic and antiphlogistic. Purification was carried out by 0-80% saturated ammonium sulfate salting out, DEAE- cellulose ion exchange chromatogrphy, Sephadex G-150 gel filtration. The molecular weight of Alismatis Rhizoma trypsin inhibitor(ARTI) was estimated to be about 23,000 Da by gel filtration and SDS-PAGE, it must be monomer. ARTI was stable at 0~6$0^{\circ}C$, but at higher temperature its activity was decreased about 35%. When benzoyl-dl-arginine p-nitroanilide was used as a substrate of trypsin, half-maximal inhibition of ARTI was observed at 0.071 $\mu$M. ARTI inhibited the hydrolysis of trypsin non-competitively and Km value was 0.81 $\mu$M.
Screening was performed to isolate biopolymer-producing microorganisms from natural sources. The bacteriological characteristics of this strain and physicochemical properties of the biopolymer produced were investigated. The bacterial strain was identified as a Bacillus coagulans. Crude biopolymer treated with ethanol and actone was purified to fraction I and II by ion exchange chromatography and gel chromatography (Shephadex G-100 and Shepharose CL-2B). Analysis of chemical composition and various color reaction revealed that the polymer is composed of amino acids. It was confirmed that fraction II is a homopolymer of glutamic acid and fraction I is a homopolymer of lysine by analysis data of amino acid analyzer, GC and IR.
Bacillus subtilis K-4-3, which produces considerable amount of $\beta$-glucanase was selected among extracellular $\beta$-glucanase-producing bacteria isolated from soil. $\beta$-glucanase was purified by ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-100 gel filtration and DEAE-sephacel ion exchange chromatography. The purified enzyme revealed a single band by polyacrylamide gel electrophoresis and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Its molecular weight was estimated to be 17000 dalton by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The optimum pH and temperature of the purified $\beta$-glucanase were 7.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The enzyme was strongly inhibited by 1.0mM of $Fe^{3+}$, and activated by 1.0mm of $Li^{}47+$. The absence of glucose after thin layer chromatography of reaction products revealed that the purified enzyme contains no cellobiase or laminarinbiase activity. The loberation of ki, tri-and tetra-saccharide as reaction products can be explained by endoaction of the enzyme.
$\beta$-Galactosidase of Bifidobacterium longum KCTC 3215 was studied on the production, purification, and characterization. Optimum conditions for the enzyme production were in the medium of 1.0% lactose as carbon source, initial pH 7.0 and in 17 hours of cultivation at $37^{\circ}C$. The enzyme was purified 9.25 folds by protamine sulfate precipitation, ammonium sulfate fractionation, DEAE-Sephadex A-50 ion exchange chromatography and Sephadex G-150 gel filtration. The maximal P-galactosidase activity was observed at pH 6.5 and at the temperature of $40^{\circ}C$ This enzyme was stable at pH 6.0-8.5. Metal ions such as $Ca^{2+} \;and \; Co^{2+}$, 2-mercaptoethanol, cysteine, and glutathione stimulated B-galactosidase activity. The enzyme activity was inhibited by addition of $Mg^{2+}, Fe^{2+}, Cs^{1+}, Li^{1+}$, DETA, galactose, and $\rho$-chloromercuribenzoic acid. The kinetics of o-nitrophenyl-$\beta$-D-galactopyranoside and lactose were $K_m$ = 1.66 mM, $V_{max}= 0.30 mM/min\cdot mg\cdot protein$ and $KK_m = 3.18 mM, \; V_{max}= 0.42 mM/min \cdot mg\cdot$ protein, respectively. The molecular weight of native enzyme was about 360, 000 dalton and the enzyme consisted of 2 identical subunits with a molecular weight of 180, 000.
To elucidate enzymatic properties of a-glactosidase (EC 3.2.1.22) from Asp. niger, a-galactosidase from wheat bran culture was purified by ammonium sulfate fractionation, ion exchange chromatography and gel filtration. And then its enzymatic propeties were investigated. The highest level of $\alpha$-galactosidase activity was obtained when Asp. niger was grown on wheat bran medium at $30^{\circ}C$ for 96 hours. The $\alpha$-galactosidase was purified by 23.7 fold by ammonium sulfate fractionation, ion exchange chromatography on DEAE-Celluose and Sephadex A-50, and gel filtration on Sephadex G-150 and its specific activity was 1,229 Unitslmg protein and the yield was 14% of the total activity of wheat bran culture. The purified $\alpha$-galactosidase was found to be homogeneous by polyacrylamide gel electrophoresis and HPLC. The $\alpha$-galactosidase was a tetrameric glycoprotein which consisted of identical subunits with molelcular weight of 28,000 each by SDS-PAGE and isoelectric point was determined analytical isoelectric focusing to be pH 4.6. The optimal temperature and pH for the $\alpha$-galactosidase activity were $40^{\circ}C$ and pH 6.5, respectively, and 54% of its activity was lost by heating at $60^{\circ}C$ for 10 mins, It was appeared to have higher affinty to raffinose than to stachyose. The K, value and activation energy of $\alpha$-galactosidase were 5.0 mM and 8.515 Kcal per mole for p-nitrophenyl- $\alpha$--D-galactopyranoside, respectively.
The automatic system for $^{67}Ga$ production using for the diagnosis of malignant tumor has been developed. A solvent extraction and an ion exchange chromatography were used for the separation $^{67}Ga$ from the irradiated enriched $^{68}Zn$. This system consisted of a solvent separation unit which was composed of micro conductivity cells, air supply tubes, solvent transfer tubes, solenoid valves and glasses, a PLC based controller and a PMU user interface unit for automation. The radiation exposure to the workers and the production time can both be reduced by employing this system during the $^{67}Ga$ production phase. After all, the mass production of $^{67}Ga$ with high efficiency was possible.
The optimum conditions for the production of xylanase from Bacillus agaradhaerens DK-2386 have been previously investigated. In this study xylanase was purified by ammonium sulfate precipitation and CM-sepharose ion exchange chromatography. The molecular mass of the xylanase as determined by SDS-PAGE was 23 kDa in a form of monomeric enzyme. The optimum pH and temperature for xylanase activity was 6.0 and $60^{\circ}C$, respectively. Xylanase activity was increased by the addition of EDTA and then stabilized at $40^{\circ}C$ for 24 h. The maximum xylanase activity was obtained when Birchwood xylan was used as a substrate and the $V_{max}$ and $K_m$ were $49,724{\mu}mol/min$ and 6.08 mg/ml, respectively.
The antibacterial protein gene, nuecin was expressed in Sf9 cells using baculovirus expression vector system (BEVS). The antibactetial activity of mature nuecin against Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum, Ralstonia solanacearum and Pseudomonas tolaasii was significantly high, demonstrating that nuecin had a wider antibacterial spectrum on gram negative and positive bacteria. The result appears to be superior to other antibacterial peptide, attacin. The nuecin was purified by SP-sepharose and Mono Q HR ion-exchange chromatography, and then by Superdex 200 HR 10/30 column. The purified nuecin is quite stable at 80$\^{C}$ and 100$\^{C}$ for several hours of incubation and in a wide pH range (pH 2-12).
Amyloid plaque is a product of aggregation of ${\beta}$-amyloid peptide ($A{\beta}$) and is an important factor in the pathogenesis of Alzheimer's Disease (AD). $A{\beta}$ is a major component of amyloid plaque and vascular deposits in the AD brain. The enzyme ${\beta}$-secretase is required for the production of $A{\beta}$; thus, prevention of the formation of $A{\beta}$ through the inhibition of ${\beta}$-secretase is a major focus in the study of the treatment of AD. In this study, we investigated ${\beta}$-secretase inhibitory activity of an Arctoscopus japonicus peptide. An Alcalase hydrolysate had the highest ${\beta}$-secretase inhibitory activity. A ${\beta}$-secretase inhibitory activity peptide was separated using ion exchange column chromatography (carboxy-methyl: CM, quaternary methyl ammonium: QMA) and reverse phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) on a C18 column. The $IC_{50}$ value of the purified peptide was $248.2{\pm}1.73{\mu}g/mL$. The ${\beta}$-secretase inhibitory peptide was identified as a six amino acid residue of Gly-Pro-Val-Gly-Ala-Pro (MW: 497.27 Da). In cell viability experiments, the final purified fraction, the carboxy-methyl ion exchange column fraction (CM-F1) showed no significant cytotoxic effect in SH-SY5Y cells at concentrations below $100{\mu}g/mL$ in 24 h. The results of this study suggest that peptides separated from Arctoscopus japonicus may be beneficial as ${\beta}$-secretase inhibitor compounds in functional foods.
Choi, Chung-Sik;Yoe, Sung-Moon;Kim, Eung-Seok;Chae, Kwon-Seok;Kim, Hak R.
Animal cells and systems
/
v.1
no.3
/
pp.457-462
/
1997
Antibacterial activity was induced in the haemolymph of the common cutworm, Spodoptera litura by the artificial injection of E, coli Ek132. Antibacterial peptides were purified from the immunized haemolymph by heat treatment, ion-exchange chromatography, gel filtration chromatography, and reverse phase FPLC, and their physicochemical characteristics were investigated. These purified antibacterial peptides designated as spodopsin la and Ib were named after Spodoptera litura. Spodopsin la and Ib had the apparent molecular masses of 3, 823 Da and 3, 886 Da, respectively, and about 20% of the sequences had basic amino acids, such as lysine and arginine but no cysteine. Also, spodopsin l was confirmed to be a new member of cecropin family having a similar amino acid sequence to cecropin of lepidopteran insects, such as Bombyx mori and Hyalophora cecropia. The purified spodopsin was active against gram-positive as well as gram-negative bacteria.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.