The Agrobacterium tumefaciens mediated gene transfer is widely used to generate genetic transformation of plants and transient assay of temporal exogenous gene expression. Syringe infiltration system into tobacco (Nicotiana benthamiana) leaves is a powerful tool for transient expression of target protein to study protein localization, protein-protein binding and protein production. However, the protocol and technical information of transient gene expression, especially double strand RNA (dsRNA), in tobacco using Agrobacterium is not well known. Recently, dsRNA is crucial for insecticidal effect on destructive agronomic pest such as Corn rootworm. In this study, we investigated the factor influencing the dsRNA expression efficiency of syringe agro-infiltration in tobacco. To search the best combination for dsRNA transient expression in tobacco, applied two Agrobacterium cell lines and three plant vector systems. The efficiency of dsRNA expression has estimated by real-time PCR and digital PCR. As a result, pHellsgate12 vector constructs showed the most effective accumulation of dsRNA in the cell. These results indicated that the efficiency of dsRNA expression was depending on the kind of vector rather than Agrobacterium cells. In summary, the optimized combination of transient dsRNA expression system in tobacco might be useful to in vivo dsRNA expression for functional study and risk assessment of dsRNA.
Xenorhabdus 및 Photorhabdus 두 곤충병원세균은 곤충의 아이코사노이드 생합성을 억제하여 면역작용을 저하시키는 인자로 알려지고 있다. 본 연구는 이들 세균의 배양액을 이용하여 배추좀나방(Plutella xylostella)을 방제하는 새로운 생화학농약을 개발하려 추진되었다. 두 세균 배양액의 단독 처리는 배추좀나방의 생존력에 뚜렷한 영향을 주지 않았다. 그러나 비티(Bacillus thuringiensis) 생물농약과 혼합하여 처리할 경우 비티 단독 처리에 비해 배추좀나방 4령충에 대해서 현격하게 높은 병원성 증가효과를 주었다. 배양액의 세균 활성을 조사하기 위해 이 세균 배양액을 고온 멸균 및 $0.2\;{\mu}m$ 여과 멸균 처리하였다. 이렇게 처리된 멸균 배양액은 세균이 생존했던 배양액과 차이 없이 비티 생물농약의 병원력을 상승시켰다. X. nematophila 배양액에서 유래된 세 가지 대사물질도 세균배양액과 유사한 비티 병원력 상승효과를 보였다. 야외 배추좀나방 방제 시험에서도 세균배양액은 비티 생물농약의 방제가를 상승시키는 효과를 나타냈다.
The pathological effect of the Bacillus thuringiensis Cry $\delta$-endotoxins on susceptible insect larvae had extensive damage on the midgut epithelial cells. In this study, an ex vivo assay was devised for assessing the insecticidal potency of the cloned Cry4B mosquito-larvicidal protein that is expressed in Escherichia coli. Determination of toxicity was carried out by using a cell viability assay on the midguts that were dissected from 5-day old Aedes aegypti mosquito larvae. After incubation with the toxin proteins, the number of viable epithelial cells was determined photometrically by monitoring the quantity of the bioreduced formazan product at 490 nm. The results showed that the 65-kDa trypsin-activated Cry4B toxin exhibited toxic potency ca. 3.5 times higher than the 130-kDa Cry4B protoxin. However, the trypsin-treated products of the non-bioactive Cry4B mutant (R158A) and the lepidopteran-specific Cry1Aa toxin displayed relatively no ex vivo activity on the mosquito-larval midguts. The ex vivo cytotoxicity studies presented here confirms data that was obtained in bioassays.
꽈리허리노린재(Acanthocoris sordidus)는 흡즙성 해충으로서 가지과 작물을 주로 가해하며, 국내에서는 일부 고추농가에 피해를 주고 있다. 이러한 꽈리허리노린재를 방제하기 위하여 유기합성 살충제 20 종류와 7 종류의 친환경유기농자재를 이용하여 살충력을 알아보았다. 그 결과, 꽈리허리노린재 성충의 경우에는 약제처리 72시간이 경과한 후에 유기인계 살충제인 펜티온이 100%의 살충율을 나타내었고, 페니트로티온과 펜토에이트는 95% 이상의 살충률을 나타내었다. 3령 약충의 경우에는 펜티온과 페니트로티온, 펜토에이트가 72시간이 경과한 후에 100%의 살충력을 나타내었다. 반면에 친환경유기농자재의 경우에는 고삼추출물이 80% 함유된 약제를 처리한 결과 성충이 약제처리 72시간 후 53.3%의 살충력을 나타내었을 뿐 다른 약제들은 대부분 살충력이 없거나 저조하였다.
우리나라의 본농초기 해충군과 비래성 멸구류를 통합관리할 수 있는 살충제의 체계적 처리법을 확립하기 위하여 이앙직접 carbofuran 토양혼화처리후에 벼멸구 비래시기와 buprofezin 처리시기 및 처리약량을 달리하였을때의 벼멸구 밀도 억제효과를 조사하였다. 이앙직전 carbofuran (3G) 토양혼화처리의 효과로부터 벗어난 7월중 비래 벼멸구에 대한 buprofezin (25% WP)의 적정처리시기는 7월말~8월초이었다. 이때 buprofezin 의처리약량은 관행처리량보다 훨씬 낮은 수준인 7.0 g a.i./10a으로도 벼멸구의 증식밀도를 효과적으로억제할 수 있었다. 이와 같은 carbofuran 토양혼화처리와 buprofezin 처리는 흰등멸구에 대해서도 탁월한 방제효과를 나타내었으며 멸구류를 천적인 거미밀도에 대해서는 영향을 미치지않았다. 따라서 우리나라의 수도해충 발생특성을 고려할 때 carbofuran 과 buprofezin을 이용한 살충제 체계적 처리 즉, 이앙직전 carbofuran 토양혼화처리후 7월말-8월초 bupro-fezin처리는 본 논초기 발생해충들 및 비래성 멸구류를 효과적으로 방제할 수 있는 방제체계로 생각된다.
살충성 독소 결정을 생산하는 Bacillus thuringiensis BT17 균주를 분리하였으며, 16S rRNA 유전자 분석 결과 B. thuringiensis serovar colmeri로 동정하였다. BT17 균주는 인시목 유충에 대해 살충성을 보이는 결정성 독소를 soybean meal과 skim milk를 포함하는 배지에서 $30^{\circ}C$, 280 rpm으로 36시간 진탕배양하였을 때 효율적으로 생산하였다. 200 L fermentor에서 배양하였을 때 균수는 24시간에 최대가 되었으나 독소 결정의 수는 36시간까지 증가하였다. 액상의 미생물 살충제 제품을 제조하였으며, 배양액을 $20^{\circ}C$에서 3개월간 보관시 독소 결정의 수는 보관 초기보다 2배까지 증가하였다. BT17 균주가 포함된 살충제 제품의 효능은 파밤나방보다 배추좀나방에서 좋았으며 동물에 대한 독성은 거의 없었다.
Park, Hae Jin;Jeong, Seon Hye;Lee, Hyun Ju;Lee, Na Ra;Chung, Yong Jae
보존과학회지
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제36권4호
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pp.255-263
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2020
Paulownia coreana has various advantages as a convenient workability, aesthetic outlook, beautiful patterns, low weight and high strength, and its permeability. P. coreana has been widely used for storage but there are no empirical researches proving its functionality in a field of conservation science until now. In this study, the seasonal and daily temperature and relative humidity control, and microbe and insect repellent activity were evaluated under the controlled and uncontrolled circumstances from 2015 to 2016. The results showed to be mainly excellent in relative humidity control and the buffering effect was good to adjust the average daily relative humidity range from the outside. With respect to the antimicrobial properties of P. coreana, we observed that its water-soluble extract produced visible zones of inhibition against five bacteria. However, it was difficult to predict the antimicrobial and/or insecticidal properties.
Insecticidal effect or sulfuryl fluoride ($SO_2F_2$) to cigarette beetle, Lasiodema serricorne (F.), was studied in two different containers, one was 1m$^3$(without cardboard block) and the other was 0.5m$^3$(with cardboard block). Adults and larvae were transferred into a small metal can before placed in the containers. Each can was held for 8, 24, 48, 72, and 96 hours after $SO_2F_2$(10, 20, 30, and 40 g/$\ell$) treatment. All adults were killed in an 1m$^3$container. Larval mortality was 99 to 100% when the dosage of SO$_2$F$_2$was 10 and 20 g/$\ell$. Cardboard was attached between two 0.5m$^3$ containers ; one was fumigation area and the other was insect area. SO$_2$F$_2$ penetrated cardboard within 24 hours in most trials. $SO_2F_2$could affect all adults and larvae regardless of their susceptibility. All adults were killed at 8 hours in a 0.5m$^3$ container. But low mortality of larvae was recorded at 8 hours when small dosage was treated (30% in 10 g/$\ell$, 87.2% in 20 g/$\ell$). The mortality was increased as SO$_2$F$_2$ dosage increased. Six different metals (stainless, copper, brass, aluminum, iron, and zinc) were also tested to study metal corrosion and discoloration. No corrosion and discoloration was observed in most metals treated with $SO_2F_2$.
본 연구는 표고원목재배시 골목을 가해하는 털두꺼비하늘소(Moechotypa diphysis) 성충에 대해서 25종 monoterpenoid의 훈증독성, 접촉독성 및 산란기피효과를 조사하였다. 훈증독성은 20(equation omitted)/954 ml (공기)의 농도에서 1, 8-cineole, fenchone, pulegone, (equation omitted)-terpinene이, 10(equation omitted)/954 ml (공기)의 농도에서는 pulegone과 (equation omitted)-terpinene이, 그리고 5(equation omitted)/954 m1 (공기)의 농도에서는 pulegone만이 100%의 살충률을 나타내었다. 접촉독성은 pulegone만이 70%의 살충률을 보인 것 외에 대부분의 monoterpenoid에서 활성이 낮거나 없었다. 후각계를 이용한 기피반응은 1 (equation omitted)에서 bornylacetate, carvacrol, 1, 8-cineole, menthol은 기피반응을 보였고, 반면 citronellol은 유인반응을 보였다. 실내에서 수행한 산란기피효과는 25개의 monoterpenoid중 1,000ppm의 농도에서 carveol, geraniol, perillyl alcohol이 각각 82.1%, 78.3%, 87.5%의 효과를 보였다. 이 3 화합물을 가지고 야외포장 적용시험을 수행한 결과 10,000ppm과 1,000ppm의 농도에서 3일째까지 geraniol이 가장 효과가 좋았으나 잔효성은 없는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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